阿爾茨海默病患者口腔微生物及局部炎癥因子表達變化的研究

陳玉英 郭玲

阿爾茨海默病起病隱匿，可導致患者出現記憶障礙、認知下降、精神癥狀、行為障礙等多方面的異常，對患者的生存質量造成極大危害[1-2]。與本病相關的研究眾多，而關于病因的研究是重點。近年來關于菌群失調與本病關系的研究多見，較多關于腸道菌群失調與阿爾茨海默病發生發展的關系研究，而關于口腔微生物方面的研究不斷增多，且現存研究結果的差異較為突出。同時，口腔局部及腦脊液炎癥因子在本類患者中的表達結果研究也存在較大差異[3-4]，且其與口腔微生物方面的關系研究不足，因此對于口腔微生物與局部炎癥因子表達變化的研究空間較大。本研究分析了阿爾茨海默病患者口腔微生物及局部炎癥因子表達的研究意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年3 月-2021 年2 月福建省立醫院南院收治的90 例阿爾茨海默病患者為觀察組，選取同時期的90 例非神經系統疾病患者為對照組。對照組納入標準：腦脊液及其他檢查為非神經系統疾病。排除標準：（1）合并高血壓、糖尿病、慢阻肺或其他慢性基礎疾病；（2）1 個月內發生創傷或進行手術治療；（3）存在心肝腎肺等器官功能不全。觀察組納入標準：符合阿爾茨海默病診斷標準。排除標準：（1）合并高血壓、糖尿病、慢阻肺或其他慢性基礎疾病；（2）合并其他神經系統疾病；（3）1 個月內發生創傷或進行手術治療；（4）存在心肝腎肺等器官功能不全。本研究經本院倫理委員會批準，家屬對本研究知情同意。

1.2 方法 采集兩組齦溝液及腦脊液標本，其中齦溝液采集部位為非齲齒及修復體部位，漱口后采用濾紙條輕輕插入牙周袋，30 s 后取出，加入去離子水；腦脊液采用診斷性腰椎穿刺獲得，標本采集量為2.0 mL，將齦溝液及腦脊液標本采用高溫低速離心機進行離心，齦溝液標本（離心半徑、時間及速度分別為15 cm、15 min 及13 000 r/min），取離心后的上清液，以酶聯免疫法（ELISA 法）檢測白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）水平。另將齦溝液濾紙條沉淀物進行微生物檢測，統計牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率，并以PCR 法檢測其Ct 值。比較兩組及觀察組中不同嚴重程度患者的上述指標，采用Pearson 相關性分析觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體者的Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子的關系，采用Spearman 秩相關分析觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體者的Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子與阿爾茨海默病嚴重程度的關系。

1.3 統計學處理 數據檢驗選用SPSS 23.0 軟件包，計數資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗；計量資料用（）表示，兩組比較采用t 檢驗，重復測量的計量資料為方差分析，關系分析為Pearson相關性分析及Spearman 秩相關分析。P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 對照組男41 例，女49 例；年齡56～82 歲，平均（69.0±7.1）歲。觀察組男40 例，女50 例；年齡55～83 歲，平均（69.1±7.0）歲；嚴重程度[臨床癡呆評定量表（CDR 評分）]：輕度（1 分）30 例，中度（2 分）35 例，重度（3 分）25 例。兩組一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。觀察組輕度男13 例，女17 例；年齡55～83 歲，平均（68.9±6.9）歲。中度男15 例，女20 例，年齡55～82 歲，平均（69.2±7.2）歲。重度男12 例，女13 例；年齡56～83 歲，平均（69.1±7.1）歲。輕度、中度及重度患者一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率及Ct 值比較 觀察組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體檢出率及Ct 值均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。對照組牙齦卟啉單胞菌Ct 值為（0.02±0.01），低于觀察組的（0.05±0.02），對照組齒垢密螺旋體Ct 值為（0.02±0.01），低于觀察組的（0.06±0.02），差異均有統計學意義（t=3.307、4.817，P<0.05），見表1。

表1 兩組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率比較[例（%）]

