藥用植物中萜類化合物改善膽汁淤積性肝損傷的作用及機制研究進展

袁若蘭，張議文，沈佳妍，王丹，陳倩，王濤，劉夢揚（天津中醫藥大學中醫藥研究院，天津 300190）

膽汁淤積（cholestasis）是指肝內外各種原因引起膽汁生成、分泌和排泄障礙，導致膽汁不能正常流入十二指腸而逆流回血液循環的一種病理狀態。常見病因有遺傳性疾病、藥物性肝損傷、病毒性或酒精性肝炎、膽管缺失綜合征、原發性膽汁性肝硬化（PBC）、原發性硬化性膽管炎（PSC）、膽管系統損傷、腫瘤等[1]。臨床表現主要為黃疸、皮膚瘙癢、尿色加深、疲勞乏力等，并伴有血清堿性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰轉移酶（γ-GT）、總膽紅素（TBIL）和總膽汁酸（TBA）水平的異常升高。如果不及時治療，膽汁會淤積在細胞內，損傷肝臟和機體。持續性膽汁淤積可能會發展成肝纖維化、肝硬化，最終導致肝功能衰竭[2]。

生理條件下，肝內膽固醇轉化生成初級膽汁酸后，隨膽汁流入腸道被腸道菌群代謝為次級膽汁酸，95%以上的膽汁酸被腸道重吸收后通過門靜脈重回肝臟，剩下的5%隨糞便排出體外，這一代謝過程稱為膽汁酸的腸肝循環[3]。當藥物、病毒、遺傳性疾病、機械性損傷等多種因素刺激肝臟時，膽汁酸腸肝循環中斷，膽汁流動受阻，大量毒性膽汁成分（主要為疏水性膽汁酸等）潴留肝內，形成膽汁淤積。膽汁淤積發生后，損傷的肝細胞內ALP、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、γ-GT、TBIL等大量外泄，炎性細胞浸潤增加，膽管上皮細胞大量增殖、管壁變厚，肝臟細胞和膽管上皮細胞的基本結構破壞、功能受損，引發肝臟大面積壞死[4-5]。

1 膽汁淤積性肝損傷的病理機制及治療藥物

1.1 膽汁淤積性肝損傷的病理機制

目前研究認為，膽汁淤積性肝損傷的發生主要與膽汁酸穩態失衡、炎癥反應、氧化應激三個方面密切相關。首先，膽汁酸根據分子內基團的不同性質一般分為親水性和疏水性兩種，親水性膽汁酸有熊去氧膽酸（UDCA）、牛磺熊去氧膽酸（TUDCA）等，疏水性膽汁酸包括膽酸（CA）、石膽酸（LCA）、鵝脫氧膽酸（CDCA）、脫氧膽酸（DCA）和甘氨鵝脫氧膽酸（GCDCA）等[6]。肝臟膽汁酸合成和轉運的整個過程由膽汁酸合成酶膽固醇7α羥化酶（CYP7A1）、膽固醇8β羥化酶（CYP8B1）、膽固醇7β羥化酶（CYP7B1）、膽固醇27α羥化酶（CYP27A1），肝臟基底外側轉運體鈉離子-牛磺膽酸共轉運多肽（NTCP）、有機陰離子轉運多肽（OATPs）、有機溶質轉運體-α（OST-α）、有機溶質轉運體-β（OST-β）、多藥耐藥相關蛋白3（MRP3）、多藥耐藥相關蛋白4（MRP4）、膽管膜轉運體膽汁酸鹽輸出泵（BSEP）、多藥耐藥相關蛋白2（MRP2）等綜合調控。正常情況下，機體內各類膽汁酸含量相對穩定，但多種因素誘導引發肝臟膽汁酸代謝失衡時，會造成肝臟內淤積大量疏水性膽汁酸CA、DCA、LCA等，損傷肝臟和膽管細胞，導致肝臟和膽管內膽汁酸合成、轉運蛋白表達異常，正常代謝受阻，膽汁酸穩態失衡，進而加重膽汁淤積肝損傷[7]。

膽汁淤積時，源于腸道的革蘭氏陰性菌釋放的磷脂多糖（LPS）刺激肝臟細胞、膽管細胞等釋放白介素6（IL-6）、白介素8（IL-8）、單核細胞趨化蛋白1（MCP-1）等細胞因子。此外，LPS能夠結合到LPS結合蛋白（LBP）上，與分化抗原簇14（CD14）和髓樣分化蛋白2（MD2）形成復合物，再與肝細胞膜上的Toll樣受體4（TLR4）結合，進一步激活核轉錄因子κB（NFκB）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）等炎癥通路，促進肝臟炎性損傷[6]。此外，膽汁淤積狀態下疏水性膽汁酸在肝內大量累積，也能直接激活炎癥信號通路及多種促炎介質，損傷肝臟細胞。DCA和CDCA可以通過激活表皮生長因子受體（EGFR）增加小鼠肝臟內早期生長反應因子（Egr-1）的表達，進一步上調細胞間黏附分子-1（ICAM-1）和巨噬細胞炎癥蛋白2（MIP-2）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素10（IL-10）、白介素1β（IL-1β）的表達，并加速中性粒細胞等免疫細胞的激活與聚集，加重肝臟病理性炎癥損傷[4，8-9]。

