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幾種復配美白劑的美白功效研究

2022-09-15 11:53:10羅婷婷孫祥靈趙昆段國梅李土桂何秋星
中國化妝品 2022年4期

十八大報告指出,要堅定理想信念,堅守共產黨人的精神追求。習近平在參觀《復興之路》展覽后,強調“空談誤國、實干興邦”。這就要求我們各級黨員領導干部,要腳踏實地、真抓實干,帶領廣大員工推動公司各項事業創新發展。

中國素有“一白遮三丑”的審美觀念,追求“膚如雪,凝如脂”歷來是中國女性關注的熱點話題。目前,大多數美白劑的美白作用機制主要通過抑制酪氨酸酶活性、阻斷黑色素合成過程、加速黑色素角質細胞脫落、抑制黑色素向角質細胞遷移、清除自由基等方面來改善皮膚黑色素沉著、膚色暗沉等問題

。因此,美白型護膚品在化妝品領域的研究中具有較為廣闊的市場和發展潛力。

思維型學習疑難也稱組織型學習疑難,它是在信息的組織時出現的異常情況而產生的學習疑難.美國學者安東尼·格里高根據知覺的具體與抽象,規則的次序與隨機將人類的思維分成了四種:具體而有序的思維、抽象而有序的思維、具體而隨機的思維、抽象而隨機的思維[25].這四種思維類型并無好壞之分,但它們之間的思維形式有所不同[26].不同的思維形式在一方面表現出一些優勢的同時,往往在另一方面會表現出劣勢,以致于出現一些思維障礙,從而產生思維型學習疑難.

實驗部分

01 試劑與儀器

煙酰胺、熊果苷、維生素C、凝血酸、光甘草啶、谷胱甘肽、白藜蘆醇,廣州品赫生物技術有限公司;FeSO

、水楊酸,天津市福晨化學試劑廠;三羥甲基氨基甲烷,上海潤捷化學試劑有限公司;DPPH、鄰苯三酚、酪氨酸酶,上海寶曼生物科技有限公司;B16小鼠黑色素瘤細胞株,北京北納創聯生物技術研究院;DMEM培養基、0.25%胰蛋白酶、胎牛血清,美國Gbico公司;DMSO、MTT、TritonX-100,美國MP Biomedicals公司。

UV-2600,CH紫外分光光度計,島津公司;SC-3610低速離心機,安徽中科中佳科學儀器有限公司;二氧化碳細胞培養箱,上海圣科儀器設備有限公司;Infinite M200 PRO酶標儀,帝肯貿易有限公司。

慢性肺源性心臟病是慢性阻塞性肺疾病的主要繼發病,并逐漸導致右心衰竭,是影響中老年患者生活質量,及導致死亡的主要因素之一[1] 。目前針對肺心病的治療,仍以吸氧、基礎疾病治療為主,部分合并心衰患者,增加強心利尿等傳統治療方式,具有一定效果,但是具體用藥方案,仍無統一的標準[2] 。同時,對于改善微循環、抑制氧自由基損傷、保護血管內皮等方面,仍有不足。本研究中,在常規治療方案的基礎上,增加心脈隆注射液,取得較好效果,現做如下總結。

02 實驗方法

將維生素 C(0.10、0.12、0.14、0.16、0.18mg/mL)、白藜蘆醇(0.04、0.08、0.12、0.15、0.20mg/mL)、谷胱甘肽(0.03、0.05、0.08、0.10、0.12mg/mL)、光甘草叮(0.05、0.08、0.10、0.12、0.15mg/mL)、凝血酸(0.02、0.05、0.08、0.12、0.14mg/mL)、熊果苷 (0.25、0.30、0.35、0.40、0.45mg/mL)和煙酰胺 (0.14、0.16、0.18、0.20、0.25mg/mL)分別以 DPPH自由基清除率為指標,考察7種美白原料的濃度對DPPH自由基的抗氧化作用,根據其結果篩選出對DPPH自由基清除效果最好的3種美白原料,其為組合1。

式中:表示徑流量觀測值;表示BP神經網絡對徑流量的模擬值;表示該場洪水徑流量的平均值;N表示觀測值的個數。NSE的取值為-,1,NSE的值越接近1則表示模型的模擬度越高,模型的可信度越高。

將維生素 C(0.05、0.10、0.16、0.18、0.20mg/mL)、白藜蘆醇(0.04、0.06、0.08、0.10、0.12mg/mL)、谷胱甘肽(0.10、0.12、0.14、0.17、0.20mg/mL)、光甘草叮(0.10、0.12、0.14、0.18、0.20mg/mL)、凝血酸(0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/mL)、熊果苷 (0.08、0.15、0.20、0.30、0.40mg/mL)和煙酰胺 (0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mg/mL)分別以羥自由基清除率為指標,考察7種美白原料的濃度對羥自由基的抗氧化作用,根據其結果篩選出對羥自由基清除效果最好的3種美白原料,其為組合2。

