人參根系分泌物中有機(jī)酸及皂苷對(duì)人參病原菌與生防菌的化感差異研究

楊莉，于俐，孫卓，張桐毓，張陽，楊利民*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生態(tài)恢復(fù)與生態(tài)系統(tǒng)管理省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，長(zhǎng)春 130118；2.延邊特色產(chǎn)業(yè)發(fā)展中心，吉林延吉 133000）

植物根系分泌物是植物間化感作用重要的載體物質(zhì)，也是植物和其他有機(jī)體之間信息傳遞的重要媒介[1]。越來越多的研究表明，根系分泌物不僅能夠影響植物生長(zhǎng)，還可作為土壤微生物生長(zhǎng)和繁殖的碳源、能源，進(jìn)而影響根際微生物群落的種類與數(shù)量[2-3]。Bulgarelli等[4]總結(jié)了植物根系微生物區(qū)系的形成機(jī)理，認(rèn)為植物可通過調(diào)整根面和內(nèi)生菌的生長(zhǎng)過程，形成植物所特有的根系核心微生物區(qū)系。并且，利用土壤微生物對(duì)根際分泌物的化學(xué)趨向響應(yīng)，可誘導(dǎo)有益微生物在根際聚集，對(duì)防御病原微生物起到積極的作用[5-8]。

從根際分泌物的角度探討植物連作障礙成因的研究表明，植物根際釋放出的次生代謝產(chǎn)物中含有多種化學(xué)物質(zhì)，不僅對(duì)植物具有直接的負(fù)面效應(yīng)，還可誘導(dǎo)土壤中養(yǎng)分循環(huán)、微生物種群結(jié)構(gòu)等生物或非生物因素改變[9-11]。根系分泌物介導(dǎo)的病原菌增加、土壤微生態(tài)失衡是導(dǎo)致后茬植物生長(zhǎng)不良的主要原因，根系分泌物中化感物質(zhì)是植物根際微生態(tài)災(zāi)變的重要誘因[12-13]。可見，植物根系釋放的分泌物可被不同的微生物識(shí)別并產(chǎn)生不同的影響，尤其是在防御和誘導(dǎo)病原微生物方面存在顯著差異，但由于土壤環(huán)境的復(fù)雜性以及目前對(duì)根系分泌物化學(xué)成分和關(guān)鍵活性物質(zhì)認(rèn)知的局限性，導(dǎo)致對(duì)上述差異形成原因的研究還存在很多空白，很多實(shí)質(zhì)性問題未見報(bào)道。本研究基于課題組前期對(duì)人參主要土傳病原菌生防菌的分離鑒定結(jié)果，以人參主要病害病原菌及其天敵生防菌為研究對(duì)象，分析人參根系分泌物中初生代謝產(chǎn)生的酸性物質(zhì)（根系分泌物中長(zhǎng)期存在，對(duì)人參具有顯著自毒作用）與次生代謝合成的皂苷類物質(zhì)（人參屬根系分泌物中典型的物質(zhì)）[14-16]對(duì)二者的影響，為探討人參根系分泌物對(duì)病原菌、病原菌的天敵微生物的化感作用差異，研究人參根際分泌物對(duì)根際微生物群落變化的誘導(dǎo)效應(yīng)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

人參病原菌：以人參中常見的重大病害銹腐病、根腐病、黑斑病、菌核病的病原菌為受體。強(qiáng)壯土赤殼菌（Ilyonectria robusta，人參銹腐病病原菌）、腐皮鐮孢菌（Fusarum solani，人參根腐病病原菌）、鏈格孢菌（Alternaria panax，人參黑斑病病原菌）、人參核盤菌（Sclerotinia ginseng，人參菌核病病原菌）由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)植保實(shí)驗(yàn)室高潔老師惠贈(zèng)。