正常情況下，機體內活性氧（ROS）的生成和清除處于動態平衡。當機體處于病理狀態時，ROS生成過多導致體內氧化和抗氧化作用失衡，最終引起氧化應激。膽汁淤積時肝臟內累積大量疏水性膽汁酸，導致肝臟線粒體功能障礙，產生大量ROS。同時顯著抑制超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物（GSH-Px）等抗氧化酶的活性，過量的ROS會破壞肝細胞的基本結構和功能，進一步加重肝臟氧化損傷[6，9-10]。

1.2 膽汁淤積性肝病的治療藥物

目前，西醫臨床上用于治療膽汁淤積的藥物主要有UDCA、奧貝膽酸（OCA）、貝特類（非諾貝特、苯扎貝特等）。UDCA屬于親水性膽汁酸，是國際批準用于治療膽汁淤積的唯一的一線藥物，但對40%左右的PBC患者不應答或應答較差。OCA是CDCA的衍生物，能激活膽汁酸受體FXR，改善應答不佳的PBC癥狀，但使用時常伴有瘙癢等多種不良反應。貝特類藥物屬于過氧化物酶體增殖物激活受體（PPARs）激動劑，能有效改善PBC患者生化指標和遠期預后，但存在腎毒性、肝毒性等風險[11]。近年來，中醫藥治療膽汁淤積性肝病成效顯著。多數保肝利膽的中藥里都含有非常豐富的萜類化合物，且生物活性強、毒性低。因此，萜類化合物在治療膽汁淤積性肝病方面有很大的潛力和研發前景。

萜類化合物是指由1個或1個以上異戊二烯單位（C5單位）為基本骨架構成的化合物，按照其分子中的異戊二烯單位的多少可以分為單萜、倍半萜、二萜、三萜等。萜類化合物廣泛存在于唇形科、傘形科、樟科、五加科、桔梗科等植物中。萜類化合物能通過抗炎、抗氧化、抗凋亡和調節膽汁酸代謝等多種途徑改善膽汁淤積性肝損傷。本文對近年來天然萜類化合物治療膽汁淤積性肝損傷的研究進展進行綜述，以期為基于萜類化合物治療膽汁淤積性肝病相關藥物的研發和臨床應用提供參考。

2 單萜

2.1 環烯醚萜類

2.1.1 胡黃連苷Ⅱ 胡黃連苷Ⅱ是從玄參科植物胡黃連中提取的環烯醚萜類化合物，具有抗炎、抗氧化、抗凋亡等多種藥理作用，在膽汁淤積、肝臟損傷、器質性缺血再灌注損傷等疾病的防治中有很好的效果[12]。Li等[13-14]采用α-萘異硫氰酸酯（ANIT）構建體內膽汁淤積模型，并給予小鼠胡黃連苷Ⅱ進行治療，結果ANIT小鼠血清中TBIL、TBA、AST、ALT、γ-GT異常升高，小鼠肝臟出現局部壞死、炎性因子浸潤等組織學明顯改變；胡黃連苷Ⅱ治療組能顯著抑制ANIT引起的血清生化指標的異常升高，改善肝臟組織學損傷，且呈劑量依賴性；進一步研究發現，胡黃連苷Ⅱ通過誘導法尼醇X受體（FXR）激活，從而抑制膽汁酸合成酶CYP7A1、CYP8B1的表達，上調膽汁酸轉運體BSEP、NTCP和膽汁酸代謝酶尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶1A1（UGT1A1）、膽鹽硫酸基轉移酶2A1（SULT2A1）的表達水平，進而調節膽汁酸穩態；機制為胡黃連苷Ⅱ通過抑制ERK1/2-LKB1-AMPK磷酸化，調節FXR及其他膽汁酸代謝相關基因，減輕膽汁淤積性肝損傷。Piao等[12]研究表明，胡黃連苷Ⅱ還能通過影響FXR和JAK-STAT3信號通路，降低機體氧化應激、炎癥和細胞凋亡水平，緩解肝損傷。

