瘧疾血細胞涂片分析檢驗結果觀察

杜秋霞

(山東省寧陽縣疾病預防控制中心 山東 寧陽 271400)

瘧疾屬于傳染性疾病，同時也是寄生蟲病，嚴重危害人類健康，在我國比較常見，一旦發病患者將會出現周期性發熱、寒戰、出汗等現象，而外周血確定瘧原蟲是準確診斷的主要依據。景觀近些年瘧疾防疫工作進一步強化，瘧疾發生率明顯下降，但相關檢驗工作仍需要充分重視。伴隨血細胞分析儀的應用愈加廣泛，白細胞顯微鏡分類應用減少，多通過儀器進行分類，這也在一定程度上提高了瘧原蟲漏檢率。實際上，瘧疾患者血小板多有明顯下降癥狀，但相關報道比較少。對于瘧疾而言，在血細胞分析過程中，由于溶血劑不會對紅細胞中寄生瘧原蟲進行溶解，且其存在一定密度與形態，所以儀器通常將其作為血球顆粒予以計數，這將會對血細胞檢驗結果產生影響，應引起重視，對其予以深入研究[1]。本次研究從2015年1月至2020年12月擇取30例瘧疾患者作為研究對象，觀察瘧疾血細胞涂片分析檢查結果，具體內容如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

從2015年1月至2020年12月擇取30例瘧疾患者作為研究組，其中男女比例為20:10，年齡最大53歲，最小3歲，均值(39.78±3.85)歲，并擇取同期30例健康體檢者作為對照組，其中男女比例為19:11，年齡最大52歲，最小4歲，均值(39.80±3.99)歲，兩組資料對比差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2方法

選用希森美康Sysmex自動血細胞分析儀(XE2100型)進行檢測，配合使用試劑包括稀釋液、清潔劑、白細胞分類溶血劑、有核紅細胞溶血素、幼稚細胞溶血素、鞘液、嗜堿性細胞溶血素、白細胞分類染液、有核紅細胞染色液、血紅蛋白溶血素等，質控品由佰樂(BIO-RAD)提供。對所選研究對象實施血細胞涂片檢驗，采集2ml靜脈血，置于乙二胺四乙酸二鉀抗凝管內，使其充分勻混，之后通過自動血細胞儀進行檢查，按照操作規程進行操作。針對檢驗結果予以五分類血細胞分析，分析檢查結果。

2 結果

2.1兩組血細胞分析結果對比

經血細胞分析檢查，研究組紅細胞計數、血小板計數、血紅蛋白、白細胞計數、嗜酸性粒細胞均低于對照組，差異有統計學意義(P>0.05)。見表1：

表1 兩組血細胞分析結果對比

2.2瘧疾血細胞涂片結果分析

經血細胞涂片分析，30例瘧疾患者中，23例為間日瘧，占比76.67%，7例惡性瘧，占比為23.33%。其中，21例白細胞正常，占比為70.00%，5例白細胞減少，占比為16.67%，4例白細胞升高，占比為13.33%。從白細胞分類來看，8例淋巴細胞百分比正常，占比為26.67%，13例淋巴細胞百分比減少，占比為43.33%，4例淋巴細胞百分比升高，占比為13.33%,5例出現可疑現象，占比為16.67%；12例單核細胞百分比正常，占比為40.00%，3例單核細胞百分比減少，占比為10.00%，14例單核細胞百分比升高，占比為46.67%，1例無分類結果，占比為3.33%。20例紅細胞正常，占比為66.67%，7例紅細胞減少，占比為23.33%，3例紅細胞升高，占比為10.00%；8例血小板正常，占比為26.67%，21例血小板減少，占比為70.00%，1例血小板升高，占比為3.33%。

