上皮性卵巢癌中T 淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)特征

譚金城，王羽豐，高 霞，王安陽(yáng)，蔣禮偉，羅曉霞，楊家英，段楊娟

（1.昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院干部醫(yī)療科，云南 昆明 650118；2.昆明醫(yī)科大學(xué)臨床腫瘤學(xué)院，云南 昆明 650500）

卵巢癌（ovarian cancer）是最致命的婦科惡性腫瘤[1]，晚期卵巢癌患者的常規(guī)治療手段包括腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)和化學(xué)療法，但仍有70%的晚期患者最終會(huì)復(fù)發(fā)并產(chǎn)生化學(xué)耐藥性[2]，這使得免疫療法在卵巢癌中特別有吸引力，具有強(qiáng)烈免疫應(yīng)答的卵巢癌患者往往有更高的生存率[3]。既往已經(jīng)證明了腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（tumor-infiltrating lymphocyte，TIL）與化療療效和患者預(yù)后有關(guān)[4-6]，TIL 被認(rèn)為是抗腫瘤免疫效應(yīng)的反映。為此，本文就腫瘤浸潤(rùn)T 淋巴細(xì)胞的分布特征作一綜述，以期為臨床治療上皮性卵巢癌提供幫助。

1 腫瘤浸潤(rùn)T 淋巴細(xì)胞

TIL 包括從脈管系統(tǒng)遷移到腫瘤中的T 細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞等類(lèi)型[7]，其中T 淋巴細(xì)胞是腫瘤免疫過(guò)程中的主要效應(yīng)細(xì)胞。CD3 抗原通常在T 淋巴細(xì)胞上表達(dá)，是T 淋巴細(xì)胞的抗原標(biāo)志物，主要分為CD3+CD8+T 淋巴細(xì)胞和CD3+CD4+T 淋巴細(xì)胞（輔助性T 細(xì)胞），還有一些表達(dá)CD29 和CD45RO 的記憶T 細(xì)胞。輔助性T細(xì)胞亞群種類(lèi)較多，根據(jù)抗原及功能不同分為輔助T 細(xì)胞1（Th1）、輔助T 細(xì)胞2（Th2）、輔助T 細(xì)胞17（Th17）、濾泡輔助性T 細(xì)胞（Tfh）。不同T 淋巴細(xì)胞亞群在免疫防御中起著不同的作用。據(jù)報(bào)道[8]，CD8+T 淋巴細(xì)胞與預(yù)后良好相關(guān)，Treg 細(xì)胞與預(yù)后差有關(guān)，但具體的免疫效應(yīng)還要考慮到免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)特征，即類(lèi)型、位置、數(shù)量、細(xì)胞比值等因素。

2 T 淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)特征

在卵巢癌組織中，CD3+T 細(xì)胞最多，CD8+T 細(xì)胞次之[9]。研究表明[10]，卵巢癌組織中的CD8+、CD4+T 細(xì)胞比良性組織少；但Treg、Th17 細(xì)胞亞群數(shù)量及Treg/Th17 比值顯著高于良性組織[11]，癌組織中Treg/Th17 比值升高可能是導(dǎo)致腫瘤增殖與遷移的因素。就浸潤(rùn)位置而言，腫瘤間質(zhì)內(nèi)的CD4+、CD8+T 細(xì)胞數(shù)量和CD4+/CD8+比值均顯著高于癌巢[10，12]。間質(zhì)中高密度的CD8+T 細(xì)胞可能與5 年生存率的改善有關(guān)，而癌巢中高密度的CD4+T 細(xì)胞往往預(yù)示化療效果差[9]，CD4+/CD8+比值側(cè)面反映了機(jī)體抗腫瘤免疫的總體水平，也許可以作為患者預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)。