2.1.2 龍膽苦苷 龍膽苦苷屬于環烯醚萜類化合物，廣泛存在于龍膽、秦艽等龍膽屬植物中，有清熱利濕、保肝利膽等功效[15]。研究發現，龍膽苦苷對肝膽系統保護作用顯著。在膽管結扎（BDL）誘導的大鼠膽汁淤積模型中，龍膽苦苷通過激活雄甾烷受體（CAR）進一步調控膜轉運蛋白MRP3、MRP4的表達，保護肝臟功能[16]。高宇[17]的實驗顯示，川西獐芽菜及其主要成分龍膽苦苷能夠通過上調肝細胞毛細膽管膜面的膽汁酸轉運蛋白BSEP、MRP2，增加肝內膽汁酸和毒素外排，減緩膽汁淤積，進而保護肝臟。Tang等[18]發現，龍膽苦苷能通過調控CYP7A1、CYP27A1、MRP3、頂端鈉依賴性膽鹽轉運體（ASBT）等基因的表達水平，緩解ANIT導致的小鼠膽汁酸代謝失調。同樣，Han等[19]通過蛋白質組學和代謝組學分析ANIT大鼠的血清、肝臟等樣本發現，龍膽苦苷治療能抑制大鼠膽汁酸代謝物的異常升高，恢復大鼠肝臟內抗氧化及膽汁酸轉運相關蛋白的表達、減少疏水性膽汁酸的累積，緩解膽汁淤積性肝損傷。因此，龍膽苦苷的保肝作用可能與其通過FXR調控膽汁酸合成、轉運相關基因有關。

2.1.3 獐芽菜苷 獐芽菜苷是環烯醚萜類化合物，廣泛存在于獐芽菜、秦艽等藥用植物中。研究發現，獐芽菜苷具有抗炎殺菌、保護肝臟等多種藥理活性，在膽汁淤積、肝炎等一系列肝膽疾病中療效顯著[20-22]。Yang等[20]研究發現，獐芽菜苷能顯著抑制模型組小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL的異常升高，降低肝內β-鼠膽酸（β-MCA）、CA等膽汁酸的含量，并調節MRP2、OST-β、NTCP、有機陰離子轉運多肽1A1（OATP1A1）等膽汁酸轉運相關基因，恢復被破壞的膽汁酸穩態。此外，獐芽菜苷還顯著下調了肝臟促炎因子TNF-α、IL-6、小鼠角化細胞衍生因子（mKC）、MIP-2和ICAM-1的表達。因此，獐芽菜苷能夠通過調控膽汁酸循環、抑制炎癥反應，緩解ANIT誘導的小鼠膽汁淤積性肝損傷。

2.1.4 獐芽菜苦苷 獐芽菜苦苷大多存在于獐芽菜、青葉膽等龍膽科植物中，是環氧環烯醚萜苷類化合物。據報道，獐芽菜苦苷能通過抗炎、抗氧化、調節脂質代謝等藥理活性防治肝炎、脂肪肝等一系列肝臟疾病[23]。此外，獐芽菜苦苷對膽汁淤積也有良好的保護作用。Feng等[24]發現，給予大鼠獐芽菜苦苷后，血清中結合型膽汁酸TCA和TDCA含量升高、游離型膽汁酸α-MCA含量減少，肝損傷指標ALP顯著下調。肝臟中與膽汁酸代謝相關的基因CYP8B1、多藥耐藥基因1（MDR1）、MRP3、尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸轉移酶2B（UGT2B）和谷胱甘肽S轉移酶A1（GSTA1）等的表達水平明顯升高。因此，獐芽菜苦苷能夠通過調控膽汁酸合成、外排等相關基因，增加疏水性膽汁酸的水溶性，促進共軛膽汁酸的清除，降低細胞毒性，進而緩解膽汁淤積。

2.1.5 京尼平苷和京尼平 京尼平苷是從梔子、牛膝等植物中提取的一種環烯醚萜類化合物，生物活性廣泛，常被用于治療膽汁淤積等多種肝膽疾病。京尼平苷是大黃-梔子聯合用藥或者茵梔黃注射液的主要成分，能顯著緩解膽汁淤積，保護肝臟[25-26]。Wang等[27]的研究顯示，京尼平苷在調控膽汁酸代謝相關基因，抑制膽汁酸合成和攝取的同時增加外排，使肝內累積的毒性膽汁酸明顯減少，進而緩解ANIT誘導的大鼠膽汁淤積。此外，Tan等[28]發現，京尼平苷顯著抑制了ANIT小鼠血清生化指標的異常升高，并調節膽汁酸代謝相關基因OATP1、OATP2、NTCP等的表達水平，減輕了炎癥和肝臟的病理損傷，抗炎機制可能是通過抑制STAT3和NF-κB信號通路實現的。京尼平是京尼平苷經腸道細菌源酶β-D-糖苷酶水解后的苷元，研究表明，京尼平對膽汁淤積的保護作用也同樣顯著，其作用機制主要是通過上調肝臟MRP2的表達實現的[29-30]。