人參生防菌：死谷芽孢桿菌（Bacillusvallismortis，SZ-4）、短波單胞菌（Brevundimonasterrae，SZ-22）、解 淀 粉 芽 孢 桿 菌（Bacillus amyloliquefaciens，SZ-60）均由本實(shí)驗(yàn)室從人參根際土壤中分離得到，已證實(shí)對(duì)多種人參土傳病害具有拮抗作用[14]，目前已被保存于國家菌種保藏中心。

供體物質(zhì)：苯甲酸、鄰苯二甲酸、丁二酸、己二酸，人參皂苷標(biāo)準(zhǔn)品Rb2(P15O10F94983)、Rd(Z13N8X48155)、Rc(M15O10S100110)、Rg1(G16S10Y9 7436)、Re(B04D9S76499)購自上海源葉生物科技有限公司（HPLC≥98%）。

培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂固體培養(yǎng)基（PDA）、NA培養(yǎng)基（購于北京索萊寶科技有限公司）。

1.2 供試含藥培養(yǎng)基的配置

稱取一定質(zhì)量的酸類物質(zhì)（苯甲酸、鄰苯二甲酸、丁二酸、己二酸）、皂苷（Rb2、Rd、Rc、Rg1、Re）溶于甲醇中，配制成1 000.0、200.0、20.0、2.0、0.2 mg·L-1的母液。無菌條件下取100μL母液加入培養(yǎng)皿中，室溫?fù)]發(fā)干溶劑后將20 mL滅菌PDA培養(yǎng)基少量分次加入，攪拌溶解均勻后形成5.000、1.000、0.100、0.010、0.001 mg·L-1的含藥培養(yǎng)基，用于病原菌培養(yǎng)，以不添加外源物質(zhì)的培養(yǎng)基為CK，每個(gè)處理5次重復(fù)。最高含量梯度參考土壤中實(shí)際含量[17]并略有調(diào)整。

無菌條件下取250μL上述母液加入培養(yǎng)瓶中，室溫?fù)]發(fā)干溶劑后分次加入50 mL滅菌的NA培養(yǎng)液，攪拌均勻后形 成5.000、1.000、0.100、0.010、0.001 mg·L-1的含藥培養(yǎng)基，用于生防菌培養(yǎng)，以不添加外源物質(zhì)的培養(yǎng)基為CK，每個(gè)處理5次重復(fù)。

1.3 生物測(cè)定

1.3.1 病原菌作為受體 從生長(zhǎng)狀態(tài)良好的真菌菌落邊緣取直徑為5 mm的菌塊接入培養(yǎng)基中央，放置在（25±2）℃恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。待對(duì)照組菌落直徑達(dá)到培養(yǎng)基直徑的70%～80%時(shí)結(jié)束培養(yǎng)，用十字測(cè)量法測(cè)量菌落直徑，根據(jù)試驗(yàn)組與對(duì)照組的菌落直徑計(jì)算化感物質(zhì)的抑菌率。菌落抑制率計(jì)算公式如下。

式中，dc為對(duì)照組菌落直徑，dt為試驗(yàn)組菌落直徑。抑菌率正值代表抑制作用，負(fù)值代表促進(jìn)作用。

1.3.2 生防菌作為受體 待培養(yǎng)液冷卻后，用滅菌的移液器移取0.1 mL待測(cè)拮抗菌懸液，接種于含藥NA培養(yǎng)液中振蕩培養(yǎng)24 h（180 r·min-1，28℃）后，測(cè)定波長(zhǎng)600 nm下的吸光值，檢測(cè)拮抗菌生長(zhǎng)狀況。拮抗菌生長(zhǎng)抑制率計(jì)算方法如下。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用Excel對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，DPS 9.50對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析，Origin 2018進(jìn)行作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 酸性物質(zhì)對(duì)人參病原菌及生防菌生長(zhǎng)的影響

