多功效原料大米發酵液的開發及其功效評價

式中：η為干燥t時間后草果脫水量，%；M0為草果初始含水量，%；Mt為微波干燥t時間后草果含水量，%。

大米發酵產物因為其菌種選擇和工藝控制的不同，發酵產品中成分和用途及其功效會有所差異。該研究通過對川藏高原海拔3700m雪山線附近土壤中酵母菌進行了篩選，通過平板畫線法，純化分離出19個菌株。對每個菌株進行了擴繁工作，并選取了對紫外線抵抗能力強、胞外酶較為單一的一株作為本實驗的菌株母本進行擴大培育。通過分段控溫、控氧的方式進行放大發酵，主要目標產物為活性低聚糖和小分子肽類、氨基酸，并對產品進行了保濕、修護、抗氧化、美白的體外功效評價。

集成電路產業已經是我國經濟發展的支柱產業，也是電子、通信和測控等領域發展的基石．集成電路設計人才的培養也是事關國民經濟發展的關鍵．本文根據“新工科”的發展要求，按照人才培養方案目標，針對目前集成電路設計專業課程的實際情況，分析了課程體系、實踐環節中存在的主要問題，對電子科學與技術專業的集成電路設計課程進行了改革，并對課程內容等多方面進行了優化．為學校工科的發展，以及創新型和應用型的設計人才的培養，進行了有益的探索和實踐．

01 功效評價方案

1.1 基于DPPH自由基清除的抗氧化評價

抗氧化成分可以通過清除自由基來減緩肌膚的衰老。可通過原料清除DPPH自由基的能力，來評估抗氧化活性的大小。

1.2 基于角質形成細胞遷移的修護效果評價

皮膚受到損傷后，皮膚內的各種細胞主要通過細胞遷移到達損傷部位來進行修復活動，角質形成細胞的迀移能力對表皮損傷修復具有重要作用

。可以通過評估樣品是否具有提升角質形成細胞遷移的能力，說明產品是否具有肌膚修護功效。

1.3 基于免疫熒光法測定AQP3蛋白含量的保濕效果評價

水通道蛋白3（AQP3）可以促進內源性甘油以及皮脂腺中的甘油三酯運輸進入表皮，影響皮膚保濕功效，因此上調AQP3可以達到保濕功效

。可以通過測試基于角質形成細胞，通過檢測樣品作用后，AQP3蛋白表達量的變化，評價待測樣品的保濕功效。

1.4 基于酪氨酸酶活性抑制、黑色素細胞的黑色素含量的美白效果評價

在皮膚黑色素生物合成中，酪氨酸酶是關鍵酶。評估原料對酪氨酸酶活性的抑制作用，以及通過離體培養人黑色素中的黑色素含量測定，可評估培養基中添加受試原料對黑色素的生成抑制來判定產品是否具有美白效果。

1.5 測試材料

降水天氣多或降水強度大的地區應注意及時排澇，避免或減輕農田漬澇和作物倒伏對產量形成的不利影響;青海東部、河套地區、內蒙古東部、東北地區西部等地因地制宜做好蓄水保水工作。

無水乙醇、乙醚、氫氧化鈉、氨水、一水合檸檬酸、十二水合磷酸氫二鈉、DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl)、維生素E、MTT、DMSO、酪氨酸酶、左旋多巴、黑色素標準品、KC2500、胰酶、DMEM、抗萍滅劑、Hochest33342、PBS、無表皮生長因子(EGF)、PBS、4%多聚甲醛、檸檬酸鈉、Anti-AQP3抗體、Anti-Mouse-488(山羊抗鼠）、即用型山羊血清、曲酸、Medium-254、HMGS、胎牛血清。

“今年省公司制定了按照各個分公司下屬加油站同期比給予獎勵的政策。例如，如果這個加油站這個月與去年同期相比有增量，就按增量的比例發放獎金。”范好光告訴記者，這些獎金直接發放到站經理手里，再由站經理按照站里員工貢獻情況兌現到個人。

