尼群地平栓劑的初步研究

黃 召，施 璐，凌智群

(江漢大學醫(yī)學院藥學系，湖北 武漢 430056)

隨著藥物機制的深入研究，為地平類降壓藥物的進一步開發(fā)提供了參考[1]。尼群地平(nitrendipine，NTD)作為第二代二氫吡啶類藥物，體內(nèi)半衰期及藥效持續(xù)時間均較第一代二氫吡啶類藥物顯著延長，對外周血管選擇性約為硝苯地平的10倍，且首過作用明顯。但因二氫吡啶類藥物脂溶性強，故其生物利用度仍較低。栓劑作為一種固體制劑，采用的是非口服給藥方式，其特殊的給藥形式不僅能夠使藥物避免顯著地肝腸首關效應，提高進入體循環(huán)的有效藥量，而且能夠有效避免藥物對胃黏膜的刺激性，降低藥物不良反應發(fā)生率，增強治療效果。目前市場上NTD的口服制劑較為常見，但國內(nèi)外少有相關文獻報道，故NTD栓劑的開發(fā)具有較重要的研究價值。

1 儀器與試劑

1.1 儀 器

UV-1780雙光束紫外可見分光光度計，島津有限公司；分析天平；恒溫水浴鍋；超聲波清洗儀，昆山美美超聲儀器有限公司；氮吹儀。

1.2 藥品與試劑

尼群地平標準品購于麥卡林試劑網(wǎng)，其它化學試劑均國產(chǎn)分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 含藥栓的制備

2.1.1 NTD-β-環(huán)糊精包合物的制備

避光條件下，精密稱取0.36 g NTD標準品置于三頸瓶中，加入20 mL無水乙醇，于50 ℃恒溫水浴攪拌至完全溶解。同時精密稱取β-環(huán)糊精2.27 g，再加入50 mL純化水，50 ℃下攪拌制得β-環(huán)糊精水溶液。將β-環(huán)糊精水溶液緩慢逐滴加入到NTD標準品的醇溶液中，50 ℃恒溫攪拌反應2 h，置于4 ℃冰箱冷藏室冷卻過夜24 h，得到黃色混懸液，抽濾洗去未被包和的NTD。將所得沉淀物放入烘箱，40 ℃避光干燥4 h，得略顯淺黃色的細粉。稱重、研磨后過100目篩，避光干燥條件下儲存。

2.1.2 甘油明膠含藥栓的制備

精密稱取6 g明膠，充分浸脹30 min，于60 ℃水浴中緩慢加入21 g甘油，制成30 g甘油明膠基質(zhì)(水:明膠:甘油=1:2:7)，備用。將360 mg NTD-β-環(huán)糊精包合物與0.15 g泊洛沙姆/十二烷基硫酸鈉(SDS)/吐溫80混合均勻后，攪拌下加入到融化的甘油明膠基質(zhì)中，混合均勻。趁熱注入到涂抹有少量液狀石蠟的栓模中，放入冰箱冷藏室，于3 ℃條件下冷卻 15 min后，刮去多余部分，脫模，再用吸水紙吸干栓劑表面的水分，即得。

2.1.3 混合型脂肪酸甘油酯含藥栓的制備

精密稱取24 g混合型脂肪酸甘油酯，于60 ℃水浴中得到熔融態(tài)混合型脂肪酸甘油酯基質(zhì)。將360 mg NTD-β-環(huán)糊精包合物與0.15 g泊洛沙姆/SDS/吐溫80混合均勻后，攪拌下加入到融化的混合型脂肪酸甘油酯基質(zhì)中，混合均勻。趁熱注入到涂抹有少量潤滑劑的栓模中，放入冰箱冷藏室，于3 ℃條件下冷卻15 min后，刮去多余部分，脫模，再用吸水紙吸干栓劑表面的水分，即得。

