大豆粉尿代謝產(chǎn)物雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素與圍絕經(jīng)期癥狀的相關(guān)性分析

蔡春芳 黃華勇

1廣州市婦女兒童醫(yī)療中心婦產(chǎn)科（廣州 510120）；2南方醫(yī)科大學(xué)附屬中山博愛醫(yī)院婦保科（廣東中山 528400）

圍絕經(jīng)期癥狀指的是婦女絕經(jīng)前后出現(xiàn)性激素變化所導(dǎo)致的一系列軀體及精神心理癥狀。近期癥狀主要是月經(jīng)紊亂、血管舒張癥狀、自主神經(jīng)功能失調(diào)和出現(xiàn)精神神經(jīng)癥狀；遠(yuǎn)期癥狀則包括：泌尿生殖器絕經(jīng)后綜合征、骨質(zhì)疏松、阿爾茨海默病和心血管病變［1-2］。圍絕經(jīng)期癥狀的出現(xiàn)將嚴(yán)重影響婦女的工作、學(xué)習(xí)和生活質(zhì)量。

激素補(bǔ)充治療僅在有適應(yīng)癥且無禁忌證時(shí)才能選用。作為食品的大豆粉用于改善圍絕經(jīng)期癥狀是當(dāng)前的一個(gè)研究熱點(diǎn)。大豆粉是由脫脂大豆制成的豆粉，大豆粉的大豆蛋白質(zhì)和不飽和脂肪酸含量高，是一種營養(yǎng)價(jià)值較高的食物。VANELLI等［3］研究發(fā)現(xiàn)，大豆粉被代謝為雙氫化大豆黃素，后者進(jìn)一步代謝為雌馬酚和鄰脫甲基安哥拉紫檀素，這一代謝過程受到個(gè)特差異較大的腸道菌群的制約。KIM 等［4］研究報(bào)道：對(duì)于降低乳腺癌和骨質(zhì)疏松方面，雙氫化大豆黃素，雌馬酚和鄰脫甲基安哥拉紫檀素比大豆粉具有更高的生物學(xué)活性。前期研究［5］結(jié)論證實(shí)：日服用50 g 大豆粉，有利于改善圍絕經(jīng)期患者的癥狀。大豆粉的代謝產(chǎn)物雙氫化大豆黃素，雌馬酚和鄰脫甲基安哥拉紫檀素與圍絕經(jīng)期癥狀的相關(guān)性研究尚未達(dá)成共識(shí)。本文通過比較患者服用大豆粉前后出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀陽性率和評(píng)分的差異，分析代謝產(chǎn)物雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素與圍絕經(jīng)期癥狀的相關(guān)性，旨在為圍絕經(jīng)期患者提供一種安全有效的治療方式。

1 資料與方法

1.1 一般資料使用隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)收集2016年7月至2019年12月期間，于中山市博愛醫(yī)院婦保科就診的97 例圍絕經(jīng)期患者為研究對(duì)象，患者年齡41.23～55.68 歲，平均（47.98±4.11）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者處于圍絕經(jīng)期；具有小學(xué)以上文化且可正常交流；未接受圍絕經(jīng)期綜合征的藥物治療；無高血壓；無糖尿病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有精神疾病；依從性差；補(bǔ)充劑服用量小于應(yīng)服量的60%；出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)不宜繼續(xù)參加研究者；中途因各種原因要求退出研究者。本研究獲得中山市博愛醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理審批號(hào)：2016-KY-002），患者均簽署知情同意書。

1.2 材料與試劑香粉一族熟黃豆粉（生產(chǎn)許可證編號(hào)：341607010191；產(chǎn)品規(guī)格：50 g/包；產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：Q/BFF0002S；儲(chǔ)藏方法：密封，干燥處；保質(zhì)期：360 d）購自亳州寶豐生物科技有限公司。甲醇（色譜級(jí)）購自上海化學(xué)試劑公司。氫氧化鈉（優(yōu)級(jí)純）購自上海山海實(shí)驗(yàn)二廠。乙酸（優(yōu)級(jí)純）購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。乙酸乙酯（色譜級(jí)）、磷酸（優(yōu)級(jí)純）、乙二胺四乙酸二鈉鹽（基準(zhǔn)試劑）均購自天津科密歐試劑公司。

1.3 雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素的檢測(cè)在充分告知本研究?jī)?nèi)容并征得患者同意后，讓患者每天早餐1 h 后，服用50 g 的大豆粉（食品），持續(xù)90 d 后，留取患者24 h 尿液，儲(chǔ)存于-20～-40 ℃的尿液樣品取出后用水浴解凍，葡糖苷酸酶使其早期解離后加入5 mL 的乙酸乙酯萃取兩次。萃取液減壓真空干燥，降殘?jiān)? mL 的流動(dòng)相溶解備用。使用高效液相色譜儀分析，經(jīng)過254 nm 通道和280 nm 通道，混合流動(dòng)相梯度程序洗脫檢測(cè)，最后使用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素的含量。測(cè)定尿液代謝產(chǎn)物雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素的含量。