酶標儀(BioTek，Epoch)、CO

培養箱（Thermo，150I)、超凈工作臺（蘇凈安泰，SW-CJ-1F)、倒置顯微鏡（Olympus，CKX41)、微量振蕩器（其林貝爾，MM-1)、熒光顯微鏡（Leica，DM2500)、高速冷凍離心機(長沙湘儀，H1850R)、數顯恒溫水浴鍋（常州國華，HH-4A)。

1.6 測試方法

1.6.1 DPPH自由基清除

孵育培養結束后，細胞進行免疫熒光檢測，結果匯總見圖4、表8及圖5。

（2）檢測：參照表1,設立樣品管（T)、樣品本底（T

)、DPPH管（C)和溶劑本底（C

)，每一樣品的每個受試濃度的樣品管（T)及DPPH管（C)需設立3支平行管，按要求加液反應5min后在517nm處測定吸光值。

（3）計算DPPH自由基清除率。

（1）接種：角質形成細胞以2.5E5個/孔的接種密度接種至6孔板，培養箱(37℃、5%CO

)中孵育過夜。

（3）給藥：根據表2試驗分組設計，待6孔板中細胞鋪板率達到70%以上時，進行分組給藥，每組設3個復孔，每孔給藥量為2mL。培養箱繼續培養24h。

（4）劃痕、清洗、培養：孵育結束后，進行劃痕后用PBS清洗，加入正常的細胞培養液，培養箱培養24h。

（5）拍照分析：劃痕后0h在4倍鏡下拍照；劃痕24h后，用PBS清洗一次，4倍鏡下拍照。應用GraphPad Prism Program軟件作圖分析。

（1）測試系統：人體角質形成細胞傳代培養按4E4個/孔接種至24孔板，培養箱（37℃、5% CO

）中孵育過夜。

（2）配液:按試驗設計（表3）分別配制受試物工作液。

（2）配液：按照試驗設計（表2）配置樣品工作液。

（3）給藥：根據上述表3試驗具體設計，待24孔板中細胞鋪板率達到30%～50%時，進行分組給藥，每孔加樣1mL，每組設3個復孔。給藥完成后將24孔板放置在培養箱（37℃、5%CO

）中培養24h。

（4）處理：孵育培養結束后，吸棄舊液，1mL/孔PBS清洗3次，每孔加1mL 4%的多聚甲醛室溫固定爬片15min。固定結束后將24孔板放置于4℃下保存備用。經羊血清封閉，一抗、二抗孵育，滴加Hochest33342染色。

樣品加液要求具體見表4。

（5）封片觀察拍照：用針頭挑出爬片，在載玻片上滴加一滴抗淬滅劑并將爬片反放于載玻片上。24h內熒光顯微鏡拍照，分析檢測結果。

（1）測試系統：采用培養傳代人黑色素細胞為基礎，設定不同濃度梯度曲酸作為陽性對照，受試物用磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液稀釋為多級濃度樣品。

使用1mLEp管，設立樣品管（T）、樣品本底（T

）、酶反應管（C）和溶劑（C

），按要求加液，置37℃水浴槽孵育l0min。依次在各管中加入400μL的左旋多巴溶液，控制每管反應時間為5min,即刻將各管反應溶液在475nm處測定吸光值。

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A.計算酪氨酸酶抑制率。

3.財務報表分析報告難讀。上面提到，財務報表分析是財務人員的工作，是對財務數據的對比分析。財務是相對專業的知識，專業名詞、術語較多，非財務人員對這些財務專業名詞、術語比較陌生，不易理解，需要財務人員在撰寫財務報表分析報告上，進行表述轉述，將一些會計專業術語，轉變為一些日常用語，這樣有利于報告閱讀者更好理解、使用財務報表分析報告。但在實際操作中，財務人員習慣于其專業表述方式，撰寫的財務報表分析報告過于“專業”，影響了財務報表分析報告閱讀、使用。

