三陰性乳腺癌超聲表現及其與細胞角蛋白5/6、BRCA1 表達相關性分析

蔣 南， 金 壯， 于 馨， 高 越， 蘇曉妮， 李 玥， 雷 裕， 曹軍英

1. 北部戰區總醫院 超聲診斷科，遼寧 沈陽110016；2. 大連醫科大學北部戰區總醫院研究生培養基地，遼寧 沈陽110016

乳腺癌是影響全球女性的最常見的惡性腫瘤之一，其中，三陰性乳腺癌(triple negative breast cancer，TNBC)約占12% ~20%[1]，是一種高度惡性的腫瘤亞型，其特點是缺乏雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕 激 素 受 體(progesterone re-ceptor，PR)和人類表皮生長因子受體2(human epidermal receptor 2，HER-2)的表達[2]。 TNBC 分化差，腫瘤生長速度快，侵襲性強，存活率低，缺乏特定的激素靶向治療，與早期復發或遠處轉移的較高風險有關，故預后差[3]。 細胞角蛋白5/6(cytokeratin 5/6，CK5/6)為一種高分子量的細胞角蛋白，在TNBC 中陽性率為57% ~67%，被認為是識別該病的重要分子標記物，可能是影響TNBC 預后的獨立因素[4-6]。BRCA1 蛋白在腫瘤發展中有一定影響，基因突變后的表達或高表達可削弱抑癌基因的作用[7]，但目前有關TNBC 中BRCA1 突變的相關報道較少見。 盡管，TNBC 在腫瘤和病理學領域中研究較多[1，3]，但關于其超聲表現的文獻報道較少，且缺乏特異性，故診斷困難。 本研究旨在探討TNBC 患者超聲表現及其與CK5/6、BRCA1 蛋白的關系，為TNBC 診斷、治療和預后評估提供參考依據。 現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取自2018 年1 月至2021 年12 月在北部戰區總醫院手術且經病理證實的165 例乳腺癌(單發腫瘤)女性患者為研究對象。術前均在本院接受超聲乳腺腫瘤定位檢查且彩色多普勒信息全面。 所有患者根據PR、ER、HER-2 的表達結果分為TNBC 組(PR、ER、HER-2 均為陰性，n ＝62)與非TNBC 組(PR、ER、HER-2 中任意1 項呈陽性，n ＝103)。 排除標準:(1)超聲檢查前接受內分泌治療或新輔助化療；(2)超聲檢查前已做乳腺切除；(3)病理結果不明確；(4)合并其他腫瘤。TNBC 組患者年齡42 ~63 歲，平均年齡(54.77 ±8.12)歲；非TNBC 組患者年齡46 ~ 66 歲，平均年齡(55.36 ±9.78)歲。 兩組患者年齡比較，差異無統計學意義(P ＞0.05)。 本研究為回顧性分析，且經我院醫學倫理委員會批準。

1.2 儀器與方法 使用GE Logiq E9、Philips iU22等彩色多普勒超聲診斷儀，線陣探頭，頻率4 ~15 MHz?；颊呷⊙雠P位，對雙側乳腺進行全面掃查，觀察腫瘤大小、于皮膚方位、邊緣、形態、有無微鈣化及后方回聲等超聲表現；彩色多普勒超聲觀察腫瘤內部及周邊血流情況。 腫瘤病理采用SP 法測定標本中的ER、PR、HER-2、CK5/6 及BRCA1 的表達水平。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0 統計學軟件對數據進行處理。 計量資料用均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t 檢驗。 計數資料用例(百分率)表示，組間比較采用χ2檢驗。 以P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組超聲表現比較 TNBC 組腫塊邊緣清晰、后方回聲增強以及呈富血供的比例均顯著高于非TNBC 組，發生微鈣化的比例明顯低于非TNBC組，差異均有統計學意義(P ＜0.05)。 見表1、圖1。

表1 兩組患者超聲表現比較/例(百分率/%)

圖1 TNBC 組與非TNBC 組的超聲表現(a、b.TNBC 組患者，超聲示腫瘤形態不規則，邊緣清晰，后方回聲增強，富血供；c、d. 非TNBC 組患者，超聲示腫瘤形態不規則，邊緣模糊，后方回聲衰減，乏血供)

2.2 不同CK5/6、BRCA1 表達TNBC 的超聲表現 62 例TNBC 患者中CK5/6 表達陽性38 例(61.3%)， BRCA1 表 達 陽 性19 例(30.6%)。CK5/6表達陽性者的縱橫比≤1、邊緣清晰、形態規則比例顯著高于陰性者，差異有統計學意義(P ＜0.05)。 BRCA1 表達陰性者后方回聲增強和富血供比例明顯高于陽性者，差異有統計學意義(P ＜0.05)。 見表2、3，圖2。