2.1.6 京尼平苷酸 京尼平苷酸是一種環烯醚萜葡萄糖苷化合物，主要存在于茜草科植物中。京尼平苷酸對膽汁淤積性肝損傷也具有良好的保護作用。研究顯示，京尼平苷酸能劑量依賴性地緩解急性肝內膽汁淤積，其機制可能是激活FXR及其靶基因MRP2、BSEP的表達，增加肝臟膽汁酸流出量，減輕肝臟毒性[31]。陳浩等[32]研究也表明，京尼平苷酸能通過激活SIRT1-FXR信號通路，調控膽汁酸代謝基因，恢復完整的膽汁酸肝腸循環。此外，京尼平苷酸還能激活小分子異源二聚體伴侶受體SHP，SHP通過競爭性結合肝同源受體LRH1的位點，進而下調膽汁酸合成限速酶CYP7A1的表達，抑制膽汁酸的過度合成，發揮抗膽汁淤積作用[33]。

2.1.7 梓醇 梓醇是從玄參科植物地黃根部提取的一種環烯醚萜類化合物，是地黃的主要活性成分之一。梓醇具有抗炎、抗氧化、抗細胞凋亡等多種藥理活性，在CCL4、BDL等誘導的肝纖維化動物模型中顯示出肝臟保護作用[34-35]。Gao等[34]研究發現，梓醇能有效抑制BDL小鼠血清肝損傷相關指標的異常升高，并降低TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥因子的表達水平，改善肝細胞損傷和炎性細胞浸潤；此外，梓醇治療組小鼠肝細胞線粒體ATP含量和膜電位顯著升高，線粒體損傷得以緩解。研究發現，給予梓醇后小鼠體內ROS生成和丙二醛（MDA）表達明顯減少、谷光甘肽（GSH）含量升高，Bcl-2相關X蛋白（BAX）、細胞色素C和半胱氨酸蛋白酶3（caspase 3）表達水平顯著下調，抗凋亡蛋白B淋巴細胞瘤-2（Bcl-2）表達水平顯著上調[34]。因此，梓醇能夠通過恢復線粒體膜電位、抑制氧化應激和炎癥反應相關的細胞凋亡來改善BDL誘導的膽汁淤積性肝損傷。

2.2 雙環單萜類——芍藥苷

芍藥苷是赤芍、白芍等藥用植物中的一類單萜類化合物，在非酒精性肝病、缺血再灌注性肝損傷等多種肝臟疾病中有廣泛的藥理功效[36]。報道發現，芍藥苷預處理能增加ANIT誘導的膽汁淤積小鼠體內白蛋白含量，保護肝臟。此外，芍藥苷治療組小鼠血清肝損傷指標表達水平降低，肝組織中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-18及炎癥小體通路相關蛋白核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白（NLRP3）、凋亡相關斑點樣蛋白（ASC）和半胱氨酸蛋白酶1（caspase 1）表達下調，肝臟病理學損傷得到明顯改善。進一步研究發現，芍藥苷能夠通過誘導SIRT1-FXR表達調控膽汁酸代謝，并抑制NF-κB/NLRP3炎癥通路造成的炎癥損傷，從而緩解膽汁淤積[37]。此外，芍藥苷也能通過減少肝臟NF-κB、IL-1β的表達，抑制肝臟膽汁酸轉運體NTCP、BSEP以及MRP2的異常表達，減輕ANIT誘導的大鼠膽汁淤積性肝損傷[38]。另一項體內實驗發現，芍藥苷還能恢復大鼠膽汁流量，并抑制體內NO和MDA生成、增加GSH含量。進一步研究發現，芍藥苷是通過抑制NADPH氧化酶-4（NOX4）活性，減輕肝臟氧化應激，從而減輕肝臟損傷[37，39]。Chen等[40]的實驗表明，芍藥苷還能通過調控PI3K/Akt依賴途徑激活核因子E2-相關因子2（Nrf2）表達，促進GSH合成，改善膽汁淤積。綜上所述，芍藥苷可以通過抗炎、抗氧化、調控膽汁酸代謝等多途徑改善膽汁淤積性肝損傷。