2.1.1 有機(jī)酸對(duì)人參病原菌的化感作用 由表1可見，強(qiáng)壯土赤殼菌（銹腐病病原菌）在有機(jī)酸處理下主要表現(xiàn)為生長(zhǎng)受抑制，多數(shù)質(zhì)量濃度處理與對(duì)照差異顯著（P＜0.05），其中丁二酸、鄰苯二甲 酸處理 分 別在0.010～1.000 mg·L-1、0.001～1.000 mg·L-1范圍內(nèi)表現(xiàn)出顯著的抑制作用，作用強(qiáng)度7.96%～30.09%（P＜0.05），表明土壤中微量的該類物質(zhì)即可對(duì)強(qiáng)壯土赤殼菌增長(zhǎng)具有顯著的抑制作用。對(duì)比4種有機(jī)酸平均抑制率可知，鄰苯二甲酸對(duì)強(qiáng)壯土赤殼菌活性的抑制作用最大（14.11%），然后依次為己二酸（10.17%）、苯甲酸（6.65%）、丁二酸（4.57%）。

表1 有機(jī)酸對(duì)病原菌生長(zhǎng)的影響Table 1 Influence of organic acids on the growth of pathogenic bacteria

分析有機(jī)酸對(duì)菌核病病原菌生長(zhǎng)的影響可知，含有機(jī)酸的培養(yǎng)基刺激了人參核盤菌的生長(zhǎng)，其菌落直徑多大于對(duì)照，表明人參根際存在的有機(jī)酸類物質(zhì)可促進(jìn)核盤菌的增殖。其中苯甲酸在0.010～1.000 mg·L-1、丁二酸在0.001～1.000 mg·L-1范圍內(nèi)表現(xiàn)出對(duì)人參核盤菌活性的顯著促進(jìn)（促進(jìn)作用7.8%～21.8%（P＜0.05））。對(duì)比4種有機(jī)酸的平均作用強(qiáng)度可知，丁二酸對(duì)該菌種活性促進(jìn)作用最大（12.77%），其次依次為己二酸（9.25%）、苯甲酸（8.29%）、鄰苯二甲酸（5.49%）。

分析有機(jī)酸對(duì)腐皮鐮孢菌的影響可知，苯甲酸、丁二酸、己二酸對(duì)腐皮鐮孢菌生長(zhǎng)以促進(jìn)為主（作用強(qiáng)度0.25%～9.41%）；鄰苯二甲酸對(duì)其生長(zhǎng)存在抑制作用（作用強(qiáng)度2.80%～7.12%）；多數(shù)處理未見與對(duì)照有顯著差異。從人參鏈格孢菌測(cè)定結(jié)果可知，苯甲酸和丁二酸對(duì)其生長(zhǎng)表現(xiàn)為低水平促進(jìn)高水平抑制；己二酸與鄰苯二甲酸與之相反，為低水平抑制高水平促進(jìn)；大部分處理與對(duì)照未見有差異顯著。上述分析表明腐皮鐮孢菌、人參鏈格孢菌的生長(zhǎng)受有機(jī)酸類物質(zhì)影響較小。

2.1.2 有機(jī)酸對(duì)生防菌的化感作用 從圖1可以看出，除鄰苯二甲酸部分處理外，其余處理對(duì)死谷芽孢桿菌（SZ-4）的生長(zhǎng)以促進(jìn)為主，作用強(qiáng)度在3.26%～18.57%。苯甲酸處理在0.010～5.000 mg·L-1、丁 二 酸0.001～5.000 mg·L-1、己 二 酸0.010～1.000 mg·L-1對(duì)該生防菌生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn)作用。

圖1 有機(jī)酸對(duì)生防菌生長(zhǎng)的影響Fig.1 Influence of organic acids on the growth of biocontrol bacteria

