郴州地區(qū)急性下呼吸道感染住院兒童中人腺病毒分型及流行病學(xué)特點(diǎn)分析*

陳孝會(huì) 邱麗霞

湖南省郴州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 423000

腺病毒首次被發(fā)現(xiàn)的時(shí)間為二十世紀(jì)五十年代，發(fā)現(xiàn)者為Rowe，其是通過(guò)人體的腺樣組織發(fā)現(xiàn)該病毒，因此將其命名為腺病毒[1]。急性下呼吸道感染(ALRTI)是世界范圍內(nèi)尤其是發(fā)展中國(guó)家5歲以下兒童死亡的一個(gè)重要因素，每年大約有200萬(wàn)兒童死于急性下呼吸道感染[2]，人腺病毒感染在世界范圍內(nèi)均具備較高的發(fā)病率，其可導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。在檢測(cè)人腺病毒分子生物學(xué)分型方法上，目前應(yīng)用的方法主要為PCR技術(shù)和基因測(cè)序技術(shù)[3]。目前有研究報(bào)道分析了嬰幼兒急性下呼吸道感染中腺病毒的檢測(cè)與臨床特征，但其大多均未開(kāi)展分型分析，同時(shí)關(guān)于急性下呼吸道感染患兒中，人腺病毒感染的分型情況以及相應(yīng)的流行病學(xué)特點(diǎn)分析數(shù)量并不多[4]。本次研究選取郴州市第一人民醫(yī)院兒童醫(yī)院呼吸內(nèi)科收治的518例診斷為急性下呼吸道感染兒童的鼻拭子標(biāo)本，采用PCR-熒光探針?lè)z測(cè)待測(cè)樣本中的人腺病毒以及3、7型別鑒定，探討郴州地區(qū)急性下呼吸道感染兒童中人腺病毒感染情況，3、7型別分布及相關(guān)流行病學(xué)特點(diǎn)，以及人腺病毒引起的兒童急性下呼吸道感染的臨床特點(diǎn)，為兒童人腺病毒防控提供依據(jù)，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取郴州市第一人民醫(yī)院兒童醫(yī)院呼吸內(nèi)科2021年1月1日—9月30日收治的518例診斷為急性呼吸道感染患兒。入組患兒中男310例，女208例；年齡1個(gè)月～6歲，患兒臨床癥狀及體征主要為咳嗽、咳痰、發(fā)熱、憋喘、肺部啰音等。入組患兒鼻拭子標(biāo)本均經(jīng)直接免疫熒光法檢測(cè)呼吸道相關(guān)病毒，包含呼吸道合胞病毒、流感病毒(A、B型)、副流感病毒(1、2、3型)、鼻病毒。納入標(biāo)準(zhǔn):急性下呼吸道感染診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》(第7版)[5]；經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并獲得監(jiān)護(hù)人的同意，確定研究對(duì)象及標(biāo)本收集。所有患兒痰培養(yǎng)或咽拭子培養(yǎng)為陰性，排除細(xì)菌性感染。排除標(biāo)準(zhǔn)：免疫系統(tǒng)疾病患者；凝血功能障礙患者；入組前接受抗菌藥物治療的患者；合并其他可能影響研究結(jié)果的疾病。

1.2 研究方法 病毒核酸提取：將標(biāo)本于室溫自然解凍，置漩渦振動(dòng)器上充分震蕩，取200μl混合液放天隆科技病毒核酸提取板中上機(jī)自動(dòng)提取核酸。病毒核酸檢測(cè)：采用湖南圣湘生物科技有限公司生產(chǎn)的腺病毒及腺病毒 3、7 型核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?檢測(cè)待測(cè)樣本中的人腺病毒以及3、7型別鑒定。呼吸道病毒篩查試劑使用DiagnosticHybrids，Inc.海德診斷有限公司的七項(xiàng)呼吸道病毒檢測(cè)試劑盒(免疫熒光法)，項(xiàng)目包含呼吸道合胞病毒、流感病毒(A、B型)、副流感病毒(1、2、3型)、鼻病毒。

1.3 觀察指標(biāo) (1)本組患兒人腺病毒陽(yáng)性率、性別與年齡情況；(2)人腺病毒的基因分型結(jié)果；(3)人腺病毒混合感染情況；(4)不同臨床特征呼吸道感染患兒的人腺病毒感染情況。