3 T 淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)特征與臨床病理特征的關(guān)系

3.1 與病理類(lèi)型的關(guān)系 上皮性癌卵巢癌可分為漿液性腺癌、粘液性腺癌、子宮內(nèi)膜腺癌、透明細(xì)胞癌等主要亞型。國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)[10，13]，不同病理類(lèi)型的TIL 存在一定差異。子宮內(nèi)膜樣腺癌間質(zhì)內(nèi)的TIL多于高級(jí)別漿液性腺癌，而癌巢內(nèi)的TIL 數(shù)量沒(méi)有差別[13]。漿液性腺癌間質(zhì)內(nèi)的CD4+、CD8+T 細(xì)胞和癌巢內(nèi)的CD4+T 細(xì)胞數(shù)量明顯多于粘液性腺癌[10]。以往已證明卵巢癌患者預(yù)后與病理類(lèi)型有關(guān)[14]，這是否與T 淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)差異有聯(lián)系還有待進(jìn)一步研究。

3.2 與分化程度的關(guān)系 上皮性卵巢癌以高級(jí)別漿液性腺癌居多，這類(lèi)患者預(yù)后往往很差[15]。低分化癌組織中的CD3+、CD8+T 細(xì)胞多于高、中分化組，而CD4+T 細(xì)胞的浸潤(rùn)數(shù)量與分化級(jí)別無(wú)關(guān)[8，10，12]。胡喜珍等[12]利用免疫組織化學(xué)法對(duì)68 例漿液性腺癌患者中的TIL 進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)高-中分化組癌巢及間質(zhì)內(nèi)的CD4+/CD8+比值及癌巢內(nèi)CD8+/FoxP3+比值均高于低分化組，說(shuō)明高分化患者體內(nèi)的免疫平衡整體傾向于抗腫瘤效應(yīng)，這類(lèi)患者對(duì)免疫治療可能更加敏感，但這一猜測(cè)可能還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。

3.3 與臨床分期的關(guān)系 多項(xiàng)研究表明[8，10，11，16]，晚期患者腫瘤組織中的CD8+T 細(xì)胞明顯多于早期患者；而CD4+T 細(xì)胞及Th17、Treg 細(xì)胞亞群在早、晚期患者中無(wú)明顯差別。就免疫細(xì)胞比值而言，晚期患者癌巢內(nèi)的CD4+/CD8+、CD8+/FoxP3+比值均低于早期患 者[10，12]，Treg/Th17 比值高低則與分期無(wú)關(guān)[11]。Leffers N 等[17]的研究顯示，晚期患者中高比例的CD8+T 細(xì)胞、記憶T 細(xì)胞和Treg 細(xì)胞與疾病特異性存活率增加有關(guān)，此外，晚期患者癌巢內(nèi)高CD4+/CD8+比值、CD8+/FoxP3+比值同樣是患者預(yù)后的保護(hù)因素[10，17]。

3.4 與復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)系 與原發(fā)卵巢癌組織相比，網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移組織中的CD3+、CD8+細(xì)胞更少，CD4+細(xì)胞數(shù)量則沒(méi)有差異[8]，但有研究認(rèn)為CD8+，CD45R0+和Treg 細(xì)胞在兩者間沒(méi)有差異[17]。值得注意的是，無(wú)論是原發(fā)癌組織還是網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移組織，高比例的Treg 細(xì)胞和記憶T 細(xì)胞均與疾病特異性生存期改善有關(guān)。卵巢癌患者復(fù)發(fā)前后的TIL 也存在一定的聯(lián)系，具體而言，絕大多數(shù)具有高密度TIL 的患者在復(fù)發(fā)后依舊具有高密度的TIL，TIL 密度低的患者復(fù)發(fā)后TIL 也會(huì)出現(xiàn)一定程度的上升[18]。Stansk M 等[18]研究認(rèn)為復(fù)發(fā)組織中的CD4+T 細(xì)胞往往增多，而CD8+、CD3+T 細(xì)胞無(wú)明顯變化。另外，與淋巴結(jié)外復(fù)發(fā)卵巢癌患者相比，孤立淋巴結(jié)復(fù)發(fā)患者有更高密度的CD3+、CD8+T 細(xì)胞浸潤(rùn)，且有更長(zhǎng)的總體生存期[19]，這表明CD8+T 細(xì)胞可能參與了抗腫瘤免疫，導(dǎo)致孤立淋巴結(jié)復(fù)發(fā)患者病情進(jìn)展更加緩慢。

