子癇前期患者血清miR-17 miR-25表達的臨床意義及對妊娠結局的影響

陳志萍， 黃麗珊， 吳明秀， 陳文婷

(南方醫科大學附屬東莞醫院/東莞市人民醫院產科, 廣東 東莞 523000)

子癇前期(Preeclampsia，PE)屬妊娠期高血壓疾病范疇，是母嬰死亡的重要因素，其預防及治療一直是產科難題[1]。近年來，研究表明，微小RNA(miRNA)參與調控PE發病進程[2]。研究表明，胎盤發育異常，尤其滋養層細胞增殖、侵襲能力不足是PE發病的重要誘因，而胎盤氧化應激可引起滋養細胞損傷，使其增殖、侵襲能力降低及凋亡增加[3]。miR-17、miR-25作用機制及功能尚不明確，據報道，miR-17對腫瘤細胞增殖、浸潤、凋亡等功能都均有重要影響；miR-25作為內源性調節劑，在心血管疾病、腫瘤等疾病的氧化應激過程、促炎細胞因子調節中發揮重要作用[4]。因此，miR-17、miR-25可能在PE發病過程中也有一定作用，但目前此類研究甚少。基于此，本研究探討PE患者血清miR-17、miR-25表達的臨床意義及對妊娠結局的影響，旨在為PE防治提供參考。報道如下

1 資料與方法

1.1一般資料:選取我院PE患者74例為PE組(2018年2月至2020年8月)，同期選取正常孕產婦74例為健康組。納入標準：孕前體健；PE組均符合PE診斷標準；均簽署知情同意書。排除標準：心臟、肝腎疾病；胎兒染色體異常；多胎；甲狀腺功能異常、糖尿病等內分泌系統疾病；急慢性炎癥。

1.2方法:①資料收集：包括年齡、孕次、孕前體質量指數(BMI)、產次、血壓、分娩孕周、新生兒出生體重。②血清miR-17、miR-25檢測：采集空腹靜脈血3mL，離心(時間15min，半徑8cm，轉速3500r/min)，取血清，提取總RNA，將RNA逆轉錄為cDNA，以cDNA為模板，U6為內參，檢測miR-17、miR-25相對表達量。

1.3觀察指標:①兩組一般資料及血清miR-17、miR-25水平。②血清miR-17、miR-25水平與PE發生的關系。③血清miR-17、miR-25對PE發生的診斷價值。④不同血清miR-17、miR-25水平患者臨床特征和妊娠結局。⑤血清miR-17、miR-25水平與PE患者臨床特征和妊娠結局的相關性。

2 結 果

2.1兩組一般資料及血清miR-17、miR-25水平:兩組年齡、孕前BMI、孕次、產次比較，差異無統計學意義(P>0.05)；PE組舒張壓、收縮壓、血清miR-17水平高于健康組，分娩孕周、新生兒出生體重血清miR-25水平低于健康組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料及血清miR-17 miR-25水平比較

2.2血清miR-17、miR-25水平與PE發生的關系:以PE發生為因變量(否=0，是=1)，以血清miR-17、miR-25水平作為自變量(<均值賦值為0，≥均值賦值為1)，納入Logistic回歸分析模型，結果顯示，血清miR-17、miR-25水平均與PE相關(P<0.05)。見表2。

表2 血清miR-17 miR-25水平與PE發生的關系

2.3血清miR-17、miR-25對PE發生的診斷價值:以PE組血清miR-17、miR-25水平作為陽性樣本，以健康組血清miR-17、miR-25作為陰性樣本，繪制各指標診斷PE的ROC曲線，結果顯示，miR-17、miR-25診斷PE的AUC分別為0.871、0.885；應用SPSS軟件的聯合應用ROC理論模式，構建各指標聯合診斷PE的ROC模型，結果顯示，聯合診斷AUC最大，為0.918。見圖1、表3。

圖1 ROC曲線

表3 血清miR-17 miR-25對PE發生的診斷價值

2.4不同血清miR-17、miR-25水平患者臨床特征和妊娠結局:以miR-17、miR-25均值為界，<均值為低表達，≥均值為高表達。不同血清miR-17、miR-25水平PE患者舒張壓、收縮壓、分娩孕周、新生兒出生體重存在明顯差異(P<0.05)。見表4。

