裸藻屬植物對氯化鈉的耐受性試驗研究

林啟存，蔡麗娟，王宇希，許寶青，戴瑜來

(杭州市農業科學研究院，浙江 杭州 310024)

裸藻屬又稱眼蟲藻屬，含有葉綠素、能進行光合作用，同時又具鞭毛、能運動，且無細胞壁，多為單細胞浮游植物。它們喜生活在靜水且有機質豐富的小水體環境中，在養殖池塘中較易形成綠色或鐵銹色水華。

裸藻水華呈膜狀，不僅黏性強、色彩強烈、感觀度差，大量繁殖時還能覆蓋水體表層，阻擋光線照入，影響中下層浮游植物的光合作用，且藻類大量死亡時容易敗壞水質，分泌的物質還可能對魚產生毒害作用。因此，裸藻水華對池塘養殖生產有潛在的危害。

氯化鈉是在水產養殖中使用的常見產品，目前國內外關于氯化鈉對魚的毒性作用已有較多研究，但對裸藻屬植物的毒性研究報道很少。本文嘗試用不同濃度的氯化鈉對裸藻進行殺滅試驗，期望為裸藻水華的科學防治提供一定依據。

一、材料與方法

1.試驗裸藻

試驗用裸藻取自大宗淡水魚養殖池塘，池水綠色，透明度45厘米，pH7.30。直接用5升的礦泉水桶，取表層帶有綠色膜狀裸藻水華的池水4升，蓋上瓶蓋，上下搖晃數次，盡量讓膜狀裸藻散開，裸藻密度不少于100萬個/升。

2.氯化鈉

氯化鈉為分析純，純度＞99%，由生工生物工程(上海)股份有限公司生產。

3.試驗場地和器材

試驗在杭州市農業科學研究院水產研究所實驗室內進行，試驗瓶容量380毫升；用普通光學顯微鏡計數。

4.試驗方法

參照李學軍等(2003)控制羅非魚池塘中裸藻的海水試驗鹽度，在試驗瓶中加入含5個氯化鈉濃度梯度的裸藻試驗液200毫升進行預試驗，觀察24小時死亡率，在裸藻有明顯殺死和全部致死的最低質量濃度之間，確定正式試驗濃度為10～20克/升。按等對數間距設計氯化鈉濃度試驗梯度組，即10.00、11.50、13.23、15.21、17.49克/升。同時設立1個空白對照組。每組設置2個平行。試驗開始后，分別作4、24、48、72小時的存活記錄。試驗期間，水溫為(18±1)℃。

5.裸藻計數和存活標準的確定

在顯微鏡(10×10)下隨機計數100個裸藻，觀察裸藻是否存在游動、轉動或鞭毛擺動等活動狀態，若3秒內未出現明顯活動，則判裸藻死亡。統計裸藻的存活數，計算裸藻的存活率、死亡率和處理組的殺滅率。計算公式為：

存活率(%)＝存活數/100×100；

死亡率(%)＝(1－存活率)×100；

殺滅率(%)＝(處理組死亡率－對照組死亡率)/對照組存活率×100。

二、結果與分析

1.不同濃度氯化鈉處理對裸藻死亡率的影響

不同濃度氯化鈉處理試驗的結果見圖1。從圖1可看出，與對照組相比，試驗期間試驗組存活率低、死亡率高，4小時內對照組裸藻死亡率在50%以下，而試驗組裸藻死亡率都在80%以上，17.49克/升濃度組死亡率達100%；48小時內15.21克/升濃度組死亡率達100%；72小時內，其他試驗組死亡率隨氯化鈉濃度的升高而升高，隨試驗時間的延長而升高。