分析有機(jī)酸對(duì)短波單胞菌（SZ-22）生長(zhǎng)的影響發(fā)現(xiàn)，除苯甲酸外，其余3種有機(jī)酸均對(duì)該菌生長(zhǎng)有強(qiáng)烈的促進(jìn)活性，作用強(qiáng)度8.28%～132.94%，作用水平范圍介于0.001～5.000 mg·L-1，且大多數(shù)質(zhì)量濃度處理與對(duì)照差異顯著，表明SZ-22對(duì)土壤中丁二酸、己二酸和鄰苯二甲酸敏感，這3種物質(zhì)可在較大質(zhì)量濃度范圍內(nèi)促進(jìn)其生長(zhǎng)。總體比較發(fā)現(xiàn)，己二酸促進(jìn)作用最強(qiáng)（88.38%），其次依次為丁二酸（57.13%）、鄰苯二甲酸（53.91%）。

分析4種有機(jī)酸對(duì)解淀粉芽孢桿菌（SZ-60）生長(zhǎng)的影響可知，苯甲酸對(duì)其生長(zhǎng)有促進(jìn)作用；其余三者呈抑制作用，鄰苯二甲酸抑制作用最強(qiáng)。鄰苯二甲酸、苯甲酸各質(zhì)量濃度梯度處理均與對(duì)照 差 異 顯 著（P＜0.05），前 者 平 均 抑 制 強(qiáng) 度29.96%，后者平均促進(jìn)強(qiáng)度46.91%。

2.2 人參皂苷對(duì)病原菌及生防菌生長(zhǎng)的影響

2.2.1 人參皂苷對(duì)病原菌的化感作用 由表2可見，5種人參皂苷對(duì)強(qiáng)壯土赤殼菌的增長(zhǎng)呈抑制作用，抑制強(qiáng)度6.64%～44.07%。其中，人參皂苷Re、Rc、Rd可分別在0.001 mg·L-1的5 000倍、1 000倍、100倍范圍內(nèi)對(duì)強(qiáng)壯土赤殼菌產(chǎn)生顯著的抑制作用；人參皂苷Rb2、Rg1可分別在0.010 mg·L-1的500倍、0.100 mg·L-1的50倍范圍內(nèi)產(chǎn)生類似作用。

表2 人參皂苷對(duì)病原菌生長(zhǎng)的影響Table 2 Influence of saponins on the growth of pathogenic bacteria

5種皂苷對(duì)人參核盤菌生長(zhǎng)的影響以促進(jìn)為主，作用強(qiáng)度1.32%～22.85%，影響最大的是Rg1，然后依次是Rc、Rd、Re、Rb2。其中，Rg1作用范圍為0.001 mg·L-1的5 000倍，其余皂苷作用質(zhì)量濃度范圍較窄（5～50倍）。分析皂苷對(duì)腐皮鐮孢菌和人參鏈格孢菌生長(zhǎng)的影響可見，皂苷對(duì)二者的生長(zhǎng)以促進(jìn)為主，促進(jìn)作用分別為0.51%～8.91%、0.54%～9.83%，多數(shù)處理與對(duì)照無顯著差異，表明5種皂苷對(duì)腐皮鐮孢菌和人參鏈格孢菌生長(zhǎng)影響較小。

2.2.2 人參皂苷對(duì)生防菌的化感作用 由圖2可見，除Rb2外其余4種皂苷可促進(jìn)SZ-4的生長(zhǎng)，其中Rc活性最強(qiáng)（平均強(qiáng)度15.92%），其次依次為Rd（6.52%）、Rg1（5.76%）、Re（4.87%）。5種皂苷中Rc、Re產(chǎn)生顯著影響的水平范圍分別為0.001 mg·L-1的5 000倍、100倍內(nèi)，其余皂苷處理作用范圍較窄。5種皂苷對(duì)SZ-22的生長(zhǎng)以促進(jìn)為主，作用強(qiáng)度0.27%～11.29%，影響最大的是Rd、Rb2、Re，其中Rd顯著作用范圍為0.001 mg·L-1的100倍內(nèi)，其余皂苷的顯著作用梯度分散。分析皂苷對(duì)SZ-60生長(zhǎng)的影響可見，Rb2所有處理水平下SZ-60生長(zhǎng)受抑，平均抑制率10.77%；Rc所有處理水平下SZ-60生長(zhǎng)受激，平均促進(jìn)強(qiáng)度15.74%；Rd、Re、Rg1對(duì)SZ-60生長(zhǎng)均表現(xiàn)為低質(zhì)量濃度促進(jìn)高質(zhì)量濃度抑制，其促進(jìn)活性Rd（82.75%）＞Re（79.06%）＞Rg1（7.97%），抑制活性Re（28.91%）＞Rg1（20.89%）＞Rd（7.11%）。

