膠質母細胞瘤組織RBM8A表達與病人預后及替莫唑胺化療敏感性的關系

王張立 吳曉旭 崔 陽 王丹妹 包春艷

膠質母細胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）是顱內常見的惡性腫瘤，易復發，預后差，平均生存時間僅17 個月左右。腫瘤增殖快、侵襲性強及高耐藥性是GBM 預后差的主要原因。近年來，探索GBM 的生物學標志物成為研究的熱點。RBM8A 是高度保守的RNA結合基序（RNA inding motif，RBM）家族成員之一，在無義介導的mRNA 降解（nonsense-mediated mRNA decay，NMD）、基因的可變剪接、細胞周期調控等過程中起重要作用。研究發現，RBM8A 可以調控信號轉導及轉錄激活蛋白3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）通路、核轉錄因子-κB（nuclear transcription factor-κB，NF-κB）信號通路和MAPKs 通路等，參與多種腫瘤的發生、發展。本文探討GBM 組織RBM8A 表達與病人預后及替莫唑胺（temozolomide，TMZ）化療敏感性的關系。

1 資料與方法

1.1 標本來源 選取2015 年6 月至2020 年6 月手術切除的、經術后病理確診的130例GBM組織，其中男78 例，女52 例；年齡20～77 歲，平均（55.01±10.02）歲。術前均未接受放/化療。130 例種，78 例術后接受替TMZ化療。選取顱腦損傷減壓術中切取的非腫瘤腦組織20 例為對照，其中男12 例，女8 例；年齡29～58歲，平均（54.88±8.97）歲。

1.2 免疫組化染色檢測組織RBM8A 的表達10%甲醛溶液固定標本，石蠟包埋并制備切片（4 μm）。根據免疫組化試劑盒（北京索萊寶科技有限公司）說明書進行操作。先脫蠟，隨后用檸檬酸鈉抗原修復液進行抗原修復，再用封閉液封閉2 h。加入兔抗人RBM8A（1:500，上海柯雷生物科技有限公司）溫室孵育2 h，PBS 洗滌2 次，加入二抗。DAB 顯色、蘇木精復染，顯微鏡下觀察RBM8A 表達（圖1）。每張切片隨機選擇5個高倍鏡（×200）視野觀察。染色評分由染色強度評分（無著色0 分、淺棕色1 分、中棕色2分、深棕色3分）和染色細胞百分比評分（無染色為0分；<25%為1 分；25%～75%為2 分；>75%為3 分）相乘得出，4～9分為高表達。……