圖1 氯化鈉處理對裸藻存活率(左)和死亡率(右)的影響

2.不同濃度氯化鈉處理對裸藻的殺滅率

不同濃度氯化鈉處理對裸藻的殺滅率見表1。從表1可看出，試驗濃度范圍內，各氯化鈉處理組對受試裸藻均有較強的殺滅效果，4小時內裸藻殺滅率均達70%以上，17.49克/升濃度組殺滅率達100%；48小時內15.21克/升濃度組殺滅率達100%。

表1 不同濃度氯化鈉處理對裸藻的殺滅率

三、討論

裸藻屬植物是一類容易變形且以單細胞為主的浮游植物，李學軍等(2003)在做裸藻的控制試驗時，將試驗裸藻分紡錘形、陀螺形和圓形3種形態，其中紡錘形為一般正常活動狀態，陀螺形為受外界刺激后不活動的應激狀態，圓形為不可恢復死亡狀態。由于裸藻種類不同，受外界刺激所表現的活動狀態也可能有所不同，綠色裸藻可在降溫、干燥等簡單刺激下誘導成圓形可轉動的包囊(陳建琴等，2003)。本文試驗所用的裸藻為綠色水華裸藻，在顯微光照條件下，可能受樣品水分蒸發等刺激影響，觀測中無論是試驗組還是對照組，大部分原處于紡錘形狀態的裸藻會較迅速地變為原地轉動的圓形包囊，如僅根據形態判別存活會影響試驗結果的準確性，因此本文以活動與否為標準進行裸藻存活判別。

在淡水養殖中，氯化鈉常以浸浴、潑灑等外用方式進行養殖對象疾病預防或環境消毒，處理效果與處理濃度、處理時間有關。本文試驗顯示，10.00克/升以上的氯化鈉濃度對試驗裸藻有明顯的殺滅作用，4小時內10.00克/升氯化鈉處理組對裸藻殺滅率可達70%以上、17.49克/升濃度處理組殺滅率可達100%，48小時內15.21克/升濃度組對試驗裸藻殺滅率也達100%。淡水魚對氯化鈉雖有一定的耐受性，如鰱魚魚種能耐受鹽度3.84達24小時而未發生死亡，黃顙魚稚魚能耐受6.00克/升的氯化鈉溶液24小時而未發生死亡，高體鳑鲏幼魚能耐受7.50克/升的氯化鈉溶液24小時而未發生死亡，團頭魴魚種能耐受鹽度10.00達96小時而未發生死亡，青魚魚種能耐受鹽度11.40達96小時而未發生死亡(楊廣等，2006；陳萬光等，2010；臧維玲等，1989)。但多數淡水魚的鹽度安全濃度不高，低于有效殺滅目標裸藻濃度10.00克/升，且不同種類間耐受性存在一定差異，以鰱魚耐鹽能力相對較弱，其魚種的鹽度安全濃度為1.50克/升(臧維玲等，1989)。因此，常規魚養殖中不宜直接采取全池潑灑氯化鈉方法防控裸藻水華，可在池塘下風口裸藻水華聚集區域使用氯化鈉化水后局部潑灑防控，其用量以不超過池中最敏感魚(如鰱魚)的安全濃度計算的全塘潑灑劑量為宜。

2022年4月中旬，杭州市農科院水產所基地養殖池出現綠色藻類水華。該池為長方形，長20米、寬14米，水深1.5米左右，主要養殖朱紋錦魚，套養少量鰱鳙魚。綠色藻類呈膜狀，漂浮于水面，無風時基本覆蓋全池，有風時常會被吹到池子一角或一側。挑取該膜狀藻類，放到載玻片上并置顯微鏡下檢查，發現樣品中裸藻密密麻麻，有圓形的，也有梭形的，且大多能變形，因此該水華被確定為裸藻水華。在裸藻水華被吹到較小的角落時，計算該三角形水域體積，并根據以上氯化鈉試驗結果，按每立方米水體10千克氯化鈉的用量進行局部潑灑處理。經1周的觀察，池中魚活動無明顯異常，水面僅有少量膜狀物，裸藻水華已基本得到控制。