2.3 觀察組中不同嚴重程度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率及Ct 值比較 觀察組重度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率均高于輕度和中度患者，且中度患者均高于輕度患者，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表2。觀察組輕度患者牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體Ct 值分別為（0.03±0.01）、（0.03±0.01），中度患者為（0.05±0.02）、（0.06±0.02），重度患者為（0.06±0.02）、（0.09±0.03）。觀察組重度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的Ct 值均高于輕度和中度患者，且中度患者均高于輕度患者，差異均有統計學意義（t牙齦卟啉單胞菌=8.998、5.404、3.616，t齒垢密螺旋體=6.972、4.160、5.065，P<0.05）。的檢出率比較[例（%）]

表2 觀察組中不同嚴重程度患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體

2.4 兩組腦脊液及齦溝液炎癥因子比較 觀察組腦脊液及齦溝液的IL-1β 和IL-6 均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。

表3 兩組的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較[pg/mL，（）]

表3 兩組的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較[pg/mL，（）]

2.5 觀察組中不同嚴重程度患者的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較 觀察組重度患者腦脊液和齦溝液中的IL-1β 和IL-6 均高于輕度和中度患者，且中度患者均高于輕度患者，差異均有統計學意義（P<0.05），見表4。

表4 觀察組中不同嚴重程度患者的腦脊液及齦溝液炎癥因子比較

2.6 觀察組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子的關系分析 Pearson 相關性分析顯示，觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子均呈正相關（P<0.05），見表5。[pg/mL，（）]關系分析

表5 牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體與腦脊液及齦溝液炎癥因子的

2.7 觀察組牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子與阿爾茨海默病嚴重程度的關系分析 Spearman 秩相關分析顯示，觀察組中檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子均與阿爾茨海默病嚴重程度均呈正相關（P<0.05），見表6。

表6 牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體、腦脊液及齦溝液炎癥因子與阿爾茨海默病嚴重程度的關系分析

3 討論

阿爾茨海默病作為神經系統退行性病變，其對患者的認知、行為、人格等多方面均有較大的改變，給患者、家屬及社會均造成較大的負擔，因此對本類患者進行診治與防控的研究多見。與阿爾茨海默病相關的病因研究中，感染及炎癥假說是研究較多及較熱的方面，而較多研究認為，導致阿爾茨海默病相關的β-淀粉樣蛋白沉積的發生，可能與炎癥的持續存在有關，因此認為炎癥網絡的存在可能與阿爾茨海默病的發生發展有一定的關系[5-7]。另外，菌群異常作為近年來在阿爾茨海默病患者中研究較多的方面，而牙齦卟啉單胞菌及齒垢密螺旋體是研究較多的菌群類型，研究普遍認為，上述病原菌的感染導致機體處于炎癥反應狀態，進而通過炎癥反應導致阿爾茨海默病的發生發展[8-10]。與阿爾茨海默病相關的炎癥因子中，IL-1β 及IL-6 是研究較多的指標，有研究認為其在本類患者的腦脊液中呈現較高表達的狀態，是導致局部組織損傷的重要原因[11-13]。同時牙齦卟啉單胞菌及齒垢密螺旋體的感染可能影響到機體的免疫代謝，進而影響阿爾茨海默病的發生發展。但是現存的上述方面的研究仍存在一定差異，導致上述指標與疾病的關系研究仍有待進一步研究，以為疾病的診斷與防控提供確切的參考依據[14-16]。

本研究經細致探究的結果顯示，阿爾茨海默病患者的牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體的檢出率及Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子均相對較高，而阿爾茨海默病嚴重程度的差異也導致上述方面檢測結果的差異顯著，Pearson 相關性分析顯示，觀察組檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值與腦脊液及齦溝液炎癥因子均呈正相關（P<0.05），Spearman 秩相關分析顯示，觀察組檢出牙齦卟啉單胞菌、齒垢密螺旋體患者的Ct 值、腦脊液及齦溝液炎癥因子均與阿爾茨海默病嚴重程度均呈正相關（P<0.05），因此對阿爾茨海默病患者進行口腔微生態的改善及炎癥反應的控制需求較高，同時也提示微生物失調及炎癥反應可能與本病有密切的關系，應重視對阿爾茨海默病高危人群上述方面的監測與調控[17-20]。

綜上所述，阿爾茨海默病患者口腔微生物及局部炎癥因子表達顯著異常，且與阿爾茨海默病嚴重程度有密切的關系，在阿爾茨海默病的診治與防控中具有較高的檢測意義。