表4 不同血清miR-17 miR-25水平患者臨床特征和妊娠結局

2.5血清miR-17、miR-25水平與PE患者臨床特征和妊娠結局的相關性:血清miR-17水平與PE患者舒張壓、收縮壓呈正相關，與分娩孕周、新生兒出生體重呈負相關，血清miR-25水平與PE患者舒張壓、收縮壓呈負相關，與分娩孕周、新生兒出生體重呈正相關(P<0.05)。見表5。

表5 血清miR-17 miR-25水平與PE患者臨床特征和妊娠結局的相關性

3 討 論

我國每100位孕婦中有3～4位患有PE，且近年來呈上升趨勢，已引起社會廣泛關注。長期以來對PE進行了大量研究，發現氧化壓力增加及滋養細胞浸潤減少在PE發展機制中起重要作用，與不良妊娠結局有關[5]。病理情況下，胎盤組織部分miRNA可調節氧化應激及滋養細胞功能，提示可能參與胎盤發育及PE發生、發展過程。

miR-17-92基因簇定位于第13號染色體上，目前，相關研究多在腫瘤方面，可調控腫瘤細胞增殖、凋亡和浸潤功能。滋養細胞與腫瘤細胞增殖、浸潤活性相似，因此，miR-17-92基因簇可能通過一定機制調控滋養細胞功能。miR-17是miR-17-92基因簇成員，研究顯示，PE胎盤組織中miR-17呈病理性高表達[6]。但胎盤組織取材不便，而妊娠婦女血循環miRNA多源于胎盤。本研究測得PE患者血清miR-17表達顯著升高，與既往研究一致。分析機制：①基質金屬蛋白酶及其抑制物與滋養細胞浸潤有關。研究顯示，miR-17可通過靶向作用于MMP2，對膠質瘤U87細胞侵襲起到抑制作用[7]。推測miR-17可能通過調控其下游靶基因，影響滋養細胞功能，導致侵襲不足、浸潤過淺，進而影響胎盤血流，引發一系列PE相關表現。②研究證實，PE與胰島素抵抗、血管炎性反應、高脂血癥密切相關，具有PE病史者日后代謝綜合征發生風險明顯增加[8]。miR-17可抑制小鼠胰島素信號傳導蛋白胰島素受體激酶l(Insulin receptor substrate l，IRSl)表達，而IRSl表達降低可引起胰島素信號無法正常傳導，導致胰島素抵抗，可能增加PE發生風險。③PE發生與自噬功能紊亂有關，PE患者胎盤組織中自噬激活，胎盤滋養層細胞自噬增強。研究表明，miR-17可調節細胞自噬。推測miR-17可能通過調控自噬、凋亡等過程參與PE發病及進展。

miR-25屬于miR-106b-25家族，定位于7q22.1染色體上，參與多種疾病發生發展，如心血管疾病、糖尿病、腫瘤等[9]。目前，miR-25在PE發病機制中的作用研究較少。本研究顯示，PE患者血清miR-25呈病理性高表達。相較于正常妊娠，PE患者氧化應激表達增加，循環和組織中活性氧增加[10]。結合現有研究分析可能機制是NADPH氧化酶4(NOX4)在膽固醇血癥引起的氧化應激過程及促炎細胞因子介導的炎癥損傷中發揮核心作用，NOX4高表達可抗機體氧化應激，而miR-25表達能靶向作用于NOX4基因非翻譯區通過一系列生物學過程抑制NOX4表達，因此下調miR-25表達可增加NOX4表達實現抗氧化作用[11]。繼續ROC曲線分析顯示，血清miR-17、miR-25聯合可提高對PE的診斷價值，臨床可同時檢測miR-17、miR-25，為診斷提供更全面、可靠的參考信息。另外，miR-17、miR-25表達水平與臨床特征(舒張壓、收縮壓)和妊娠結局(分娩孕周、新生兒出生體重)相關，提示miR-17、miR-25表達水平在一定程度上還可反映疾病嚴重程度和臨床預后，便于臨床針對性完善相關干預策略。

綜上可知，PE患者血清miR-17、miR-25均病理性表達，且與疾病嚴重程度和妊娠結局有關。本研究從轉錄水平揭示miR-17、miR-25與PE的關系，但僅局限在miR-17、miR-25表達水平方面的研究，未進行miR-17、miR-25與PE相關的功能性研究，仍需進一步實驗驗證。