周 浩,王京鵬,姚 楠,林其娟,趙盼盼,徐寧偉,3,#,王文頗,#
(1 河北科技師范學院a農學與生物科技學院,b園藝科技學院,c海洋資源與環境學院,河北 秦皇島,066600;2 溫州城市大學;3 河北農業大學園林與旅游學院)
大葉小檗(BerberisamurensisRupr.)為小檗科(Berberidaceae)小檗屬(BerberisL.)落葉灌木,生山坡、山溝、叢林、山林,分布于我國東北、山西、內蒙古、河南西部、陜西、甘肅、山東等地[1]。大葉小檗全株含有生物堿,其根、根皮、莖、莖皮均可入藥,治療細菌性痢疾、胃腸炎、消化不良、風濕性關節炎等疾病[2~4];同時大葉小檗適應能力強,耐修剪,枝葉、花、果等具有獨特性,可廣泛應用于花壇、花境、花叢中或用作花籬、綠籬等,也可搭配其它喬木樹種造景,具有獨特的園林觀賞價值[5]。
目前有關大葉小檗的相關研究較少,范東旭[6]對大葉小檗原植物進行了生藥學鑒定,測定了大葉小檗根、莖、葉中總生物堿的含量(含量由高到低順序為根、莖、葉),同時證實大葉小檗具有良好的抑菌效果;樸惠順等[7]采用二甲苯、巴豆油致小鼠耳廓炎癥、扭體法和熱板法制作疼痛模型研究大葉小檗的藥用價值,結果表明,大葉小檗根的水、乙醇提取物均具有較好的抗炎鎮痛作用;武永進等[2]分析了大葉小檗根的化學成分,從大葉小檗根的石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯萃取物中分離鑒定了11個單體化合物;李貴生等[8]探討了大葉小檗嫩枝全光霧扦插繁殖技術,試驗結果表明最適合大葉小檗嫩枝扦插的處理組合為ABT 1號100 mg/L,處理時間為30 min;吳東旭[5]利用大葉小檗的生物學特性和種子繁育技術,總結了批量生產大葉小檗的方法,強調了大葉小檗在遼西地區園林應用、荒山綠化和生物多樣性保護上的重要應用價值。以上研究主要集中在大葉小檗的藥用及觀賞等方面,對其果實及種子營養物質的研究未見報道。為此,筆者測定大葉小檗種子和果實中營養物質的組分,旨在為大葉小檗的開發利用提供基礎資料。
大葉小檗果實測定試驗于2020年10月進行。果實原產地為河北省青龍縣祖山地區,2020年9月收集果實裝入密封袋中,于4 ℃溫度下儲存備用。
大葉小檗種子測定試驗于2021年3月進行。將采集的大葉小檗果實用水搓洗,去除果皮及果肉,留下飽滿的種子,在實驗室中自然風干后去雜,保存在廣口瓶中備用。
1.2.1大葉小檗種子的形態觀察與組分測定 種子外部形態觀察:觀察種子的形狀、顏色等[9]。
種子大小及單粒質量的測定:隨機抽取50粒種子,用游標卡尺和分析天平準確測定種子的大小(包括長、寬、厚)和質量,3次重復[10]。
種子中水的質量分數測定:根據樣品烘干后失去水分的質量,以種子干質量為基礎計算水分的質量分數[11]。
種子可溶性糖質量分數測定:蒽酮比色法[11]。
種子蛋白質質量分數的測定:考馬斯亮藍法[12]。
種子游離氨基酸質量分數的測定:茚三酮顯色法[12]。
種子總糖質量分數的測定:3,5-二硝基水楊酸法[12]。
種子粗脂肪質量分數的測定:殘余法[12]。
種子灰分質量分數測定:采用馬福爐灰化法,以樣品干質量為基礎計算樣品中灰分質量分數[13]。
1.2.2大葉小檗果實果肉的組分
果肉中蛋白質質量分數的測定:考馬斯亮藍法[12]。
果肉中游離氨基酸質量分數的測定:茚三酮顯色法[12]。
果肉中色氨酸質量分數的測定:二羥基乙酸鹽法[11]。
果肉中賴氨酸質量分數的測定:茚三酮溶液顯色法[11]。
果肉中總糖質量分數的測定:3,5-二硝基水楊酸法[12]。
果肉中單寧質量分數的測定:Folin-Denis法[14]。
果肉中SOD活性的測定:氮藍四唑(NBT)還原法[11]。
果肉中有機酸質量分數的測定:用水將果肉中的有機酸浸提出來,然后用堿滴定[14]。
果肉中花色素質量分數的測定:比色法[11]。
果肉中Vc質量分數的測定:2,6-二氯酚靛酚滴定法[11]。
果肉中可溶性固形物質量分數的測定:利用阿貝折射儀測定折射率,根據折射率于可溶性固形物換算表得出可溶性固形物百分質量分數。
1.2.3大葉小檗果實果肉礦質組分 大葉小檗種子樣品用高氯酸消化,礦質元素質量分數用原子吸收法測定[15,16]。
大葉小檗果實為紅色漿果,呈橢圓形,表面有白粉,內含1~2粒種子,種子外部有一層透明薄膜包裹(圖1)。種子近似楔形,一端圓鈍,一端尖銳,尖端有一圓形凹陷為種臍;種皮棕褐色,角質,色澤較暗淡(圖2)。

