兩種試劑檢測腫瘤標志物的相關性分析

秦志麗

廣西醫科大學第四附屬醫院醫學檢驗科，廣西柳州 545005

腫瘤標志物的檢測在腫瘤常規篩查、腫瘤的復 發監測中起到重要作用[1]，化學發光免疫法是比較常見的腫瘤標志物檢驗方法[2]，因本實驗室同時開展有國產化學發光試劑與進口電化學發光試劑的TPSA、CA19-9、CA72-4檢測，檢測結果的相關性和一致性受到質疑[3]，因為使用兩種不同檢測系統進行相同項目測定時，結果會存在一定差異，會直接影響到臨床的診斷[4]。為了解定量檢測結果的可比性及定性結果一致性，現參照美國臨床和實驗室標準協會（clinical and laboratory standards institute,CLSI）2013年8月發布的EP09-A3文件體系要求[5-6]，選取2021年7—11月廣西醫科大學第四附屬醫院體檢科的300名體檢者作為研究對象，其中TPSA研究組100名，CA19-9研究組100名，CA72-4研究組100名，對研究結果進行相關性及一致性分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院體檢科共300名體檢者，其中TPSA研究組100名，CA19-9研究組100名，CA72-4研究組100名，TPSA作為前列腺癌的腫瘤標志物，女性檢測水平低檢測意義不大，所以選取對象均是男性體檢者，CA19-9與CA72-4檢測無性別差異；本研究經醫院倫理委員會審批，選取體檢者均知情同意。TPSA研究組男100例；年齡27～82歲，平均（46.01±11.20）歲。CA19-9研究組男55例，女45例；年齡26～87歲，平均（51.67±12.61）歲。CA72-4研究組男75例，女25例；年齡24～86歲，平均（48.95±11.23）歲。3組一般資料對比，差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 儀器與試劑

國產全自動化學發光分析儀系統及其配套試劑盒，校準品，質控品；進口電化學發光分析系統及其配套試劑盒，校準品，質控品。

1.3 方法

空腹采集靜脈血，及時分離血清檢測，血清標本外觀無脂血溶血。儀器按時進行保養，校準合格，當天室內質量控制結果在控，將標本分別在國產檢測系統檢測和進口檢測系統檢測，由于進口檢測系統在實驗室使用時間較長，且參加國家臨床檢驗中心室間質評成績優秀，將其作為參考方法[6]，國產檢測系統結果作為比較結果，分析兩者檢測結果的相關性及一致性情況。

1.4 觀察指標

判斷研究數據的可接受性及臨床結果是否可以接受，評估兩種試劑檢測腫瘤標志物總前列腺抗原（total prostate antigen,TPSA）、糖類抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)、糖類抗原72-4（carbohydrate antigen 72-4,CA72-4）的相關性及一致性。

1.5 統計方法

首先采用Microsoft Exce l2016軟件繪制線性回歸方程，R2＞0.95表示選取數據范圍合適，線性回歸方程的斜率及截距可靠；將醫學決定水平或生物參考區間上限代入公式計算預估值[7]，以預估值偏移%＜1/2國家臨檢中心室間質評TEa(%)作為可接受標準[8-9]；再采用SPSS 22.0統計軟件進行Pearson相關分析，P＜0.05表示顯著相關，r＞0.9相關性好；再采用SPSS 22.0統計軟件進行Kappa一致性檢驗比較兩臺儀器檢測結果在陰陽性的一致性情況，Kappa值：0.75～1表明一致性較好[10]，Kappa值：0.4～0.75表明一致性一般。

2 結果

2.1 判斷研究數據的可接受性

將不同檢測系統的檢測數據繪制散點圖，得到TPSA、CA19-9、CA72-4三個項目的線性回歸方程，3個項目的R2＞0.95，表明選取的數據范圍合適，相關性較好，得到的線性回歸方程能用于臨床標本的評估。見表1。

表1 各項目R2及直線回歸方程

2.2 臨床結果可否接受

根據所得到的線性回歸方程，將3個檢測項目在各自醫學決定水平或生物參考區間上限代入方程，將得到的偏移%與1/2TEa(%)進行比較，見表2。偏移%＜1/2TEa(%)結果可接受，A試劑與B試劑在定量檢測結果具有可比性，相對偏差較小，臨床結果可接受。

