超聲彈性成像參數聯合血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ檢測對宮頸癌的診斷價值及其與腫瘤侵襲、轉移的關系*

賈 穎，王鶴鳴

菏澤市中醫醫院功能檢查科，山東菏澤 274035

宮頸癌為女性常見惡性腫瘤，發病率呈逐年增高及年輕化趨勢，且預后差，患者5年生存率僅3%～13%，嚴重威脅女性生命健康[1-2]。探尋疾病的早期診斷與病情判定的靈敏方法對改善患者預后具有積極意義。超聲彈性成像可通過對比加壓前后局部病變組織的彈性信息超聲圖像變化，推斷病變性質，在甲狀腺、乳腺等疾病定性診斷中已獲得成功應用[3]。腫瘤標志物可靈敏反映腫瘤發生、進展情況，為腫瘤診治重要參考。近年來，有研究報道，宮頸癌細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鐵蛋白(FER)、胰島素生長因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)均呈異常高表達，可能在疾病發生、發展中扮演著重要角色[4-5]。本研究觀察超聲彈性成像參數聯合血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ表達測定對宮頸癌的診斷效果及其與腫瘤侵襲、轉移的關系，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月至2021年2月于本院行切除術的86例宮頸癌患者作為惡性組，同期行切除術的86例宮頸良性病變患者為良性組。納入標準：均首次確診，可配合有關檢查；惡性組經病理組織檢查確診為宮頸癌，臨床分期Ⅰ～Ⅲ期，術前未采取放化療及免疫治療；良性組經病理檢查確診為宮頸良性病變，術前未采取系統治療。排除標準：合并其他類型惡性腫瘤；合并肝、心、腎等臟器嚴重功能障礙；合并自身免疫性疾病或嚴重感染；合并精神疾病、凝血功能異常；入院前近半年有外科手術史；既往有宮頸手術史；妊娠、哺乳期女性。惡性組年齡35～74歲，平均(47.51±6.85)歲；有淋巴結轉移29例，無淋巴結轉移57例；病理類型：腺癌21例，鱗狀細胞癌65例；臨床分期：Ⅲ期20例，Ⅰ～Ⅱ期66例；浸潤深度：>1/2肌層58例，≤1/2肌層28例。良性組年齡32～75歲，平均(46.29±7.32)歲；疾病類型：宮頸息肉59例，宮頸上皮內瘤變27例。兩組患者基線資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經本院倫理委員會審批通過，患者均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1超聲檢查 患者入院后應用日立彩色多普勒超聲儀進行檢查，配置有超聲彈性成像軟件。調節顯示器至可清晰顯示出子宮長軸切面，輕輕擺動探頭探查感興趣區域，先在二維模式下觀察子宮體、卵巢情況并掃查宮頸，而后啟動Elasto彈性成像模式，感興趣區放于圖像中心位置，手動加壓，觸動宮頸(頻率2～3次/秒)，測量病灶局部彈性應變比值、彈性圖像壓放指數，并將獲得的圖像及數據記錄保存在軟件中。

1.2.2血清腫瘤標志物檢測 入院后抽取患者4 mL清晨空腹外周靜脈血，應用離心機離心(時間10 min，轉速3 000 r/min，離心半徑為8 cm)，采集上層血清，以化學發光法檢測血清CYFRA21-1、FER水平，試劑盒購自北京科美生物技術有限公司，以酶聯免疫吸附試驗測定血清IGF-Ⅱ水平，試劑盒購于上海裕平生物技術有限公司，操作嚴格按儀器與試劑盒說明書執行。

1.2.3組織標本中侵襲基因檢查 留取宮頸病灶組織標本，凍存備用，以實時熒光定量PCR法測定宮頸病灶組織中侵襲基因(Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3)相對表達量。

1.3觀察指標 (1)兩組超聲彈性成像參數(彈性應變比值、彈性圖像壓放指數)、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平。(2)惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平。(3)超聲彈性成像參數、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ單一、聯合診斷宮頸癌的效能。(4)兩組組織標本中侵襲基因(Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3)相對表達量。(5)觀察宮頸癌超聲彈性成像參數、血清各指標與組織標本中侵襲基因相對表達量的關系。

2 結 果

2.1兩組超聲彈性成像參數及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平比較 惡性組彈性應變比值、彈性圖像壓放指數、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平均高于良性組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組超聲彈性成像參數及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平比較

2.2惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數、血清各指標水平 惡性組患者不同年齡、病理類型彈性應變比值、彈性圖像壓放指數，以及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平相比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；有淋巴結轉移、臨床分期Ⅲ期、浸潤深度>1/2肌層患者彈性應變比值、彈性圖像壓放指數、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平均高于無淋巴結轉移、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、浸潤深度≤1/2肌層患者(P<0.05)。見表2。

表2 惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數、血清各指標水平比較

續表2 惡性組不同病理特征患者超聲彈性成像參數、血清各指標水平比較

2.3超聲彈性成像參數、血清各指標單獨及聯合檢測對宮頸癌的診斷價值 ROC曲線分析發現，彈性應變比值、彈性圖像壓放指數及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ診斷宮頸癌的AUC依次為0.887、0.810、0.834、0.861、0.840；聯合診斷時采取Logistic二元回歸擬合，結果顯示，聯合診斷的AUC最大，為0.919。見表3、圖1。