3 倍半萜——青蒿素及其衍生物

青蒿素是從蒿屬藥用植物黃花蒿中提取分離的一種倍半萜內酯類化合物，具有多種藥理活性，因優異的抗瘧特性備受關注[41]。青蒿素及其衍生物可通過抗炎、抗氧化途徑治療多種肝臟疾病[42]。青蒿素對膽汁淤積性肝損傷具有明顯的保護作用。Alkhedaide等[43]研究發現，青蒿素處理后小鼠血清AST、ALP、TBIL等的表達水平明顯低于石膽酸（LCA）誘導的模型組小鼠，肝臟病理損傷程度明顯減輕：一方面，青蒿素能夠增加抗氧化物質GSH的表達，減輕肝臟氧化應激；另一方面，青蒿素能顯著激活FXR和CAR，上調MRP4、OATP2、OATP4等膽汁酸轉運體的表達。恢復膽汁酸代謝，減輕肝毒性。因此，青蒿素可通過抗氧化應激和調控膽汁酸穩態，緩解LCA誘導的小鼠膽汁淤積性肝損傷。

4 二萜

4.1 二萜醌類——丹參酮ⅡA

丹參酮ⅡA是從唇形科植物丹參根部提取的二萜醌類成分，有抗炎、抗纖維化等多種藥理活性。近年來，丹參酮ⅡA在藥物性肝損傷、膽汁淤積性肝損傷等一系列肝臟疾病中防治效果顯著[44-45]。研究表明，丹參酮ⅡA能顯著降低小鼠血清肝損傷相關指標的水平，通過激活孕烷X受體（PXR）進而調控LCA代謝相關酶細胞色素P450 3A11（CYP3A11）、細胞色素P450 3A13（CYP3A13）和MDR1的表達水平，劑量依賴性地緩解膽汁淤積性肝損傷[46]。Yang等[45]研究發現，利福平會抑制膽汁酸轉運體NTCP的正常表達，造成膽汁淤積性肝損傷。利福平處理的同時給予丹參酮ⅡA治療，NTCP水平顯著增加，膽汁酸轉運增強，肝損傷減輕。此外，丹參酮ⅡA還能通過減少氧化應激、抑制JNK活化，在體外抑制甘氨鵝去氧膽酸（GCDC）引起的大鼠原代肝細胞凋亡[44]。另有研究證實，丹參酮ⅡA還可通過激活HOTAIR-Nrf2-MRP2/4信號通路，增加MRP2和MRP4的表達，進而保護肝臟[47]。

4.2 雙環二萜類——穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯

穿心蓮內酯是中藥穿心蓮的主要活性成分，是一類典型的二環雙萜類內酯，對多種膽汁淤積模型有明顯的保護作用。穿心蓮內酯預處理能劑量依賴性地抑制ANIT小鼠體內NF-κB/COX-2信號通路激活，減輕炎癥反應。此外，穿心蓮內酯還能通過上調肝臟中沉默信息調控因子1（SIRT1）和Nrf2的表達，調控下游靶點，改善氧化應激[48]。Wang等[49]研究發現，穿心蓮內酯能顯著降低ANIT誘導的小鼠血清肝損傷指標和炎性因子的水平，減少肝臟環氧合酶-2（COX-2）和NF-κB的表達，上調肝臟SOD、GSH和GSH-Px的同時減少MDA的積累，通過抗炎和抗氧化緩解小鼠膽汁淤積性肝損傷。此外，ANIT大鼠經穿心蓮內酯治療后，纖維化相關α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）陽性細胞和門靜脈區增殖細胞核抗原（PCNA）陽性細胞數量顯著減少。大鼠肝內膽汁酸合成限速酶CYP7A1、基底外側外排轉運蛋白ATP結合盒轉運蛋白C3（ABCC3）和ATP結合盒轉運蛋白C4（ABCC4）表達水平下調，而PXR和細胞色素P450 3A2（CYP3A2）的表達增加，膽汁酸代謝和毒性膽汁成分清除能力增強[50]。此外，薛蓮芳等[51]用苯甲酸雌二醇誘導孕鼠發生妊娠期肝內膽汁淤積（ICP），給予穿心蓮內酯治療后，孕鼠膽汁酸代謝和肝功能損傷得到顯著改善，子代生存率明顯提升。

脫水穿心蓮內酯是穿心蓮的另一種二萜內酯類成分，對BDL引起的膽汁淤積也具有保護作用。Weng等[52]給BDL小鼠回盲腸部位靜脈注射脫水穿心蓮內酯，模擬膽道梗阻引起的更嚴重的膽汁淤積性肝損傷，結果顯示，脫水穿心蓮內酯能限制LPS和TLR4結合并進一步抑制NF-κB信號通路的調控作用，降低模型組小鼠肝臟炎性因子表達水平，減少膽管增生及膽道壞死，顯著緩解膽汁淤積性肝損傷。另有研究發現，在BDL小鼠和人肝星狀細胞（LX-2）中，脫水穿心蓮內酯也能通過抑制肝星狀細胞（HSC）激活并阻斷轉化生長因子-β（TGF-β）促纖維化通路，減少BDL誘導的膽汁淤積性肝纖維化的形成[53]。