（2）黑色素含量檢測

A.接種：按5E4個/孔的接種密度接種細胞至6孔板，培養箱（37℃、5%CO

)中孵育過夜。

B.配液：按照試驗設計（表5)配置受試物工作液。

C.給藥：根據表5試驗設計，待6孔板中細胞鋪板率達到40%～50%時，進行分組給藥，每組設3個復孔，每孔給藥量為2mL。培養箱繼續培養72h。

D.細胞消化提取：培養結束PBS清洗一次，加入胰酶消化，收集細胞至Eppendorf管中，離心棄上清液。加入1.2mL混合液（蒸循水∶無水乙醇∶乙醚=2∶5∶5，v/v/v)，渦旋振蕩，室溫放置30min后，離心棄上清液，加入DMSO的NaOH水溶液，采用封口膜封口，放置于80℃水浴中加熱40min。

E.檢測分析：加熱結束后，待溫度平衡至室溫后，在405nm波長測吸光度值，數值進行軟件分析。

2.開發性特征。根據相關的智能理論知識可知，人的智能存在多元化的發展形勢，其決定性因素是因為每個人都擁有相同的智能，只是后天的開發和訓練程度不同，最終導致每個人擁有不同的智能因素，進而形成現在的豐富多彩的社會生活。可見，人的智能是需要后天的不斷學習和教育進行開發和加強，在此過程中，對人類智能開發的程度越高，其表現和發展就越明顯，其智力水平也就相對較高。

02 功效評價結果

2.1 基于DPPH自由基清除的抗氧化效果

檢測結果顯示，較高濃度條件下，該大米發酵液可通過對DPPH自由基清除達到抗氧化效果。

2.2 基于角質形成細胞遷移的修護效果評價

基于測試方法，將空白對照組遷移率歸一，計算各組相對遷移率，細胞遷移照片見圖2所示，數據分析結果見表7和圖3所示。

與BC組相比，PC組的細胞相對遷移率顯著上升，說明測試體系有效。

與BC組相比，PC組的AQP3蛋白含量顯著上升，樣品組大米發酵液-0.5%、大米發酵液-1.0%和大米發酵液-2.5% 的AQP3蛋白含量均顯著上升。該大米發酵液在濃度為0.5%、1.0%和2.5%時，可通過提高AQP3蛋白的表達而發揮保濕功效。

與BC組相比，樣品組酵母菌/大米發酵產物濾液-1.0%、酵母菌/大米發酵產物濾液-2.5%和酵母菌/大米發酵產物濾液-4.0%組的細胞相對遷移率均顯著提高。說明該產品有修護皮膚屏障的功效。

2.3 基于免疫熒光法測定AQP3蛋白含量的保濕效果評價

（1）測試系統：以維生素E為陽性對照，同受試物用95%乙醇溶解稀釋成不同濃度梯度進行自由基清除試驗。

竹筍營養成分的測定嚴格按照相關標準規范進行操作，其中竹筍水分(含水量)采用烘箱干燥法進行測定(GB/T 5009.3-2003)，灰分含量采用直接灰化法進行測定(GB/T 5009.4-2003)，粗脂肪含量采用索氏提取法進行測定(GB/T 14772-2008)，粗蛋白含量用凱氏定氮法進行測定(GB/T 14771-1993)[7]，氨基酸含量采用氨基酸自動分析儀進行測定( GB/T 5009.124-2003)[8]。

1.我們為了活命吃東西，為了保命又不敢吃東西；2.交話費的時候，才發現自己的廢話那么值錢；3.世界上最遙遠的距離，就是星期一上午到星期五下午；4.婚姻是愛情的墳墓，更可悲的是，小三還要來盜墓。

2.4 基于酪氨酸酶活性抑制、黑色素細胞的黑色素含量的美白效果評價

基于測試方法，進行酪氨酸酶抑制率檢測，檢測結果匯總如表9所示，趨勢圖如圖6所示：

嫁接育苗選擇嫁接最適期，選用半木質化健壯良種穗條，做好嫁接后苗木成活期的保溫控濕管理，調節適宜苗木生長的光照強度，提供合理的溫濕度條件，促進嫁接愈合和營養生長，從而提高苗木成活率。