可見,中國農村宅基地制度作為由歷史形成的集體化產物,承載了億萬農民的安居和保障功能,發揮了巨大的制度效應。雖然近年來國家選擇部分地區開展農村宅基地制度改革試點,但筆者認為農村宅基地制度變遷的“內卷化”現象愈發明顯。從現階段來看,農村宅基地制度的改革只是對已有制度和有關政策的延續,而在新時代背景下農村宅基地制度改革創新真正需要指向的目標應該是突破城鄉二元土地制度構架,促進農業轉移人口市民化,加快推進農業農村現代化、振興鄉村發展,真正實現縮小城鄉差距,推動城鄉融合發展。筆者認為,現階段中國農村宅基地制度變遷的“內卷化”突出表現為兩個維度的內卷化效應。

大學生進行職業生涯規劃可以充分的了解、認識自己,對自己有很清晰的定位,通過對于自身的定位能夠確立生涯目標,隨著個人的不斷進步,職業生涯也會更加完善,進行職業生涯規劃也會更加健全。[4]

根據2.1的單因素試驗結果,確定3組實驗方案的L

(3

)正交試驗,以清除率作為指標,確定3種復配原料的最佳配比,具體實驗安排見表1、表2、表3。全文以下簡稱DPPH自由基清除試驗為組合1、羥自由基清除試驗為組合2、超氧自由基清除試驗為組合3。

(1)DPPH自由基清除試驗的測定方法

。用50%乙醇的配制DPPH溶液(0.2mmol/L),精密移取表4中各組反應液于5mL EP管中,混合后充分搖勻,避光反應30min后,置于517nm處測定其吸光度,平行實驗3次,計算其清除率。DPPH自由基清除率(%)=1-(A

-A

)/A

×100%

(3)超氧陰離子自由基清除試驗的測定方法

。取Tris-HCl緩沖液3mL與去離子水2.8mL混勻,記為1管;取Tris-HCl緩沖液3mL,去離子水1.8mL與樣液1mL混勻,記為2管。25℃下反應20min,再分別加入鄰苯三酚0.2mL,于319nm處每30s測一次,連續測4min后測定1、2管吸光度,記為△A

、△A

,平行實驗3次,計算清除率。清除率(%)=1-(△ A

/△ A

)×100%

軌道車輛的運行距離比較短,經過站臺的數目比較多,在其運行的過程中車門始終處于不停的開關狀態,這就使得車門的控制元件容易受到磨損,從而也就提高了故障出現的頻率。軌道車輛車門系統的故障程度基本上都是依據車門開關的遲鈍、經過站臺時候停留的時間延長、到了車門應該開啟的時候無法正常打開等情況來定的。從近年來城市軌道交通發展情況來看,軌道車輛車門系統的常見故障大體上可以分為兩類:

酪氨酸酶抑制率的測定方法

。

取對數期生長的B16細胞,調整細胞濃度為3×10

個/mL接種于96孔板中,每孔加入培養基100μL,置于培養箱(37℃,5% CO

)中培養24h。待細胞貼壁后吸棄原培養基,實驗組分別加入用培養基將0.03g/mL和0.06g/mL的樣液進行等濃度梯度稀釋成不同倍數的培養基100μL,對照組加入不含樣液的等體積培養基100μL,空白組加入無細胞的培養基100μL,同時設置陽性對照組含熊果苷(0.1mg/mL)、煙酰胺(0.3mg/mL)的培養基稀釋液100μL,每組設置3個復孔,繼續培養24h。在培養結束前4h,每孔加入5mg/mL MTT溶液100μL,4h后吸出上清液,每孔避光加入DMSO 50μL,振蕩10min,置于酶標儀測定490nm處的吸光度,取平均值,計算細胞活力。細胞活力(%)=(A

-A

)/(A

-A

)×100%

03 數據分析

試驗中每組重復3次,取其平均值。實驗數據采用SPSS 25 進行統計學分析,采用Origin 2018 進行繪圖。

結果與討論

04 單因素試驗結果

由表6可知,通過比較七種美白劑對DPPH清除率試驗結果表明,清除率最高的為谷胱甘肽,當其濃度為0.05mg/mL,其清除率為75.6%,還原型的谷胱甘肽是由3個氨基酸組成的三肽,其結構中的半胱氨酸殘基通過提供電子以達到清除自由基的作用

;次之為光甘草啶,當其濃度為0.15mg/mL時,其清除率為83.2%,光甘草啶為黃酮類化合物,可能是其結構中的酚羥基提供活潑氫質子,能夠有效降低自由基的氧化作用