5 三萜

5.1 四環三萜類

5.1.1 黃芪甲苷 黃芪甲苷屬于三萜類皂苷，有抗病毒、抗炎、抗氧化等多種藥理作用，是傳統中藥黃芪的主要活性成分。研究表明，黃芪湯對膽汁淤積性肝病有良好的治療效果，而其中主要組分黃芪甲苷也具有一定的抗膽汁淤積作用[54]。在BDL大鼠膽汁淤積性肝纖維化模型中，給予黃芪甲苷治療能夠明顯抑制膽管細胞的異常增殖、膠原過度沉積和羥脯氨酸（Hyp）含量的異常升高，并顯著減少造血干細胞的活化，進而減輕肝臟纖維化程度。作用機制為黃芪甲苷通過增強Smad7表達抑制TGF-β信號通路的激活，顯著下調α-SMA、TGF-β1和MCP-1的表達水平，抑制成纖維細胞的激活和募集。進一步的機制研究證實，黃芪甲苷能阻斷Notch信號通路，抑制肝臟祖細胞（HPC）向膽道上皮細胞的異常分化，從而有效降低膽道肝纖維化[55]。另有報道稱，黃芪甲苷Ⅳ和阿魏酸聯合使用，可通過抑制TGF-β信號通路，激活Nrf2途徑協同誘導LX-2失活，進而顯著降低膽管結扎性肝纖維化[56]。

5.1.2 人參皂苷 人參皂苷是一類廣泛存在于人參屬藥材中的四環三萜類皂苷，有抗炎、抗纖維化等多種藥理作用，在CCl4、LPS等引起的多種體外肝細胞或者動物肝臟損傷模型中都具有顯著的肝保護作用[57-58]。研究表明，給予ANIT大鼠人參皂苷Rg1治療后，血清中膽汁淤積和肝損傷標志物的異常升高被抑制，炎性因子的表達水平降低，肝組織病理損傷顯著減輕。此外，人參皂苷Rg1還可以恢復ANIT大鼠肝臟代謝酶細胞色素P450 3A4（CYP3A4）、細胞色素P450 2B10（CYP2B10）等的表達水平，調控膽汁酸代謝。進一步研究發現，人參皂苷Rg1通過激活FXR增加其下游靶基因BSEP、MRP2和NTCP的表達，改善膽汁分泌，緩解膽汁淤積性肝損傷[59]。在BDL誘導的小鼠肝纖維化模型中，人參皂苷Rg1治療可顯著降低核內NF-κB蛋白水平，減弱其對可溶性血管細胞黏附分子-1（VCAM-1）的基因表達啟動活性，緩解機體炎性損傷，從而減輕膽汁淤積性肝纖維化[57]。Xu等[60]給予大鼠17-乙炔雌二醇誘導肝內膽汁淤積，結果顯示，人參皂苷治療能顯著抑制模型組大鼠肝臟炎性因子的表達、增加抗氧化酶SOD的活性，減輕肝臟炎癥反應和氧化應激損傷，緩解肝內膽汁淤積。此外，人參皂苷還能調控促凋亡分子Bax和抗凋亡分子BCL-2的表達平衡，抑制膽汁淤積性肝缺血再灌注損傷引起的細胞凋亡，進而保護肝臟[61]。

5.2 五環三萜類

5.2.1 桔梗皂苷D 桔梗皂苷D是從桔梗科藥用植物桔梗中提取分離的一種五環三萜皂苷類化合物，具有保肝、抗炎等多種藥理活性。研究表明，桔梗皂苷D能劑量依賴性地降低血清ALT、AST、TBIL水平，降低脂質過氧化和氧化應激指標硫代巴比妥酸活性物質（TBARS）、NO的表達水平，抑制膽汁淤積引起的抗氧化酶GSH、SOD的耗竭，機制為抑制NF-κB激活下調一氧化氮合成酶（iNOS）表達，降低肝臟NO水平。因此，桔梗皂苷D通過降低氧化應激，改善肝細胞凋亡和組織纖維化，從而減輕膽汁淤積性肝損傷[62]。