對于APL患者，不管是MS作為首發表現還是復發表現，維A酸的早期使用可使患者生存獲益，但對于APL合并MS最佳治療方案的確定，還需要更多前瞻性和大樣本的臨床試驗進一步研究。目前資料顯示，盡管APL患者的長期生存率可達90%以上，但APL合并MS仍預后較差，MS作為首發表現的APL患者無病生存期可能要短于作為復發表現的APL。

基于測試方法，進行收集細胞，進行黑色素含量抑制率測定，結果如表10所示，變化趨勢圖如圖7所示：

與 BC組相比， PC (光甘草定）組黑色素含量顯著下降，黑色素含量抑制率為21.22%, 說明本次測試有效。

與 BC組相比，樣品組酵母菌/大米發酵產物濾液-2.5%的黑色素含量顯著下降， 黑色素含量抑制率為21.42% 。

由此說明，該大米發酵液可通過抑制酪氨酸酶活性和降低黑色素含量，發揮美白功效。

結論

選取支鏈淀粉及蛋白質含量更加豐富的優質有機大米為原料，經高海拔、強紫外線、極端溫差的自然環境中篩選出胞外酶單一性較好的特殊菌種使用分段控溫供氧工藝發酵，得到的產品保留了大米的特殊清香，沒有一般釀酒酵母發酵可能產生的乳酸、丙酸、丁酸的氣味，減少了有機酸對皮膚的刺激性，產品更易為消費者所接受。

另通過體外生化法與細胞法進行功效評價，結果表明該產品體外功效評價顯示：在10%、25%、50%、75%、100%濃度時，DPPH清除率分別為0.39%、3.14%、5.49%、7.37%、12.08%，表明產品可通過清除自由基的方式達到抗氧化的作用。離體培養角質成形細胞劃痕實驗顯示在濃度為1.0%、2.5%和4.0%時，可以通過促進細胞遷移達到修護功效。在濃度為0.5%、1.0%和2.5%時，可通過提高角質成形細胞中AQP3蛋白的表達而發揮保濕功效。酪氨酸酶活性抑制IC

為18.3%,基于人黑色素細胞，濃度2.5%時黑色素含量抑制率21.42%，可以達到美白效果。

合并重組后新企業的財務管理效率將受到影響，針對這一問題，企業可為財務部門設置數據收集系統，以提升管理效率。例如，企業可在各終端部門設置網絡設備，該部門所產生的全部財務信息，將以數據的形式在當日上傳至財務部門的數據庫。財務部門可在隔日對這部分數據進行整理，并參考以往的數據對上傳數據進行審核。通過這樣的措施，財務部門可更為高效地獲得基層數據。同時財務部門應當統一數據格式，從而使數據統計工作更加便捷。利用這一系統，財務部門將實現全網絡化辦公。

李輝：“要求經濟獨立的男性根本就是自私的，女人天生就是弱勢群體。能夠有實力養著自己的妻子，把自己的財務全權交給她打理，這是信任，更是愛！”

基于發酵產物的多樣性而言，目前可以通過硫酸苯酚法測定總糖含量、茚三酮顯色法測定氨基酸含量。但具體糖類組分構成尚不明確，混合肽類成分的氨基酸連接形式也尚不明確，故具體起到保濕、美白、修護和抗氧化作用的成分有待進一步深入研究。

[1] 沈丹荷，夏隆慶.角質形成細胞與皮膚創面愈合瘢痕形成[J]. 中華整形外科雜志，2005(1):69-71.

[2] 肖博，郭樹忠，潘勇，等.釉基質蛋白對人角質形成細胞粘附、增殖及遷移影響的體外研究[J]. 中國美容醫學雜志，2008(1):69-72.

[3] 劉春鳳, 卞俐娜, 丁詩璇,等. 一種基于水通道蛋白3的體外保濕功效判斷方法: CN109517873A[P]. 2019.