圖2 皂苷對(duì)生防菌生長(zhǎng)的影響Fig.2 Influence of saponins on the growth of biocontrol bacteria

2.3 兩類物質(zhì)對(duì)土壤微生物化感作用的綜合分析

根據(jù)上述分析，將與對(duì)照具有顯著差異的處理及梯度匯總，結(jié)果如圖3所示。由于溶液較稀，1 mg·L-1溶液密度與水相似，故1 mg·L-1約等于1 ppm，據(jù)此將上述質(zhì)量濃度處理轉(zhuǎn)換為ppm，以便表示微生物對(duì)物質(zhì)的敏感程度。由圖3可見，每種物質(zhì)可顯著影響4～5種土壤微生物，對(duì)強(qiáng)壯土赤殼菌以抑制為主，對(duì)人參核盤菌、SZ-4、SZ-22以促進(jìn)為主；溶液水平為ppb級(jí)的己二酸、鄰苯二甲酸、Rd、Re可分別顯著影響5、4、4、4種受體生長(zhǎng)，其余物質(zhì)可影響1～3種，己二酸、鄰苯二甲酸、Rd、Re可在ppb～ppm（1 000倍）范圍對(duì)3～5種受體產(chǎn)生顯著影響，苯甲酸、丁二酸、Rb2、Rc、Rg1主要集中在10-2ppm～ppm（100倍）范圍內(nèi)對(duì)受體產(chǎn)生顯著影響；ppb質(zhì)量濃度的苯甲酸、Rc、Rd、Re具有抑制病原菌、促進(jìn)生防菌的作用；在所有與對(duì)照差異顯著的處理中，70%以上處理作用強(qiáng)度低于20%，作用強(qiáng)度大于40%的處理僅占17%。

圖3 有機(jī)酸、皂苷對(duì)微生物影響的對(duì)比分析Fig.3 Comparative analysis of the effects of organic acids and saponins on microorganisms

2.4 兩類物質(zhì)對(duì)土壤微生物化感作用的統(tǒng)計(jì)分析

2.4.1 菌種間比較分析 采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)對(duì)病原菌和生防菌間差異進(jìn)行分析（圖4）發(fā)現(xiàn)，病原真菌組秩（113.44）＞生防細(xì)菌組秩（112.70），P=0.933，表明有機(jī)酸與皂苷類物質(zhì)對(duì)病原菌影響略大于生防菌，但二者間無顯著差異。菌種間分析結(jié)果由圖4可見，SZ-60秩＞強(qiáng)壯土赤殼菌秩＞人參核盤菌秩＞SZ-22秩＞SZ-4秩，SZ-60秩與后三者差異顯著，表明有機(jī)酸與皂苷類物質(zhì)對(duì)SZ-60生長(zhǎng)影響最大。

2.4.2 物質(zhì)間比較分析 采用非參數(shù)Kruskal-Wall is檢驗(yàn)對(duì)有機(jī)酸與皂苷間差異進(jìn)行分析（圖4）發(fā)現(xiàn)，有機(jī)酸組秩（120.22）＞皂苷組秩（109.39），P=0.239，表明有機(jī)酸對(duì)微生物影響略大于皂苷，但二者間無顯著差異。