5.2.2 甘草酸和甘草次酸 甘草酸是中藥甘草的主要有效成分，屬于五環三萜類化合物，具有多種生物活性。沈淑嬌等[63]發現，甘草水煎液能通過增加膽汁酸代謝和轉運酶CYP3A11、UGT1A1等的表達，降低膽汁淤積小鼠的肝內膽汁酸負荷，減輕肝內膽汁淤積。甘草次酸由甘草酸經腸道菌群代謝產生，也是甘草的主要活性成分之一。在ANIT誘導的膽汁淤積性肝損傷模型中，甘草酸和甘草次酸預處理可逆轉多種共軛膽汁酸水平的異常改變，膽汁酸轉運和代謝蛋白CYP7A1、微粒體三酰甘油轉移蛋白（MTTP）、乙酰輔酶A乙酰轉移酶2（ACAT2）等的異常表達，恢復膽汁酸循環，減輕肝損傷[64]。此外，甘草酸和甘草次酸還能降低ANIT大鼠血清膽汁淤積相關指標的水平。通過檢測酮洛酚葡萄糖醛酸結合物（KPI）的累積排泄發現，甘草酸和甘草次酸能增加膽汁流量，緩解膽管阻塞引起的肝臟損傷[65]。另有研究表明，甘草次酸（β型）能通過誘導SIRT1激活FXR及其下游基因SHP、BSEP的表達，上調Nrf2及其介導的MRP2、MRP3和MRP4水平，改善肝細胞內膽酸穩態失衡，減輕ANIT誘導的大鼠膽汁淤積性肝損傷[66]。Gumpricht等[67]用GCDC誘導離體肝細胞凋亡模型，同時給予甘草酸和甘草次酸（β型）處理。結果發現，兩者均能抑制ROS生成，減少線粒體膜通透性轉變（MPT）和抑制細胞色素C的釋放。而甘草次酸（β型）能顯著抑制半胱氨酸蛋白酶10（caspase 10）、caspase 3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）和JNK等幾種促凋亡信號的激活，減輕細胞凋亡和壞死。另有研究表明，甘草酸能調節膽汁的代謝和排泄、抑制炎癥，有效緩解ANIT誘導的急性膽管消失綜合征（AVBDS）的初期損傷[68]。此外，甘草酸還能通過PXR上調CYP3A的表達、激活SHP，并競爭性抑制CYP7A1的轉錄，進而調控膽汁酸的生物合成和代謝，有效抑制LCA導致的肝損傷[69]。Zheng等[70]研究發現，甘草酸衍生物TY501能激活FXR，并上調其介導的BSEP、MRP2和NTCP的表達，在體內或體外模型中緩解LCA引起的膽汁淤積性肝損傷。

5.2.3 雷公藤紅素 雷公藤紅素是從傳統中藥雷公藤根皮提取分離的一種五環三萜類化合物，具有廣泛的生物活性，在多種膽汁淤積性肝損傷模型中均顯示出保護作用。研究表明，雷公藤紅素能抑制血清生化指標的異常變化，并通過降低基質金屬蛋白酶MMP-2和MMP-9的表達減輕肝臟毒性、恢復膽汁酸的正常流動，進而改善大鼠妊娠期肝內膽汁淤積[71]。另一項實驗也顯示，雷公藤紅素能降低ANIT小鼠血清肝損傷指標的水平，并抑制炎性因子的異常升高，恢復膽汁酸合成和轉運相關基因的表達，減輕肝臟炎性細胞浸潤和壞死，從而緩解膽汁淤積性肝損傷；此外，雷公藤紅素還能下調肝損傷和炎癥相關指標的表達，同時調控肝臟膽汁酸代謝相關基因CYP7A1、NTCP、MRP4等的水平，來治療硫代乙酰胺（TAA）引起的小鼠膽汁淤積性肝損傷；機制研究表明，雷公藤紅素可能是通過激活SIRT1-FXR通路，調節SIRT1下游靶基因FXR、NF-κB、P53的表達水平，發揮肝保護作用。相同的調控機制在DCA誘導的小鼠原代肝細胞膽汁淤積模型中也得到了證實[72]。

