硬尖神香草與寬唇神香草揮發油的GC-MS分析

賈春燕，帕爾哈提·艾別提，孫佳楠，馬若婷，張海英,

（1. 新疆醫科大學附屬中醫醫院，新疆 烏魯木齊 830000；2. 塔城市自然資源局，新疆 塔城 834700；3. 新疆醫科大學 第四臨床醫學院，新疆 烏魯木齊 830000；4. 新疆中藥炮制研究重點實驗室，新疆 烏魯木齊 830000）

神香草全球約15種，分布于亞洲中部、西亞至南歐及北非，最早作為一種香料植物，添加于食物中或制成精油，在歐洲廣泛使用[1]。中國有硬尖神香草 （Hyssopus cuspidatusBoriss.）和寬唇神香草（Hyssopus latilabiatusC. Y. Wu et H. W. Li）兩個種，《中國植物志》[2]、《中華本草-維吾爾藥卷》[3]、《維吾爾藥志》[4]、中華人民共和國衛生部藥品標準（維吾爾藥分冊）等收載的均為硬尖神香草。在印度、伊朗和中國新疆地區，神香草為民間傳統醫學習用藥材，其中硬尖神香草全草入藥，維吾爾名為“祖帕奇尼”，功能主治為化痰、止咳、祛風寒、殺菌[4]?，F代藥理研究表明，神香草提取物具有祛痰、止咳、平喘、解痙、抑制血糖升高、抗衰老、抑菌、抗血小板等作用[5-8]。本課題前期研究發現新疆僅在阿勒泰、塔城地區有野生神香草，且寬唇神香草蘊藏量比硬尖神香草更大。硬尖神香草主要生長在礫石質山坡上和巖石縫中，寬唇神香草生長于荒蕪土地、平原及河灘地上。對比生長環境和繁殖條件，可知寬唇神香草生長地域廣泛，易于大量人工培育及采集。目前文獻中可查到有關神香草的報道，均以硬尖神香草為主，寬唇神香草的化學成分、藥理作用均不清楚。本實驗通過揮發油的氣相色譜-質譜（GC-MS）分析，進行硬尖神香草與寬唇神香草的比較研究，為寬唇神香草藥用價值的研究提供實驗依據。

1 儀器及試藥

1.1 儀器

安捷倫5977A MSD-7890B氣質聯用儀（美國安捷倫公司）。

1.2 試藥

硬尖神香草（采自布爾津縣），寬唇神香草（采自吉木乃縣），經新疆醫科大學附屬中醫醫院李永和主任中藥師鑒定為正品。乙醚，正己烷，氯化鈉，無水硫酸鈉均為分析純；高純氦氣（純度：99.999 %）。

2 方法與結果

2.1 GC與MS條件

2.1.1 GC條件 色譜柱為PE-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）毛細管柱；程序升溫：50 ℃，保持3 min，3 ℃/min升至200 ℃，5 ℃/min升至280 ℃，保持30 min； 進樣口溫度：290 ℃；進樣量：1.0 μl；進樣方式：分流進樣，分流比為5:1；載氣：氦氣，載氣流速為1.0 ml/min；

2.1.2 MS條件 離子源溫度為230 ℃；傳輸線溫度：200 ℃；掃描范圍：35～600 amu；功率：70 ev；電離方式：電轟擊電離（EI）；光電倍增：270 V。

2.2 樣品處理

取硬尖神香草與寬唇神香草的全草100 g，加水1000 ml浸泡0.5 h，水蒸氣蒸餾6 h，收集蒸餾液，用氯化鈉飽和，乙醚萃取，乙醚層用無水硫酸鈉干燥，低溫回收乙醚，得到具有芳香氣味的棕黃色揮發油，密封保存，揮發油得率0.6 %。

2.3 樣品測定

準確稱取神香草揮發油樣品0.20 g，用混合溶劑[甲醇-二氯甲烷（1:4）]溶解并定容至10 ml，0.45 μm濾膜過濾，按2.1項下GC與MS條件進樣檢測。圖1為硬尖神香草揮發油總離子流色譜圖，圖2為寬唇神香草揮發油總離子流色譜圖，根據總離子流色譜圖，經檢索Wiley質譜數據庫并結合質譜裂解規律進行解析，結果硬尖神香草揮發油鑒定出48種化合成分（見表1），其中含量較高的是松香芹酮（26.73 %）、β-蒎烯（22.13 %）、反式-3-蒎烷酮（21.15 %）；寬唇神香草揮發油鑒定出45種化學成分（見表2），其中含量較高的是D-檸檬烯（29.14 %）、里哪醇（18.04 %）、3-甲基-4-亞甲基雙環[3.2.1]辛-2-烯（20.54 %）。