2.2 空白栓的制備

2.2.1 甘油明膠空白栓的制備

方法同上述混合型脂肪酸甘油酯含藥栓的制備，除去添加NTD步驟。

2.2.2 混合型脂肪酸甘油酯空白栓的制備

方法同上述甘油明膠含藥栓的制備，除去添加NTD步驟。

2.3 栓劑的質(zhì)量控制

2.3.1 外觀

比較觀察由不同處方制備的NTD栓劑顏色、透明度及表面光滑度。見表1。

表1 甘油明膠栓和混合型脂肪酸甘油酯栓外觀評價結(jié)果Table 1 Appearance evaluation results of glycerol gelatin suppository and mixed fatty acid glyceride suppository

2.3.2 重量差異限度

精密稱定供試品10粒總質(zhì)量，求得平均粒重，再分別精密稱定每粒栓劑的質(zhì)量，根據(jù)公式(1)計算出每粒栓劑的重量差異限度，檢查結(jié)果顯示均為合格。

(1)

2.3.3 融變時限檢查

取3粒相同的供試品，于室溫下放置1 h后，將其分別放在融變時限儀的3個金屬套筒中固定。待水浴溫度恒定為(37.0±0.5) ℃后，將裝有栓劑的金屬套筒浸入4.5 L pH 7.4磷酸鹽緩沖液中，觀察不同NTD栓劑在溶出介質(zhì)中的融變情況，計時并真實記錄實驗現(xiàn)象。實驗結(jié)果見表2和表3。

表2 甘油明膠栓融變時限檢查結(jié)果Table 2 Inspection results of melting time limit of glycerol gelatin suppository

表3 混合型脂肪酸甘油酯栓融變時限檢查結(jié)果Table 3 Inspection results of melting time limit of mixed fatty acid glyceride suppository

2.3.4 溶出度的測定

取6種含藥栓和6種空白栓各六粒，分別投入六個裝有200 mL pH 7.4磷酸鹽緩沖液的燒杯中，控制水浴溫度保持在(37±1) ℃，攪拌條件下記時，分別于1、2、3、4、5、6、7、8 h時用注射器吸取溶出液5 mL，同時補加5 mL同溫的pH 7.4磷酸鹽緩沖液，保證溶出介質(zhì)總體積不變。待取樣完畢后，使用氮吹儀干燥樣品溶液，并加入無水乙醇5 mL，充分振蕩溶解后，用水系微孔濾膜過濾，得到6種空白栓醇溶液和6種含藥栓醇溶液。然后以空白栓醇溶液作為對照品，記錄波長為 237 nm處相應含藥栓醇溶液的吸光度，計算出NTD栓劑中主藥在不同時間內(nèi)的累積溶出度，并通過比較甘油明膠栓和混合型脂肪酸甘油酯栓中NTD在相同時間內(nèi)累積溶出度的大小，來確定NTD栓劑的適宜基質(zhì)及最佳表面活性劑。溶出度實驗數(shù)據(jù)結(jié)果顯示：在添加同種、同量表面活性劑的條件下，甘油明膠栓中NTD的累積溶出度(8 h內(nèi))均明顯高于混合型脂肪酸甘油酯栓，說明以甘油明膠作為基質(zhì)制備栓劑，在pH 7.4磷酸鹽緩沖液中，更有益于NTD栓劑中主藥的釋放與溶出；在三種甘油明膠栓中，以泊洛沙姆作為表面活性劑時，NTD栓劑中主藥在8 h內(nèi)的累計溶出度最高，高達79%，明顯高于含藥SDS栓和含藥吐溫80栓。