2 結(jié)果

2.1 本組患兒人腺病毒陽(yáng)性情況 本組患兒中人腺病毒陽(yáng)性率為10.04%(52/518)，見(jiàn)表1。

表1 本組患兒的人腺病毒陽(yáng)性率情況

2.2 人腺病毒的基因分型結(jié)果分析 人腺病毒陽(yáng)性樣品序列主要為人腺病毒7型與3型，見(jiàn)表2。

表2 人腺病毒的基因分型結(jié)果分析

2.3 人腺病毒混合感染情況分析 52份人腺病毒陽(yáng)性樣品中5份為單純感染，47份為混合感染，主要和呼吸道合胞病毒、人鼻病毒混合感染，見(jiàn)表3。

表3 人腺病毒混合感染情況分析

2.4 不同臨床特征呼吸道感染患兒的人腺病毒感染情況分析 52份人腺病毒陽(yáng)性患兒中診斷為肺炎46例，支氣管炎3例，咳喘待查3例；人腺病毒感染患兒與非感染患兒的臨床癥狀差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表4。

表4 不同臨床特征呼吸道感染患兒的人腺病毒感染情況分析

3 討論

兒童急性下呼吸道感染以嬰幼兒為主要群體，尤其是6個(gè)月以內(nèi)的嬰兒，其發(fā)病率相對(duì)較高[6]。人腺病毒一般會(huì)造成呼吸系統(tǒng)不適，對(duì)嚙齒類動(dòng)物有致癌能力，或能轉(zhuǎn)化體外培養(yǎng)的嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞，但對(duì)人體不出現(xiàn)致癌性。目前我市未開(kāi)展人腺病毒核酸檢測(cè)，通過(guò)PCR-熒光探針?lè)z測(cè)人腺病毒，根據(jù)檢出率可為此項(xiàng)目的開(kāi)展與否提供數(shù)據(jù)支撐。針對(duì)3、7型腺病毒核配區(qū)設(shè)計(jì)的特異性引物和特異熒光探針對(duì)3、7型腺病毒進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)檢出情況，可為我市對(duì)3、7型腺病毒的防治提供依據(jù)。本研究報(bào)道中，人腺病毒的陽(yáng)性率為10.04%，與前人研究報(bào)道中12.50%的結(jié)果基本相符[7]。2012—2013年深圳市因呼吸道疾病住院的兒童中HAdV-7感染占HAdVs感染總?cè)藬?shù)的36.3%,僅次于HAdV-3(46.3%)[8]。本研究結(jié)果顯示，郴州地區(qū)急性下呼吸道感染住院兒童感染的腺病毒分型主要為3型人腺病毒與7型人腺病毒，但是7型人腺病毒(Hadv-7)為46.15%，多于3型人腺病毒(Hadv-3)的28.85%，其次為未確定型。要確定該未確定型有賴于對(duì)其開(kāi)展全基因組的擴(kuò)增，通過(guò)全基因水平對(duì)其實(shí)施進(jìn)化和重組分析[9]。本研究結(jié)果顯示，人腺病毒感染患兒的疾病類型以肺炎為主，52份人腺病毒陽(yáng)性患兒中診斷為肺炎46例，支氣管炎3例，咳喘待查3例；人腺病毒感染患兒與非感染患兒的臨床癥狀無(wú)明顯差異。但其具備的合并感染率處于較高水平，因此對(duì)于人腺病毒感染的病原學(xué)意義和肺炎或嚴(yán)重呼吸道感染之間的相關(guān)性，還需要開(kāi)展進(jìn)一步研究予以分析[10]。

綜上所述，郴州地區(qū)急性下呼吸道感染兒童中人腺病毒陽(yáng)性率較高，主要類型為3、7型人腺病毒。人腺病毒主要型別分布和前人研究基本一致，只是優(yōu)勢(shì)株發(fā)生變化，提示人腺病毒流行可能容易出現(xiàn)優(yōu)勢(shì)株更迭情況，同時(shí)人腺病毒感染的地域差異影響還需開(kāi)展進(jìn)一步分析。