對(duì)物質(zhì)間進(jìn)行差異分析顯示，9種物質(zhì)對(duì)強(qiáng)壯土赤殼菌、人參核盤菌生長(zhǎng)的影響差異不顯著（P=0.434、0.187），對(duì)生防菌的生長(zhǎng)，物質(zhì)間影響差異顯著，其成對(duì)比較結(jié)果如圖4。可以看出，對(duì)SZ-4、SZ-22、SZ-60生長(zhǎng)影響最大的物質(zhì)分別是Rc、己二酸、Rd，三者均與最小秩組差異顯著，與其他組差異不顯著。

圖4 Kruskal-Wallis檢驗(yàn)成對(duì)比較結(jié)果Fig.4 Pairwise comparison results of Kruskal-Wallis test

3 討論

近年來，研究者在不同植物根際分泌物中分離、鑒定了多種化感物質(zhì)，包括酸類、萜類、黃酮類化合物等[18-19]。不同植物根系分泌物的組成及數(shù)量之間存在較大差異。如木麻黃根際土壤中檢測(cè)到香草酸、阿魏酸、沒食子酸、對(duì)香豆酸和水楊酸5種酚酸類物質(zhì)，其含量介于24.86～412.56 mg·kg-1[20]；地黃根際土壤中可檢測(cè)到香豆酸、對(duì)羥基苯甲酸、香草酸、丁香酸和阿魏酸等酸性物質(zhì)，其含量介于1.020～398.812 mg·kg-1[21]。本課題組前期研究也發(fā)現(xiàn)酸性化合物是人參根系分泌物中的重要組成部分，其占比約為13.52%，主要成分為苯甲酸、鄰苯二甲酸酯、丁二酸等物質(zhì)[22]。除酸性化合物外，萜類化合物也廣泛存在于人參、三七、地黃、太子參、半夏等藥用植物根系分泌物中[23-24]。有關(guān)萜類物質(zhì)生理生態(tài)功能的研究發(fā)現(xiàn)，很多萜類物質(zhì)具有活躍的化感活性，可通過影響植物的呼吸作用、改變營(yíng)養(yǎng)循環(huán)速率而對(duì)植物的生長(zhǎng)產(chǎn)生不利影響[25-26]；在三七、人參等植物的連作障礙中，皂苷還被視為一種主要的引誘劑，對(duì)微生物種群具有調(diào)控作用[27-28]。目前人參屬植物中已分離鑒定出Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rh1、Rg1、Rg2等10余種皂苷[23-24]。有關(guān)2類物質(zhì)對(duì)植物的化感活性已有較多的報(bào)道，如香豆酸的含量可以顯著中斷大豆根的伸長(zhǎng)[29]；鄰苯二甲酸、硬脂酸、棕櫚酸和苯甲酸對(duì)三七種子的萌發(fā)及幼苗的生長(zhǎng)具有毒害作用[30]；丁二酸、己二酸等酸性物質(zhì)對(duì)人參愈傷組織具有顯著的化感活性[22]等。但這些物質(zhì)對(duì)植物根際微生物，尤其是致病微生物及其生防微生物之間化感作用的差異還缺乏更多深入的研究。本研究分析了有機(jī)酸及皂苷類物質(zhì)對(duì)根際微生物生長(zhǎng)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)上述物質(zhì)對(duì)土壤微生物的化感作用與對(duì)植物的化感作用存在相似之處，即化感作用類型可分為不敏感（腐皮鐮孢菌、人參鏈孢菌）、抑制作用（強(qiáng)壯土赤殼菌）、促進(jìn)作用（人參核盤菌、SZ-4、SZ-22）。2類物質(zhì)對(duì)微生物的化感作用強(qiáng)度介于-132.94%～31.33%，總體表現(xiàn)為促進(jìn)作用大于抑制作用，處理水平間存在隨著供試物質(zhì)質(zhì)量濃度增加促進(jìn)活性減弱或轉(zhuǎn)為抑制作用的變化趨勢(shì)，但未見明顯的水平效應(yīng)，這與以植物受體的研究結(jié)果存在較大差異[31]。