1.4 圍絕經(jīng)期患者癥狀的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)圍絕經(jīng)期患者服用大豆粉前后癥狀的評(píng)分問卷標(biāo)準(zhǔn)均按改良Kupperman 評(píng)分量表［6］執(zhí)行。主要包括13 個(gè)條目。潮熱出汗；感覺異常；失眠；情緒波動(dòng)；抑郁、疑心；眩暈；疲乏；骨關(guān)節(jié)痛；頭痛；心悸；皮膚蟻?zhàn)吒校恍陨睿幻谀蚋腥尽１狙芯恐?～14 分定義為患者圍絕經(jīng)期癥狀陰性，15 分以上定義為陽性，陽性又進(jìn)一步分為輕度陽性（總分為15～20），中度陽性（總分為20～35），重度陽性（總分＞35）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。率的比較采用的是配對(duì)資料的χ2檢驗(yàn)。均數(shù)的比較先行正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn)。本文中服用大豆粉前后圍絕經(jīng)期癥狀綜合評(píng)分屬于非正態(tài)性分布和/或方差不齊，以M（P25，P75）表示，采用的是兩相關(guān)樣本的非參數(shù)檢驗(yàn)。雙變量相關(guān)分析采用的是Spearman 相關(guān)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者服用大豆粉前后出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀陽性率的比較97 例患者服用大豆粉前出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀的陽性率為36.08%（35/97），服用大豆粉后出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀的陽性率為23.71%（23/97），服用大豆粉后出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀的陽性率低于服用大豆粉前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=53.41，P＜0.001）。見表1。

表1 患者服用大豆粉前后的圍絕經(jīng)期癥狀的觀測(cè)結(jié)果Tabl.1 Observation results of perimenopausal symptoms of patients before and after taking soybean powder 例

2.2 患者服用大豆粉前后圍絕經(jīng)期癥狀綜合評(píng)分的比較97 例患者服用大豆粉前圍絕經(jīng)期癥狀綜合評(píng)分為13.00（10.50～31.00）分，服用大豆粉后圍絕經(jīng)期癥狀綜合評(píng)分為7.00（4.00～14.00）分，服用大豆粉后出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀的綜合評(píng)分低于服用大豆粉前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H=-8.52，P＜0.001）。見表2。

表2 患者服用大豆粉前后圍絕經(jīng)期癥狀綜合評(píng)分的比較Tab.2 Comparison of comprehensive scores of perimenopausal symptoms of patients before and after taking soybean powder

2.3 雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素與圍絕經(jīng)期癥狀的相關(guān)性雌馬酚劑量與圍絕經(jīng)期癥狀加權(quán)總分呈負(fù)相關(guān)（r=-0.23，P=0.02）。雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素與圍絕經(jīng)期癥狀加權(quán)總分均不相關(guān)（r1=-0.12，P1=0.26；r2=-0.08，P2=0.31）。雌馬酚劑量與失眠呈負(fù)相關(guān)（r=-0.23，P=0.02）。雙氫化大豆黃素與心悸呈負(fù)相關(guān)（r=-0.27，P=0.007）。鄰脫甲基安哥拉紫檀素與潮熱出汗、情緒波動(dòng)、心悸均呈負(fù)相關(guān)（r1=-0.22，P1=0.03；r2=-0.21，P2=0.04；r3=-0.21，P3=0.04）。見表3。

表3 大豆粉尿代謝產(chǎn)物與圍絕經(jīng)期癥狀的相關(guān)性Tab.3 Correlation between soybean powder urine metabolites and perimenopausal symptoms