5.2.4 齊墩果酸 齊墩果酸是廣泛存在于青葉膽、女貞子、獐芽菜等植物中的一種五環三萜類化合物，具有抗炎、抗氧化等多種藥理作用。齊墩果酸在石膽酸、乙醇等誘導的多種體內體外肝損傷模型中均有良好的肝保護作用[73-74]。研究表明，低劑量齊墩果酸治療可提高小鼠存活率，降低血清肝損傷指標和肝臟TBA含量，減輕肝壞死；機制研究表明，齊墩果酸可能是通過激活Nrf2，進而上調MRP2、MRP3和MRP4的表達，從而緩解LCA誘導的小鼠膽汁淤積性肝損傷[73]。除此之外，齊墩果酸還能通過拮抗FXR來減輕BDL小鼠的梗阻性膽汁淤積[75]。Chai等[76]研究發現，口服齊墩果酸可顯著增加膽汁酸合成酶和肝臟代謝酶的表達，上調肝小管膜膜外排轉運蛋白和基底外側膜轉運蛋白的水平，緩解BDL大鼠的炎癥和膽汁淤積肝損傷。同樣的，在ANIT誘導的肝內膽汁淤積模型中，齊墩果酸能通過激活FXR和Nrf2調控外排轉運體的表達，發揮肝臟保護作用[77]。然而，有研究顯示，高劑量齊墩果酸反而會加重膽汁淤積，損傷肝臟[73]。因此，未來齊墩果酸的應用需要注意使用劑量，避免其潛在毒性。5.2.5 澤瀉醇B23-乙酸乙酯（AB23A） AB23A是從傳統中藥澤瀉中提取分離出來的一種五環三萜類化合物，在藥物開發中具有廣闊前景。研究表明，在ANIT誘導的膽汁淤積性肝損傷模型中，AB23A能劑量依賴性地降低膽汁酸合成酶CYP7A1和CYP8B1、肝臟攝取轉運蛋白NTCP的水平，上調外排轉運蛋白BSEP、MRP2和MDR2的表達，減輕肝臟內膽汁酸的過度積累；此外，AB23A還能上調SULT2A1、膽汁酸輔酶A連接酶（BAL）、膽酸輔酶A（BAAT）的基因表達，增加膽汁酸代謝；進一步探究發現，AB23A的肝臟保護作用主要與FXR受體的激活有關[78]。Meng等[79]研究證實，AB23A通過激活FXR上調叉頭框蛋白M1B（FOXM1B）、細胞周期蛋白D1（Cyclin D1）和細胞周期蛋白B1（Cyclin B1）的表達水平，調控膽汁酸代謝相關基因，從而促進肝細胞增殖、減輕肝臟毒性。此外，AB23A還能誘導STAT3磷酸化，促進STAT3靶基因Bcl-xl和細胞信號轉導抑制因子3（SOCS3）的表達，進而抑制肝細胞凋亡。

6 總結與展望

膽汁淤積可以發生在膽汁酸代謝過程中的任何環節，發病機制復雜，影響因素多樣。隨著膽汁淤積的加重，多種毒性膽汁成分尤其是疏水性膽汁酸在細胞內過度堆積，損傷肝臟和膽管。如果不及時治療，膽汁淤積會發展為肝纖維化、肝硬化，甚至導致肝功能衰竭。目前，臨床上用于治療膽汁淤積的藥物主要有UDCA、OCA、非諾貝特、S-腺苷蛋氨酸等。這些藥物大多療效欠佳，且存在應答不良、肝移植生存率降低、瘙癢等多種不良反應。因此，尋找和開發治療膽汁淤積的新藥非常有必要。近年來，藥用植物中的萜類化合物因在各種肝臟疾病中顯示出突出的保護作用而備受關注，也為膽汁淤積相關治療藥物的研發提供了有效潛在的前體藥物。胡黃連苷、獐芽菜苦苷、龍膽苦苷、京尼平苷酸、青蒿素、丹參酮ⅡA等主要通過調節膽汁酸代謝相關基因，恢復膽汁酸穩態，減輕肝損傷；獐芽菜苷、雷公藤紅素、齊墩果酸、梓醇等則主要夠通過抑制炎癥相關通路激活和炎性因子釋放，緩解膽汁淤積；而穿心蓮內酯、桔梗皂苷D、黃芪甲苷等則具有抗炎、抗氧化、調控膽汁酸代謝等多方面、多靶點作用，從而減輕膽汁淤積性肝損傷。目前，萜類化合物改善膽汁淤積肝損傷的具體機制還有待深入的探究。此外，為避免部分萜類化合物的潛在不良反應，保證治療效果的同時也需要在給藥劑量上進一步調整和明確。但鑒于此類化合物有良好的抗膽汁淤積活性，對近年來天然萜類化合物改善膽汁淤積性肝損傷的基礎研究進行總結和梳理仍具有重要意義。因此，本文就藥用植物中萜類成分（化學結構式見圖1）對膽汁淤積性肝損傷的改善作用及相關機制進行歸納（見表1），綜述目前防治膽汁淤積性肝損傷藥物的研究進展，顯示了天然萜類化合物在膽汁淤積性肝病治療中的廣泛應用前景，為其進一步臨床應用和新藥研發提供參考。

圖1 萜類化合物化學結構式Fig 1 Chemical structural formula of terpenoids

表1 藥用植物中萜類化合物對膽汁淤積性肝損傷的作用機制及靶點 Tab 1 Mechanism and targets of medicinal plants derived terpenoids for cholestatic liver injury

續表1