其次，比較酸性物質(zhì)與皂苷二者間化感活性差異發(fā)現(xiàn)，有機(jī)酸與皂苷均可顯著影響4～5種土壤微生物，二者均可在極低的水平條件下（ppb～ppm級(jí)）對(duì)受體產(chǎn)生顯著影響，符合化感物質(zhì)微量（微克到皮克級(jí)）、高效的特點(diǎn)[32]，證明二者均是影響人參根際微生態(tài)的重要化感物質(zhì)。Kruskal-Wallis檢驗(yàn)顯示，有機(jī)酸對(duì)微生物影響略大于皂苷，但二者間無顯著差異，這可能與試驗(yàn)水平設(shè)置有關(guān)。考慮到植物根系代謝物分泌是動(dòng)態(tài)、微量的，土壤微生物對(duì)其存在轉(zhuǎn)化和降解以及實(shí)驗(yàn)室提取技術(shù)的富集作用，故本試驗(yàn)設(shè)置水平均低于土壤中實(shí)測(cè)的動(dòng)態(tài)水平，這可能是導(dǎo)致二者之間差異不顯著的主要原因。此外人參根際7種微生物生長(zhǎng)可受到酚酸與皂苷類物質(zhì)的共同影響，其效果可能與中藥的“活性物質(zhì)群”類似[11]，有研究稱這類物質(zhì)為“化感功能物質(zhì)團(tuán)”[38]。本研究中己二酸、鄰苯二甲酸、人參皂苷Rd、人參皂苷Re可對(duì)半數(shù)以上受體產(chǎn)生顯著影響，閾值低（ppb）、作用濃度廣（ppb～ppm），提示其可能是人參根系分泌物中主要的活性物質(zhì)，其中ppb水平的Rd、Re具有抑制病原菌、促進(jìn)生防菌的作用，表現(xiàn)出顯著的防御功能。

研究認(rèn)為連作障礙植物根際土傳病害流行與某些根系分泌物對(duì)病原菌或生防菌具有偏利/偏害的作用有關(guān)，從而引起土壤微生物群落失衡[33-34]。本研究中發(fā)現(xiàn)有機(jī)酸及皂苷可抑制強(qiáng)壯土赤殼菌的生長(zhǎng)，促進(jìn)人參核盤菌、人參鏈格孢菌、腐皮鐮孢菌、SZ-4、SZ-22增殖，對(duì)生防菌的促進(jìn)作用大于病原菌，表現(xiàn)出對(duì)生防菌的偏利作用。其次，鄰苯二甲酸對(duì)人參核盤菌和強(qiáng)壯土赤殼菌分別表現(xiàn)出促進(jìn)與抑制作用，對(duì)生防菌SZ-4和SZ-60分別表現(xiàn)出促進(jìn)與抑制作用，類似的現(xiàn)象還存在于己二酸、人參皂苷Rb2等物質(zhì)處理中，說明化感物質(zhì)對(duì)病原菌或生防菌組內(nèi)菌種也存在偏利/偏害作用。推測(cè)當(dāng)根系分泌物與復(fù)雜的微生物體系接觸時(shí)，具體表現(xiàn)為對(duì)微生物群落的正面或負(fù)面調(diào)節(jié)，可能還需要綜合考慮物質(zhì)與菌種的識(shí)別速度、土壤溶液中有效含量等因素[12]。由于本試驗(yàn)僅對(duì)供體與受體之間進(jìn)行了一對(duì)一的研究，有關(guān)一對(duì)多、多對(duì)多以及復(fù)雜的土壤環(huán)境中人參根系分泌物對(duì)微生物群落的影響差異還需要更多的試驗(yàn)加以說明。