3 討論

伴隨著我國人口老齡化進(jìn)一步加深，越來越多的女性即將步入圍絕經(jīng)期。MINKIN 等［7］研究發(fā)現(xiàn)，大約有35%的女性的晚年生活是在圍絕經(jīng)期度過的，圍絕經(jīng)期癥狀對(duì)女性的危害巨大。歷經(jīng)我國眾多的婦產(chǎn)科專家和學(xué)者的艱苦奮斗，就如何緩解圍絕經(jīng)期的近期癥狀，早期發(fā)現(xiàn)和預(yù)防骨質(zhì)疏松癥、動(dòng)脈硬化癥等疾病方面做了大量的專業(yè)研究。激素補(bǔ)充治療因有效緩解圍絕經(jīng)期相關(guān)癥狀，改善生活質(zhì)量，成為了目前廣泛接受的治療方式［8］。但是，龐曉奡等［9］研究報(bào)道，激素補(bǔ)充治療，根據(jù)用藥類型、劑量、用途徑和時(shí)間的不同，其風(fēng)險(xiǎn)存在較大的差異。激素的使用是有禁忌癥的，而且患者使用激素需要個(gè)體化的用藥。CHEN 等［10］研究報(bào)道兩個(gè)角度比較了97 例研究患者服用大豆粉前后出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀的差異。其一，患者服用大豆粉前后出現(xiàn)圍絕經(jīng)期癥狀陽性率的差異比較，說明了服用大豆粉有利于減少圍絕經(jīng)期癥狀的發(fā)生。其二，患者服用大豆粉前后圍絕經(jīng)期癥狀綜合評(píng)分的差異比較，說明服用大豆粉與患者圍絕經(jīng)期癥狀嚴(yán)重程度相關(guān)。本研究結(jié)論與MAYO 等［11］研究報(bào)道的結(jié)論一致。LIU等［12］探討的是全大豆和純大豆苷元對(duì)中國絕經(jīng)后女性甲狀腺功能的影響。CHáVEZ-PéREZ 等［13］研究發(fā)現(xiàn)，異黃酮有利于降低圍絕經(jīng)期婦女阿爾茨海默病的發(fā)病率。而本文除了探討發(fā)病率，還進(jìn)一步研究了大豆粉對(duì)減少圍絕經(jīng)期癥狀的評(píng)分，即嚴(yán)重程度的影響。本文的研究數(shù)據(jù)更為全面，結(jié)果更加嚴(yán)謹(jǐn)，結(jié)論可信度高。

本研究認(rèn)為，雌馬酚劑量與圍絕經(jīng)期癥狀加權(quán)總分、失眠均呈負(fù)相關(guān)，說明雌馬酚含量越高，患者的圍絕經(jīng)期癥狀越輕，睡眠質(zhì)量越好。這與NG 等［14］研究結(jié)論一致。王路等［15］報(bào)道了71 例圍絕經(jīng)期患者的尿中雌馬酚濃度與圍絕經(jīng)期指數(shù)評(píng)分值呈負(fù)相關(guān)的關(guān)系。與王路等［15］不同的是，本文進(jìn)一步探討了雌馬酚劑量與評(píng)分量表的13 個(gè)條目之間的相關(guān)性，研究更加深入，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更有針對(duì)性。

雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素與圍絕經(jīng)期癥狀加權(quán)總分均不相關(guān)。這與CAGNACCI等［16］研究結(jié)論不一致，究其因，可能是因?yàn)楸狙芯康牟±枯^少引起的。本文的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，雙氫化大豆黃素與心悸，鄰脫甲基安哥拉紫檀素與潮熱出汗、情緒波動(dòng)、心悸均呈負(fù)相關(guān)。說明雙氫化大豆黃素可以改善患者的心悸，鄰脫甲基安哥拉紫檀素有利于減輕患者潮熱出汗、情緒波動(dòng)、心悸的癥狀。本文深入探討了雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素與圍絕經(jīng)期癥狀的13 個(gè)條目之間的相關(guān)性，這是以往文獻(xiàn)尚未報(bào)道過的。

綜上所述，雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素三種尿代謝產(chǎn)物雖然相互獨(dú)立，與它們具體相關(guān)的圍絕經(jīng)期癥狀不一致，但是改善的這些不同的癥狀之間又是相輔相成，構(gòu)成一個(gè)整體的。BORDA 等［17］、DEFREYNE 等［18］研究報(bào)道，激素補(bǔ)充治療的禁忌癥較多：已知或可疑妊娠、患乳腺癌、患有性激素依賴性腫瘤、不明原因的陰道流血等。PINKERTON［19］研究報(bào)道，激素補(bǔ)充治療的慎用情況包括：子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥、尚未控制的糖尿病和嚴(yán)重的高血壓等。GOODWIN 等［20］研究報(bào)道，激素補(bǔ)充治療的劑量和用藥方案應(yīng)個(gè)體化。而大豆粉是日常食品，真正發(fā)揮作用的可能是其代謝產(chǎn)物雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素，其代謝產(chǎn)物有望成為圍絕經(jīng)期相關(guān)癥狀的替代療法。我國是大豆起源國，食用大豆完全自給，擁有豐富的大豆種質(zhì)資源。作為一種最簡(jiǎn)便及最經(jīng)濟(jì)的防治方法，大豆粉推廣使用的價(jià)值高，具有良好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

受到研究病例量的影響，本研究結(jié)論或許存在一定的偏差，下一步的科研工作方向是：收集更多的更年期病例，使用單因素分析結(jié)合logistic 回歸分析，從雌馬酚、雙氫化大豆黃素、鄰脫甲基安哥拉紫檀素三個(gè)影響因素之外，如從大豆粉其他含量更低的尿代謝產(chǎn)物：染料木黃酮和黃豆黃素中去挑選出其他有利于改善圍絕經(jīng)期癥狀的因素，并找出其最佳劑量值，為臨床從飲食營養(yǎng)途徑改善圍絕經(jīng)期癥狀提供科學(xué)依據(jù)。