3.5 與新輔助化療的關(guān)系 有研究表明[20-22]，新輔助化療（neoadjuvant chemotherapy，NACT）可以會(huì)改變局部免疫狀態(tài)，通過(guò)刺激或抑制宿主的TIL 來(lái)調(diào)節(jié)治療效果。Mesnage SJL 等[23]報(bào)道稱(chēng)Treg 細(xì)胞在癌組織和癌旁組織中的浸潤(rùn)水平明顯低于新輔助化療前，CD8+T 細(xì)胞在NACT 前后變化不大。也有研究者認(rèn)為NACT 后CD8+、CD4+T 細(xì)胞的浸潤(rùn)密度增加，Treg 細(xì)胞在NACT 前后無(wú)明顯變化[24]。B?hm S等[25]對(duì)54 例高級(jí)別漿液性卵巢癌患者進(jìn)行研究，結(jié)果顯示NACT 前后CD8+、CD4+T 細(xì)胞及記憶T 細(xì)胞無(wú)顯著差異，但在化療效果好的患者中Treg 細(xì)胞明顯減少，這表明新輔助化療可以改變腫瘤免疫微環(huán)境，在新輔助化療后，根據(jù)腫瘤的免疫狀況，結(jié)合適當(dāng)?shù)木S持免疫療法，可能是一種改善晚期卵巢癌患者預(yù)后的方法。

3.6 與基因突變的關(guān)系 錯(cuò)配修復(fù)（mismatch repair，MMR）基因在維持遺傳保真度中起重要作用，MMR缺陷型卵巢癌是一個(gè)獨(dú)特的分子亞組[26]。研究表明[27]，與正常的卵巢癌患者相比，MMR 缺陷型卵巢癌患者有更多的CD3+、CD8+T 細(xì)胞以及更長(zhǎng)的無(wú)進(jìn)展生存期，這類(lèi)患者可能是抗PD-1/PD-L1 治療的理想人選。雖然子宮內(nèi)膜樣腺癌中MMR 缺陷更為常見(jiàn)，但Aysa A 等[28]研究認(rèn)為，這類(lèi)患者的TIL 與MMR 基因不存在聯(lián)系。此外，大約50%的高級(jí)別漿液性腺癌在同源重組（homologous recombination，HR）DNA修復(fù)途徑中具有遺傳和表觀遺傳學(xué)改變，最常見(jiàn)于BRCA1 和BRCA2 基因[29]。與無(wú)HR 基因改變的患者相比，BRCA1/2 突變患者CD3+、CD8+T 細(xì)胞顯著增加，且CD3+T 細(xì)胞與PD-1+細(xì)胞在數(shù)量上呈正相關(guān)[30]，CD3+T 細(xì)胞也許可以作為PD-1 的替代標(biāo)志物，但這需要進(jìn)一步研究來(lái)確定TIL 的數(shù)量是否可以預(yù)測(cè)抗PD-1 或抗PD-L1 治療的效果[30]。

4 總結(jié)

在不同臨床病理特征的卵巢癌中，TIL 的分布不同，且對(duì)患者的預(yù)后有一定的影響。但T 淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)差異除了與各種臨床病理因素有關(guān)外，還與檢測(cè)方式的差異、樣本量大小有關(guān)，為了更好地研究T 淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)，應(yīng)建立統(tǒng)一規(guī)范的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，加大樣本量，減少患者異質(zhì)性的干擾。另外，目前的研究者多專(zhuān)注于TIL 與患者預(yù)后的關(guān)系，但并未在具體免疫機(jī)制上做深入研究，這也是未來(lái)努力的方向。