表2 各項目偏倚(%)與1/2TEa(%)比較

2.3 相關性分析

將A、B兩種試劑檢測結果采用Pearson相關分析，TPSA的r值為0.987（P＜0.01）；CA19-9的r值為0.986（P＜0.01）；CA72-4的r值為0.980（P＜0.01），3個項目國產試劑與進口試劑檢測的相關性均顯著，PSA、CA19-9、CA72-4相關性均較好。

2.4 一致性檢驗

將A、B試劑檢測結果以各試劑的生物參考區間作為定性判斷，A試劑檢測TPSA，假陽性率22.2%，假陰性率1.1%，總符合率97.0%，Kappa=0.807，一致性較高;A試劑檢測CA19-9，假陽性率0.0%，假陰性率19.0%，總符合率84.0%，Kappa=0.576，一致性一般，A試劑檢測CA72-4，假陽性率39.1%，假陰性率2.6%，總符合率89.0%，Kappa=0.652，一致性較好。見表3。

表3 各項目定性檢測結果的一致性分析

3 討論

近年來隨著人們生活方式的改變、自然及環境的惡化，腫瘤的發病率逐年提高，醫療水平的進步，使腫瘤標志物的檢測為腫瘤疾病的早期診治提供有價值的參考依據[11]。隨著人們體檢意識的提高，更多的人愿意到醫院進行健康體檢，使腫瘤標志物的檢測需求有所增多，而且腫瘤標志物檢測可以用于腫瘤的預防、輔助診斷、預后判斷以及治療指導[12]。PSA是前列癌特異性的腫瘤標志物[13]，CA19-9是胰腺癌非特異性的腫瘤標志物[14]；CA72-4是腸道的腫瘤標志物[15]。腫瘤標志物檢測進口試劑貴，國產試劑相對便宜，隨著國家政策的扶持，國產設備技術的改進，國產免疫分析市場占有率逐漸提高，國產免疫分析系統已占到17.8%[16]。經比對國產A試劑與進口B試劑檢測TPSA、CA19-9、CA72-4的結果可知，定量檢測結果A、B試劑相關性好，所得的線性回歸方程可用于臨床標本的評估，臨床結果可接受。但定性結果的一致性評價TPSA的符合度最高，Kappa=0.807,假陽性率22.2%，假陰性率1.1%，總符合率97.0%，可知A試劑更加敏感，可提高前列腺癌的檢出率，適用于初篩，從節約成本考慮，可用國產A試劑進行大規模的初篩，陽性結果用進口試劑復查，既提高特異性也節約成本[17]。A試劑檢測CA19-9，假陽性率0.0%，假陰性率19.0%，總符合率84.0%，Kappa=0.576，導致假陰性率偏高的原因與兩者試劑參考區間差異有關，建議在實際應用中，對于不具有可比性的檢測系統，各臨床實驗室可分別建立自己的參考區間[18]。A試劑檢測CA72-4，假陽性率39.1%，假陰性率2.6%，總符合率89.0%，Kappa=0.652，一致性較好，可知A試劑敏感高，可提高消化道腫瘤的檢出率，適用于初篩。通過查找文獻資料發現李清茹[12]的研究結果顯示羅氏Roche Cobas 601和MAGLUMI 4000型化學發光分析儀檢測TPSA的r=0.991 4，Kappa=1，一致性較好；其研究的CA19-9的r=0.893 2，Kappa=0.467一致性一般，與本研究相似。CA72-4在不同的研究者中研究結果不一致，李清茹研究表明CA724的r=0.999 7，Kappa=0.93，一致性好，但魏衍財等[18]研究表明由于不同廠家針對抗體表位不同，底物不同，無統一溯源性造成CA72-4結果差異大。因此建議同一科室使用兩種不同試劑檢測同一項目時，實驗室應對兩種試劑進行比對分析。

綜上所述，國產A試劑可以用于臨床標本檢測，在定量檢測結果上兩種試劑相關性均較好，但在定性結果一致性評價中結果存在一定差異，A試劑在TPSA、CA72-4檢測中敏感性高，從節約成本考慮A試劑可用于初篩實驗，與進口B試劑比較CA19-9檢測存在部分假陰性結果，建議實驗室可建立適當的參考區間。