圖1 超聲彈性成像參數、血清各指標單獨及聯合診斷宮頸癌的ROC曲線

表3 超聲彈性成像參數、血清各指標單獨及聯合檢測對宮頸癌的診斷價值

2.4兩組組織標本中侵襲基因表達情況 惡性組組織標本中，Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3相對表達量均高于良性組(P<0.05)。見表4。

表4 兩組組織標本中侵襲基因相對表達量比較

2.5宮頸癌患者超聲彈性成像參數、血清各指標與組織標本中侵襲基因相對表達量關系 Pearson相關分析顯示，宮頸癌患者彈性應變比值、彈性圖像壓放指數及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平與組織標本中Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3相對表達量均呈顯著正相關(P<0.05)。見表5。

表5 宮頸癌患者超聲彈性成像參數、血清各指標與增殖、侵襲、自噬基因相對表達量的關系

3 討 論

目前，宮頸癌發病機制尚未完全明確，可能與人乳頭瘤病毒感染、性傳播疾病史、性交年齡過早、多個性伴侶、使用避孕藥、長期免疫力低下、吸煙史等有關[6-7]。近年來，超聲彈性成像技術已取得長足發展，其可參照組織彈性系數差異顯示不同色彩，判定組織病變更為準確、形象，克服傳統二維超聲顯像的局限性。超聲彈性成像技術可將組織受到外力壓迫時由于彈性不同產生的不同形變程度與回聲信號移動幅度變化轉換成實時彩色圖像，彈性系數較小者在受壓后位移變化大，圖像顯示為紅色，較大者在受壓后位移變化小，圖像顯示為藍色，利于準確定位病變[8]。

本研究結果顯示，惡性組彈性應變比值、彈性圖像壓放指數高于良性組，且有淋巴結轉移、臨床分期Ⅲ期、浸潤深度>1/2肌層宮頸癌患者高于無淋巴結轉移、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、浸潤深度≤1/2肌層患者，差異均有統計學意義(P<0.05)，表明超聲彈性成像參數與宮頸癌發生、進展密切相關。宮頸癌患者因癌細胞侵犯間質，且與附近組織產生粘連，會導致宮頸硬度提高，彈性變小，而良性病灶組織內部成分單一，硬度較低。彈性應變比值、彈性圖像壓放指數可客觀反映組織彈性系數大小，其值越大則組織惡性程度越高。馬珊[9]研究報道，宮頸癌組織彈性應變比值顯著高于癌旁組織(P<0.05)。ZHANG等[10]研究證實，超聲彈性成像對宮頸癌患者的診斷靈敏度高達94.67%，特異度高達92.94%，且其彈性應變比值對放療療效具有較高評估價值。DUDEA-SIMON等[11]研究報道，實時彈性成像測定彈性應變比值對宮頸癌與宮頸上皮內瘤變具有較高的鑒別診斷價值。

腫瘤標志物在惡性腫瘤早期診斷、病情監測、療效評價、預后判定等多方面起重要作用[12-13]。CYFRA21-1于良性病變患者與健康人群體內處于低表達狀態，當產生上皮細胞癌時，可促使特異性蛋白酶激活加速細胞降解，導致CYFRA21-1大量釋放，在血液中表達水平增高[14]。FER主要為鐵負荷過多、缺鐵性貧血診斷標志物，近期研究指出，在一部分癌癥患者體內FER表達也可異常增高，屬廣譜的腫瘤標志物，對惡性腫瘤診斷、預后評價等有一定參考價值[15-16]。IGF-Ⅱ異常高表達可促進癌細胞增殖，其可作為宮頸癌診斷的敏感標志物[17]。本研究中，惡性組血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平高于良性組，且隨著宮頸癌患者臨床分期、浸潤深度及淋巴結轉移等升高，提示血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平可作為宮頸癌發生、進展評價的參考依據。

隨著腫瘤病情不斷進展，癌細胞侵襲能力增強，致使腫瘤發生淋巴結轉移，腫瘤分期增高，這是導致患者預后不良的重要原因[18-19]。Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3是與宮頸癌發生密切相關的侵襲基因，Rab11基因表達升高可增加Rac1水平，并改變其定位，促進癌細胞侵襲；PRPS2、GRP94基因高表達可增強宮頸癌細胞侵襲、遷移能力；EZH2、GOLPH3基因可上調基質金屬蛋白酶-2、基質金屬蛋白酶-9等分子表達，提升宮頸癌細胞的侵襲、轉移能力[20]。

本研究結果發現，宮頸惡性病變組織Rab11、PRPS2、GRP94、EZH2、GOLPH3相對表達量升高，且患者彈性應變比值、彈性圖像壓放指數及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平與組織標本中上述侵襲基因表達量呈正相關。這也從癌細胞侵襲、轉移層面提示宮頸癌患者彈性應變比值、彈性圖像壓放指數及血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平可客觀反映腫瘤的惡性程度。基于此，本研究嘗試應用彈性應變比值、彈性圖像壓放指數、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ聯合診斷宮頸癌，通過ROC曲線分析發現，5項聯合診斷宮頸癌的AUC最大(高于單一指標)，診斷靈敏度為79.07%，特異度為94.19%。上述結果提示，超聲彈性成像參數與上述血清指標聯合檢測可為宮頸癌診斷提供更多參考信息，提升診斷效能，可為宮頸癌的臨床診治提供可靠依據。

綜上所述，超聲彈性成像參數、血清CYFRA21-1、FER、IGF-Ⅱ水平與宮頸癌臨床病理參數及腫瘤侵襲、轉移有關，聯合診斷可顯著提升對宮頸癌的診斷效能。