;其次為白藜蘆醇,當其濃度為0.15mg/mL時,其清除率為71.8%,有研究表明白藜蘆醇可通過與自由基反應阻止自由基進一步鏈式反應,同時亦可抑制二硫化谷胱甘肽的形成,從而抑制自由基的生成

。即通過DPPH的清除率初步篩選出組合1的3種原料為:谷胱甘肽、光甘草啶和白藜蘆醇。

由表7可知,通過比較7種美白劑對羥自由基清除率試驗結果表明,清除率相對較高的為維生素C,當其濃度為0.18mg/mL時,其清除率高達88.7%,可能原因是含有多個酚羥基的維生素C可以捕獲自由基反應鏈中的過氧自由基,阻止自由基鏈反應,從而清除·OH、·O

等自由基

;次之為凝血酸,當其濃度為0.06mg/mL,其清除率高達92.1%,凝血酸作為一種蛋白酶抑制劑,能夠抑制酪氨酸酶以及黑色素細胞的活性;再次之為白藜蘆醇,當其濃度為0.06mg/mL時,其清除率為64.1%。即通過羥自由基的清除率初步篩選出組合2的3種原料為:凝血酸、維生素C和白藜蘆醇。

由表13可知,組合3中3種復配原料對超氧自由基清除率的影響效果順序為維生素C>谷胱甘肽>凝血酸,最佳組合為A

B

C

,即凝血酸∶谷胱甘肽∶維生素C=0.45∶0.32∶0.20。通過3次驗證實驗測定最佳組合A

B

C

的超氧自由基清除率分別為89.50%、88.77%、90.26%,其平均值為89.51%。然而當凝血酸∶谷胱甘肽∶維生素C=0.38∶0.35∶0.20時,其清除率達到92.56%,高于最佳組合A

B

C

的超氧自由基清除率。由此可得,在組合3中3種原料的復配比例為凝血酸∶谷胱甘肽∶維生素 C=0.38∶0.35∶0.20。

由表8可知,通過比較7種美白劑對超氧自由基清除率試驗結果表明,維生素C、白藜蘆醇和谷胱甘肽的超氧自由基清除率相對較高。當維生素C的濃度為0.18mg/mL,其清除率為98.5%;白藜蘆醇的濃度為0.45mg/mL時,其清除率為94.5%;谷胱甘肽的濃度為0.35mg/mL時,其清除率為86.3%。即通過超氧自由基的清除率初步篩選出組合3的3種原料為:維生素C、白藜蘆醇和谷胱甘肽。

3、現場根據圖紙資料使用萬用表直流電壓檔測量公共測控屏 II:發現端子開關量輸出 W134線纜K7(X5-45)端子、 W131線纜K10(X5-60)端子對地有+53V輸出,裝置信號回路如圖3。

05 正交試驗結果與分析

由表11可知,組合2中3種復配原料對羥自由基清除率的影響效果順序為凝血酸>白藜蘆醇>維生素C,最佳組合為A

B

C

,即白藜蘆醇∶維生素C∶凝血酸=0.06∶0.18∶0.04,正 交試 驗模 型模擬的最佳組合A

B

C

與實驗組7結果一致,其羥自由清除率為95.31%。由此可得,在組合2中3種原料的復配比例為白藜蘆醇∶維生素 C∶凝血酸 =0.06∶0.18∶0.04。

取對數生長期細胞接入6孔培養板,每孔加入培養基1mL,置于培養箱(37℃,5% CO

)中培養24h。吸棄上清液,加入不同濃度的樣液,處理同2.5,每孔加入1mL,繼續培養24h后,用PBS緩沖沖洗,吸出上清液。然后每孔加入 0.2mol/L的NaOH溶液1mL,80℃恒溫水浴保溫1h,置于酶標儀測定405nm處的吸光度,取平均值,計算黑色素的相對含量。黑色素相對含量(%)=(A

-A

)/(A

-A

)×100%

由表9可知,組合1中3種復配原料對DPPH自由基清除率的影響效果順序為白藜蘆醇>谷胱甘肽>光甘草啶,最佳組合為A

B

C

,即白藜蘆醇:谷胱甘肽:光甘草啶=0.17∶0.03∶0.10。通過3次驗證實驗測定最佳組合A

B

C

的DPPH自由基清除率分別為68.86%、70.25%、70.08%,其平均值為69.73%。然而當白藜蘆醇∶谷胱甘肽∶光甘草啶=0.13∶0.03∶0.10時,其清除率達到73.14%,高于最佳組合A

