IGRAs在結核性胸膜炎診斷中的應用價值

陳 軍，張歡歡，任國英，王慧敏，任雪琴，趙佳輝

（北京東方博大醫院檢驗科，北京 100021）

結核病是臨床上常見的一種慢性疾病。此病主要是由感染結核分枝桿菌（MTB）所致，其具有傳染性，病變部位包括肺部、腦膜、皮膚等（其中肺部為多發部位）[1-2]。結核性胸膜炎（TBP）主要是因MTB 與其代謝產物深入胸腔內，引起炎癥反應后產生大量胸腔積液所致[3-4]。盡早診斷、盡早治療對控制此病患者的病情具有重要的意義。近年來，隨著相關技術的不斷發展，γ 干擾素釋放試驗（IGRAs）逐漸被應用于結核病的臨床診斷中。IGRAs 主要是以體外酶聯反應斑點試驗為基礎，通過檢測早期分泌性抗原靶-6、培養濾液蛋白-10 抗原刺激后釋放的INF-γT 細胞數來判斷患者是否感染MTB[5-6]。本文對2018 年5 月至2019 年12 月我院接診的80 例疑似TBP 患者進行研究，旨在探討胸腔積液IGRAs 與血液IGRAs 在診斷TBP 中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年5 月至2019 年12 月我院接診的80 例疑似TBP 患者為研究對象。其中有男性49 例（占61.25%），女性31 例（占38.75%）；其年齡為28 ～58 歲，平均年齡（42.36±3.25）歲；其體重指數為18.50 ～26.30，平均體重指數（22.30±1.25）。本研究經我院醫學倫理委員會批準。

1.2 研究對象的納入及排除標準

納入標準：1）存在典型的TBP 臨床癥狀（包括發熱、畏寒及乏力等）；2）胸腔內有大量的積液；3）無結核病史；4）對臨床檢查的配合度理想；5）自愿參與本研究，且已簽署知情同意書。排除標準：1）處于妊娠期或哺乳期；2）存在凝血功能異常；3）過敏體質；4）存在惡性腫瘤；5）近期內使用過免疫抑制劑；6）近期內使用過抗結核藥物；7）有結核病史或結核病接觸史。

1.3 方法

為所有入選者均采集胸腔積液與血液進行IGRAs， 方 法 是：采 集 其3 ～5mL 的 外 周 血 與30 ～50mL 的胸腔積液，使用安徽中科中佳科學儀器有限公司生產的離心機（以3000r/min 的轉速）進行離心處理，離心時間為10min。完成離心處理后，取上層清液。分別將血液標本與胸腔積液標本置于陽性對照管（P）、陰性對照管（N）、結核刺激管（T）內。分別加入刺激劑，P 加入植物血凝素，N加入磷酸鹽緩沖液，T 加入培養濾液蛋白-10（CFP-10）與早期分泌性抗原靶-6（ESTA-6）混合物，搖勻后放入APC-30D 培養箱（注冊證號：國械注進20152223362，生產廠家：ASTEC CO.，LTD.）中進行培養，培養溫度為37℃，培養時間為20 ～24h。完成培養后，再次以3000r/min 的轉速進行離心處理，然后取上層清液。使用北京萬泰生物藥業股份有限公司生產的試劑盒進行檢測，所有操作方法均依據試劑盒說明書進行，使用酶標儀（生產廠家：上海科華實驗系統有限公司，型號：HKBST-360）測定450nm波長下的光密度（OD）值，再將標準曲線帶入獲取N、P、T 各管的干擾素濃度值。結果判斷標準是：1）陽性：T-N 值≥14，且≥N/4，N 值≤400 ；2）陰性：T-N值＜14，N 值＜400，P-N 值≥20；3）不確定：（1）P-N 值＜20，T-N 值＜14 ；（2）P-N 值＜20，T-N值≥14 但＜N/4 ；（3）N 值＞400。

1.4 統計學方法

采用SPSS24.0 軟件進行數據處理，計量資料用均數± 標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗。采用Kappa一致性檢驗法評價IGRAs 與金標準的一致性，Kappa值≥0.74 提示一致性好，≥0.4 但＜0.74 提示一致性一般，＜0.4 提示一致性差。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MTB 培養結果

入選本研究的80 例疑似T BP 患者中有72 例（90.00%）患者的MTB 培養結果為陽性，有8 例（10.00%）患者的MTB 培養結果為陰性。

2.2 用IGRAs 診斷這些患者病情的效果

經MTB 培養結果證實，用血液IGRAs 診斷這些患者病情的準確率為85.00%（68/80），敏感度為86.11%（62/72），特異度為75.00%（6/8），陽性預測值為96.88%（62/64），陰性預測值為37.50%（6/16）；用胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情的準確率為96.25%（77/80），敏感度為97.22%（70/72），特異度為87.50%（7/8），陽性預測值為98.59%（70/71），陰性預測值為77.78%（7/9）。與采用血液IGRAs 相比，用胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情的準確率、敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均較高，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳見表1、表2。

表1 血液IGRAs 結果、胸腔積液IGRAs 結果與MTB 培養結果的對比（例）

表2 用血液IGRAs、胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情效果的比較[%( 例)]

2.3 血液IGRAs、胸腔積液IGRAs 與金標準的一致性

進行Kappa 一致性分析的結果顯示，血液IGRAs診斷TBP 與金標準的一致性一般，Kappa 值為0.423；胸腔積液IGRAs 診斷TBP 與金標準的一致性較好，Kappa 值為0.803。胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果顯著優于血液IGRAs。

3 討論

TBP 是引起胸腔積液的重要因素。此病患者的主要臨床表現為出汗、發熱、食欲不振、胸痛、呼吸困難等[7-8]。用IGRAs 診斷TBP 的主要原理是TBP患者的體內存在大量的結核特異效應T 細胞，這種T細胞在受到抗原特異性細胞刺激后會生成大量的γ干擾素（γ-IFN），故檢測γ-IFN 水平可準確診斷TBP。近年來，隨著相關研究的不斷深入，IGRAs 在臨床診斷TBP 中得到了廣泛的應用[9-11]。本研究的結果顯示，用血液IGRAs 診斷這些患者病情的準確率為85.00%（68/80），敏感度為86.11%（62/72），特異度為75.00%（6/8），陽性預測值為96.88%（62/64），陰性預測值為37.50%（6/16）；用胸腔積液IGRAs 診斷這些患者病情的準確率為96.25%（77/80），敏感度為97.22%（70/72），特異度為87.50%（7/8），陽性預測值為98.59%（70/71），陰性預測值為77.78%（7/9）。與采用血液IGRAs 相比，用胸腔積液IGRAs診斷這些患者病情的準確率、敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均較高，差異有統計學意義（P＜0.05）。進行Kappa 一致性分析的結果顯示，血液IGRAs 診斷TBP 與金標準的一致性一般，Kappa值為0.423 ；胸腔積液IGRAs 診斷TBP 與金標準的一致性較好，Kappa 值為0.803。胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果顯著優于血液IGRAs。分析其原因在于，在TBP 患者感染MTB 后，趨化作用會使細胞因子更容易聚集在其胸腔內部，這導致其胸腔積液中抗原特異性細胞的數量比血液中多，故用胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果更好[12-15]。

綜上所述，與采用血液IGRAs 相比，用胸腔積液IGRAs 診斷TBP 的效果較好。此法值得在臨床上推廣應用。