2.4 單枚栓劑含藥量的測定

2.4.1 NTD標準曲線的繪制

精密稱取NTD標準品5 mg， 100 mL容量瓶無水乙醇定容，即得NTD標準品母液。精密移取1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、 6 mL及8 mL的尼群地平標準品母液置于10 mL的容量瓶中并定容，制得系列NTD標準品無水乙醇溶液。以無水乙醇為空白，測定237 nm波長處不同濃度NTD標準品醇溶液的吸光度值，并記錄實驗數(shù)據(jù)。實驗數(shù)據(jù)見表4。以吸光度A為縱坐標，以濃度C為橫坐標，繪制出NTD標準曲線，經(jīng)線性回歸后得回歸方程： A=0.0569C+0.0895(R2=0.9997)。結(jié)果表明， NTD標準品無水乙醇溶液濃度在5～40 μg/mL范圍內(nèi)，線性相關良好，即符合朗伯比爾定律。

表4 尼群地平標準品醇溶液的紫外測定結(jié)果Table 4 UV determination results of NTD standard alcohol solution

2.4.2 空白栓醇溶液的制備

精密稱定6粒空白栓總質(zhì)量，然后全部切碎，混合均勻，精密稱取其中的1 g，100 mL容量瓶中充分溶解后，用無水乙醇定容，制得空白栓醇溶液。

2.4.3 含藥栓醇溶液的制備

避光實驗條件下，精密稱定含藥栓6粒總質(zhì)量，同上操作制得含藥栓醇溶液。

采用紫外分光光度法[2-6]，測定含藥栓醇溶液的吸光度。根據(jù)NTD標準曲線計算單枚栓劑平均藥物含量位5.4253 mg。

2.4.4 回收率的測定

精密稱取NTD標準品10 mg，按栓劑處方配比加入一定量的基質(zhì)和表面活性劑，配制成100μg/ml NTD母液。分別精密量取2 mL、2.5 mL和3 mL濾液置于10 ml的容量瓶中， 配制高、中、低三種濃度的NTD溶液各三份作為供試品溶液；另用移液管移取2.7 ml過濾后的NTD母液置于10 ml的容量瓶中，用無水乙醇稀釋得對照品溶液。使用紫外可見分光光度計，記錄波長237 nm處NTD溶液的吸光度，計算平均回收率為101.0%，相對標準偏差(RSD)為0.89%。實驗數(shù)據(jù)見表5。

表5 回收率實驗測定結(jié)果Table 5 Experimental results of recovery

3 結(jié) 論

NTD對外周血管的選擇性較冠脈高很多，臨床上多用于治療老年人收縮期高血壓，也用于治療原發(fā)性高血壓、繼發(fā)性高血壓及冠心病等疾病。作為脂溶性化合物，易透過細胞膜，但在胃腸液中溶解度小，半衰期較短，常用口服小劑量給藥方式，導致患者血壓波動大，用藥頻繁，依從性較差，并且顯著的肝腸首過消除還會影響藥物的體內(nèi)溶出度，限制機體對藥物的吸收，從而使藥物療效降低。Mengran Guo等[1]首次采用濕介質(zhì)研磨法制備NTD納米晶。其溶出度試驗表明，在0.3% SDS溶出介質(zhì)中，NTD納米晶的累積溶出度(20 min內(nèi))大于80%遠高于物理混合物和市售片劑，反映出制備NTD納米晶是一種提高藥物溶解度和釋放度的有效方法。

上述實驗顯示，使用甘油明膠基質(zhì)(水:明膠:甘油=1:2:7)和泊洛沙姆制備出的NTD栓劑，經(jīng)嚴格質(zhì)量控制發(fā)現(xiàn)，其在外觀、融變時限和重量差異限度三方面均符合質(zhì)量評價標準，并且其在8 h內(nèi)的累積溶出度最高，高達79%。此外，采用紫外分光光度法測定出了單枚栓劑的平均含藥量約為 5.4253 mg，平均回收率為101.0%以及相對標準偏差為0.89%。

總之，NTD栓劑的制備工藝簡單，操作方便，質(zhì)量評價合格，為進一步對NTD栓劑的制備及質(zhì)量控制提供了初步的數(shù)據(jù)依據(jù)和實驗參考。