表2 不同CK5/6 表達TNBC 患者的超聲表現情況比較/例(百分率/%)

3 討論

TNBC 在所有乳腺癌中占比相對較小，但由于其較強的侵襲性和缺乏分子靶點治療，因此，病死率較高[8-9]。 大部分TNBC 分化程度低，病理分級高，預后不良。 與其他乳腺癌亞型相比，TNBC 的患者具有更高的復發風險，臨床應提高對該病的重視程度。

本研究結果發現，病灶邊緣、后方回聲、有無微鈣化和血流分級這4 個超聲表現在TNBC 與其他乳腺癌亞型中具有一定差異。 有研究報道，TNBC 患者中病灶邊緣清晰占比大于非TNBC 患者[10-11]，本研究結果與之相符。 這與惡性腫瘤邊緣模糊的超聲表現不同，也是造成該病漏診的原因之一。 此外，本研究還發現，TNBC 患者中病灶后方回聲增強占比大于其他乳腺癌亞型，這與陳霞等[5]研究結果相符。 病灶內部成分決定后方回聲，當成纖維細胞含量減少時，吸收超聲波能力差，導致TNBC 后方回聲增強。 本研究結果顯示，TNBC 病灶具有較低的微鈣化率，這與近年其他學者研究結果相符[5，7，10]。 微鈣 化 的 形 成 主 要 與 組 織 的 壞 死 有關[12]。 此外，本研究中TNBC 組腫塊多數呈富血供(61.3%)，與楊繼輝等[13]研究結果相符。

表3 不同BRCA1 表達TNBC 患者的超聲表現情況比較/例(百分率/%)

圖2 TNBC 患者乳腺組織的蛋白表達(a.CK5/6 的表達，免疫組織化學20 倍；b.BRCA1 的表達，免疫組織化學40 倍)

CK5/6 通常是TNBC 免疫組織化學檢測的標志物之一。 有研究報道，CK5/6 的表達往往提示預后不良[14]。 本研究結果發現，CK5/6 表達中超聲縱橫比≤1 的患者比例較多(63.2%)，與楊潔等[4]研究結果相近(62.3%)。 縱橫比＞1 多為腫瘤早期超聲表現，當病情進展病灶呈無規律多方向生長時，垂直于皮膚和(或)肌肉生長的阻力大于平行生長，最終導致縱橫比≤1[15]。 有研究報道，CK5/6表達陽性的TNBC 病灶邊界清晰與不清晰比例相差較小(57.4% 比42.6%)[4]。 本研究中，CK5/6表達陽性的TNBC 病灶邊界清晰與不清晰比例相同(50.0%比50.0%)。 因此，TNBC 的病灶邊界清晰不能說明CK5/6 表達陽性。 TNBC 病灶各方向生長速度不同，且病理特點為邊緣呈推擠樣，故形態可表現為不規則。 本研究結果顯示，CK5/6 表達的病灶形態多以不規則為主(P ＜0.05)，這與楊潔等[4]、陳霞等[5]研究結果相符，這可解釋為CK5/6 表達代表腫瘤增殖能力較強，導致各方向生長速度不同，邊緣具有推擠性的病理特點，故常表現為分葉狀等不規則形。

本研究62 例TNBC 僅19 例BRCA1 呈陽性表達。 有研究報道，BRCA1 在乳腺惡性腫瘤中的表達存在特異性，可抑制細胞生長，促進遺傳物質的損傷修復，其低表達可使抑癌作用減弱，且與TNBC相關[16-17]。 本研究結果發現，TNBC 中的BRCA1 陽性者后方回聲多無變化(42.1%)，與陳功泉等[10]發現的后方回聲以衰減為主這一結果不同，這說明惡性程度低的病灶其后方回聲可呈多樣性改變。本研究中，TNBC 的BRCA1 陽性表達者以乏血供為主(68.4%)，這與陳功泉等[10]的發現一致。 腫瘤侵犯的常見超聲特征為富血供。 然而，BRCA1 陽性者中其較高的表達導致抑癌作用較強，新生血管生成較少，故超聲表現為乏血供。

綜上所述，TNBC 的部分超聲表現與其他乳腺惡性腫瘤存在差異，表現為病灶邊緣清晰、后方回聲增強及微鈣化較少。 CK5/6 和BRCA1 表達情況對TNBC 的診斷、預后和了解其生物學行為具有重要意義。