B

C

的DPPH自由基清除率。由此可得,在組合1中3種原料的復配比例為白藜蘆醇:谷胱甘肽:光甘草啶=0.13:0.03:0.10。

羥自由基清除試驗的測定方法

。分別配制9.0mmol/L FeSO

溶液、9.0mmol/L 水楊酸乙醇溶液、8.8mmol/L H

O

溶液。精密移取表5中各組反應液于5mL EP管中,混合后充分搖勻,再加入H

O

溶液,于37℃下反應30min,置于510nm處測定吸光度,平行實驗3次,計算其清除率。羥自由基清除率(%)=1-(A

-A

)/A

×100%

本文結合網架施工使用階段出現的質量問題,針對網架破壞情況做分析,并對不同節點不同受力構件提出針對性的加固措施,有效提高了構件的抗拉及受壓屈曲承載力.不僅滿足設計使用要求,而且,施工簡單、快捷、有效,最大限度地節約資源,降低成本。

06 美白功效綜合評價

將3種組合再進行酪氨酸酶活性抑制試驗、DPPH自由基清除試驗、羥自由基清除試驗、超氧陰離子自由基清除試驗,結果如表15所示,組合2對酪氨酸酶活性的抑制能力、DPPH自由基清除能力以及羥自由基清除能力皆最高,分別為89.61%、94.03%、95.31%;組合1對超氧自由基清除能力最高,其清除率為92.56%。通過綜合評價分析,確定組合2為最佳美白劑復配組合,即白藜蘆醇:維生素C:凝血酸=0.06:0.18:0.04時,其美白綜合效果最好。

將維生素 C(0.05、0.08、0.12、0.16、0.18mg/mL)、白藜蘆醇(0.15、0.25、0.35、0.45、0.50mg/mL)、谷胱甘肽(0.10、0.15、0.20、0.25、0.35mg/mL)、光甘草叮(0.10、0.12、0.14、0.18、0.20mg/mL)、凝血酸(0.08、0.10、0.20、0.30、0.40mg/mL)、熊果苷 (0.08、0.15、0.20、0.30、0.40mg/mL)和煙酰胺 (0.30、0.35、0.40、0.45、0.50mg/mL)分別以超氧自由基清除率為指標,考察7種美白原料的濃度對超氧自由基的抗氧化作用,根據其結果篩選出對超氧自由基清除效果最好的3種美白原料,其為組合3。

07 B16細胞試驗結果與分析

由圖1可知,質量濃度為0.03 g/mL、0.06 g/mL的組合2的B16細胞活性試驗中,當質量濃度為0.03×10

g/mL的組合2時,其對B16細胞活力與陽性對照組熊果苷、煙酰胺無顯著性差異(P>0.05),而質量濃度為0.06×10

g/mL的組合2時,對細胞活力有顯著性抑制作用(P<0.05),表明該濃度對細胞毒性相對較大。

由圖2可知,質量濃度為0.03×10-16g/mL與0.06×10-8g/mL對B16細胞黑色素的生成具有一定的抑制作用,在統計學上具有顯著性差異(P<0.05)。當組合2的質量濃度為0.06×10-8g/mL時,其抑制率為3.77%,低于陽性對照組熊果苷(39.35%)、煙酰胺(41.24%),其抑制黑色素合成的效果相對較差;而質量濃度為0.03×10

g/mL,其抑制率為35.04%,略低于陽性對照組,表明該濃度對B16細胞有顯著的抑制黑色素合成的能力。

結論

本文通過對7種不同美白劑原料進行復配研究,采用單因素試驗、正交試驗以及綜合評價,優選最佳美白復配組合,通過B16細胞試驗評價美白復配組合的美白功效,得到以下結論:

1.單因素試驗通過測定DPPH自由基、羥自由基以及超氧自由基的清除率,優選出3組美白組合,分別為組合1(谷胱甘肽、光甘草啶、白藜蘆醇)、組合2(凝血酸、維生素C、白藜蘆醇)、組合3(維生素C、白藜蘆醇、谷胱甘肽)。

電滲析工藝的原理是在直流電場的作用下,離子選擇性地透過離子交換膜發生定向遷移,陽膜只允許陽離子透過,陰膜只允許陰離子透過,從而實現鹽類分離的目的,其原理見圖1。

2.正交試驗優選其3組美白組合的最佳復配比例,分別為組合1 = 0.13∶0.03∶0.10、組合2 = 0.06∶0.18∶0.04、組合3 = 0.38∶0.35∶0.20。

3.通過綜合評價3組美白組合的酪氨酸酶活性抑制率以及3種自由基清除率,最終優選組合2為最佳美白組合。

2.豬傳染性胃腸炎(TGE)。各年齡的豬均易感,以2周齡以下的豬多發,且死亡率較高,仔豬吮乳后常出現嘔吐,不久出現劇烈腹瀉,排水樣黃色或灰色糞便,常有未消化的凝乳塊,惡臭,日齡越小,病程越短,死亡率越高。

4.B16黑色素瘤細胞試驗表明,質量濃度為0.03×10

g/mL時,其抑制黑素色合成的能力相對較好。

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