圖1 大葉小檗的果實 圖2 大葉小檗的種子
大葉小檗種子長5.48~6.98 mm,寬2.16~3.12 mm,厚1.40~2.24 mm,大約有92 %的種子長度分布在5.48~6.65 mm范圍之內;94%的種子寬度分布在2.34~3.06 mm范圍之內;82%的種子厚度分布在1.51~1.93 mm范圍之內;大葉小檗種子單粒質量大部分分布在13~19 mg范圍之內,約占測定種子總數的90%(表1);種子平均長寬厚分別為6.12 mm,2.73 mm和1.78 mm,平均單粒質量為17.7 mg。

表1 大葉小檗種子大小與單粒質量及其分布
對所測大葉小檗種子大小及單粒質量做相關性分析(表2)??梢钥闯龃笕~小檗種子長、寬、厚及單粒質量各性狀之間均呈極顯著正相關,尤其是單粒質量與寬度相關性較大,接近于0.9。因此,在篩選分級時可按寬度對大葉小檗種子進行分離。

表2 大葉小檗種子大小、單粒質量之間的相關性
大葉小檗種子中粗脂肪的質量分數較高,其營養物質的質量分數從高到低的排序為粗脂肪(166.9 mg/g),總糖(26.4 mg/g),可溶性糖(23.7 mg/g),蛋白質(1.2 mg/g)和游離氨基酸(0.6 mg/g),其中粗脂肪的質量分數最高,是主要的貯藏物質;種子灰分的質量分數為27.1 mg/g;水分的質量分數為88.2 mg/g(表3)。

表3 大葉小檗種子營養物質含量 mg·g-1
大葉小檗果實果肉中營養物質種類及含量豐富。營養物質的質量分數從高到低的排序為酒石酸(25.3 mg/g),蘋果酸(22.6 mg/g),總糖(17.0 mg/g),單寧(3.2 mg/g),賴氨酸(1.7 mg/g),色氨酸(0.3 mg/g),游離氨基酸(0.3 mg/g),蛋白質(0.2 mg/g),其中有機酸的質量分數最高;果肉中維生素C的質量分數為0.04 mg/g,超氧化物歧化酶(SOD)的活性為610.6 U/g,可溶性固形物的質量分數為154.6 mg/g,花色素的質量分數為4.7 U/g。
大葉小檗種子中的礦質元素中Mg的質量分數最高,為0.220 mg/g,明顯高于Zn,Mn,Cu等的質量分數;果實果肉中礦質元素Ca和Mg的質量分數最高,分別為3.206 mg/g和0.417 mg/g,明顯高于Fe,Mn,Zn等的質量分數(表5)。

表4 大葉小檗果實果肉中營養物質的質量分數

表5 大葉小檗種子和果肉中礦質元素的質量分數 mg·g-1
大葉小檗種子平均長、寬、厚分別為6.12,2.73,1.78 mm,平均單粒質量為17.7 mg,屬中型種子。種子的長、寬、厚在種子清選上有特殊重要意義,且在農業生產上,往往用其質量作為衡量種子品質的主要指標之一[17]。大葉小檗種子長、寬、厚及單粒質量各性狀之間均呈極顯著正相關。因此,在篩選分級時可按種子大小對大葉小檗種子進行分離。
據研究絕大多數植物的種子含有油脂,在自然界中油脂種子植物特別是油料作物的種子含油脂成分很高,大豆含170~200 mg/g[17]。大葉小檗種子脂肪質量分數較高,達166.9 mg/g,接近于大豆的含油量,屬于油脂種子。大葉小檗具有作為新型油料植物的潛力,能否在此方面開發利用尚需進一步試驗研究。
脂肪作為疏水性物質,其含量的增加會導致種子的水分含量下降,而種子水分是種子質量的重要指標,是種子安全貯藏的重要因素。有研究表明,一般成熟種子中水的質量分數在80~140 mg/g范圍內,各部分組織比較堅實緊密,細胞內含物呈干燥的凝膠狀態容易貯藏保存[18]。大葉小檗種子以脂肪作為主要貯藏物質,采摘后于室內風干自然保存了6個月,水的質量分數達88.2 mg/g,在容易貯藏保存范圍內。
大葉小檗果肉中有機酸質量分數較高,其中酒石酸質量分數達25.3 mg/g,蘋果酸質量分數達22.6 mg/g,而總糖的質量分數較低(17.0 mg/g),屬于酸性果實。其可溶性固形物質量分數較高(154.6 mg/g),維生素C的質量分數為0.04 mg/g,略高于蘋果(0.01 mg/g)[19]。
一直以來,刺梨被認為其Vc質量分數和SOD活性居所有蔬菜水果之冠,其SOD活性最高為546.9 U/g[20]。經研究分析,發現大葉小檗果肉的SOD活性為610.6 U/g,是刺梨的1.12倍。大葉小檗果肉中高活性的SOD有利于清除活性氧危害,從而提高果實的抗氧化能力[21],其延緩衰老的應用潛力有待進一步試驗研究。
大葉小檗果實果肉中含有Ca,Mg,Fe,Mn,Zn等礦質元素,其中Ca質量分數最高,達3.206 mg/g,比白花刺薔薇果肉中的Ca(3.372 mg/g)略低[10],但遠高于山楂(0.424~1.060 mg/g)[22]和木瓜(0.169~0.433 mg/g)[23]的含量。