圖1 硬尖神香草揮發油總離子流色譜圖

圖2 寬唇神香草揮發油總離子流色譜圖

表1 硬尖神香草揮發油各化學成分含量

表2 寬唇神香草揮發油各化學成分含量

2.4 方法學考察

2.4.1 精密度 按2.2項下方法處理硬尖神香草與寬唇神香草樣品，并按2.1項下條件進行分析，1 d內重復測定6次。分別選取其中的12個含量相對較高的化合物的峰面積計算日內精密度。經計算，所有分析物的日內精密度RSD在 0.43 %～3.2 % 之間，符合測定要求。

2.4.2 重復性 按2.2項下方法分別平行處理6份硬尖神香草與寬唇神香草樣品，并按2.1項下條件進樣分析，測定其中12個含量相對較高的化合物的峰面積，計算RSD在0.30 %～3.9 %之間，說明該方法重復性良好。

2.4.3 穩定性 按2.2項下方法處理硬尖神香草與寬唇神香草樣品，并按2.1項下條件分別于0，6，12，18，24 h進樣，測定并記錄12個含量相對較高的化合物的峰面積，計算RSD在1.65 %～3.47 %之間，說明硬尖神香草與寬唇神香草的揮發油成分在24 h內穩定。

3 討論

GC-MS聯用技術在中藥揮發油成分的研究中應用廣泛，《中華人民共和國藥典》（2020年版）收載多種藥材揮發油GC-MS分析方法，經文獻檢索，尚未發現有關寬唇神香草揮發油成分的報道。本實驗用GC-MS法對硬尖神香草、寬唇神香草揮發油成分進行研究，對神香草化學成分的系統研究具有一定意義。

對比硬尖神香草與寬唇神香草揮發油成分GC-MS分析結果，發現其主要化學成分差別較大，硬尖神香草揮發油主要成分是β-蒎烯、松香芹酮、反式-3-蒎烷酮；寬唇神香草揮發油主要成分是D-檸檬烯、里哪醇、3-甲基-4-亞甲基雙環[3. 2. 1]辛-2-烯。

硬尖神香草揮發油和寬唇神香草揮發油有17種成分是相同的：3-側柏烯、β-蒎烯、2, 3-去氫-1,8-桉葉素、β-月桂烯、D-檸檬烯、反式-β-羅勒烯、β-羅勒烯、γ-萜品烯、里哪醇、1-松香芹醇、松香芹酮、4-萜烯醇、桃金娘烯醇、D-香芹酮、喇叭茶醇、匙桉醇、喇叭茶腦，但各成分含量均不相同，其中β-蒎烯、松香芹酮在硬尖神香草含量較高，D-檸檬烯、里哪醇在寬唇神香草中含量較高，其余成分含量基本相近。

硬尖神香草揮發油成分文獻報道較多，帕麗達·阿不力孜[9]檢測到硬尖神香揮發油的主要成分是D-大葉香根烯、B-大葉香根烯、反式-石竹烯、斯巴醇；符繼紅等[10]檢測到硬尖神香草揮發油的主要成分是γ-欖香烯、α-蒎烯；劉力等[11]檢測歐神香草揮發油化學成分主要為β-蒎烯、異松茨酮、松茨酮；對比文獻和本研究中硬尖神香草揮發油化學成分，相同成分較少，出現差異的原因可能是神香草藥材的采集地方不同、生長環境不同等，還需做進一步的研究。

神香草水提取物和神香草揮發油除了對金黃色葡萄球菌有一定的抑制作用外，還可抑制大腸桿菌和白色念珠菌的增殖，神香草揮發油比水提物的抗菌效果更為顯著[12]。此外，神香草揮發油還可抑制化膿鏈球菌和埃希菌活性[13]。神香草揮發油具有顯著的抗炎、止咳、祛痰和鎮痛作用[14-15]，可舒張離體血管平滑肌，且作用為非內皮依賴性[16]。神香草揮發油中的活性成分包括里哪醇、α-蒎烯和γ-欖香烯等。

綜上，硬尖神香草、寬唇神香草揮發油成分差別較大，寬唇神香草揮發油含量高，化學成分種類豐富，含抗菌、抗炎、抗氧化、解痙成分，但具體藥用價值如何，還需進一步深入研究。