3 討論

對于瘧疾患者來說，在血細胞分析過程中，因部分紅細胞內含瘧原蟲滋養體、環狀體，或配子體、裂殖體，無法經溶血劑進行破壞與溶解，而且其自身存在一定形態結構，在經過WBC/BASO通道過程中，寄生紅細胞在通過計數小孔過程中會使兩個電極之間的射頻電阻發生改變，而正常紅細胞不會出現這一變化，將會被儀器視為裸核顆粒納入白細胞計數內，進而提高了白細胞計數水平。在DIFF通道內，紅細胞經溶解釋放瘧原蟲，核酸部位將結合染料，在激光照射作用下形成熒光強度信號，儀器將其視為白細胞顆粒進行計數，且其在形態以及體積大小上均與細胞群類似，進而對白細胞分類結果產生影響。若瘧原蟲密度比較高，配子體或裂殖體、滋養體含量大，則會對儀器產生嚴重影響，可能會導致無白細胞分類結果的問題，儀器將會進行警示。儀器對血小板計數、紅細胞計數可以通過電阻抗法實施。血液樣板在經過儀器稀釋處理之后送入紅細胞樣品室內，在經過鞘瘤技術處理，將其送入血小板檢測器或紅細胞檢測器，紅細胞顆粒可經過計數小孔，使兩個電極之間的直流電阻出現變化，以細胞體積大小為依據對細胞類型進行識別，并通過對脈沖信號進行記錄，進而獲得血小板以及紅細胞的數據。

在瘧疾血常規檢查過程中，因未破壞瘧原蟲，且瘧原蟲本身結構類似于紅細胞，所以在儀器計數時容易混入瘧原蟲，這也將提高白細胞計數，使檢驗結果受到影響[2]。同時溶解紅細胞釋放瘧原蟲之后，基于強烈光照條件，核酸將融合染料，產生白細胞類似，也將影響白細胞計數[3]。如果人體瘧原蟲的密度較高，將會有大量滋養體以及繁殖體、配子體出現，嚴重影響儀器檢查過程，出現無白細胞分類的問題[4]。血液樣本在經過儀器稀釋處理之后，送入紅細胞樣品室過程中，鞘流技術不僅處理了紅細胞，也處理了血小板，細胞顆粒經技術小孔，而產生電極變化，再以脈沖信號方式予以記錄，獲得血小板直方圖和紅細胞直方圖[5]。對于瘧疾患者而言，發病初期因瘧原蟲數量少，所以未嚴重損傷紅細胞，所以其計數無明顯異常，但隨著病情發展，瘧原蟲逐漸破壞紅細胞，且代謝產物對肝脾等臟器產生刺激，增強了免疫反應，使得內皮細胞大量增生，因此這一疾病病程較長的患者將會出現血小板減低、白細胞減低、貧血等癥狀[6]。其中肝臟功能亢進主要表現為血小板減少，而脾臟作為機體儲血器官，若發生病理性腫大，則會使血小板大量潴留，進而巨噬細胞將會吞噬部分血小板，進而減少血小板，同時紅細胞碎片會被當做血小板，摻雜在血小板內進行計數，進而使血小板直方圖呈現出異常狀態，進而影響最終檢測結果[7-8]。

在瘧疾發病初期，瘧原蟲進入紅細胞內中的數量比較少，紅細胞并未受到嚴重損害，所以血紅蛋白、紅細胞水平均無明顯異常現象。但隨著病情進一步發展，瘧原蟲對紅細胞的破壞程度增加，紅細胞碎片增加，加上瘧原蟲代謝產物的影響，對機體產生刺激作用，使肝脾出現充血腫大現象，機體出現較強的免疫反應。隨著疾病發展至晚期，則會大量產生網狀內皮細胞，使得脾功能出現亢進狀態[9]。在長時間反復感染狀態下，裂殖子游離，加上虐色素導致單核細胞增生，所以隨著病程延長患者將會出現貧血現象，主要表現為血紅蛋白水平下降、紅細胞水平降低，同時伴隨單核細胞數量增加，血小板水平下降，白細胞水平也將減少。血小板水平下降主要是因脾亢進狀態下會產生過度阻留作用，脾臟作為貯血器官，通常情況下脾臟中有1/3左右的血小板，同時也有部分淋巴細胞，如果脾臟受損，出現病理性腫大，則會使脾臟功能亢進，進而使脾內阻留大量的血小板與淋巴細胞，另外部分紅細胞也會滯留在脾臟中，一些被單核-巨噬細胞吞噬，使得周圍血液中血小板水平下降，紅細胞水平降低，淋巴細胞減少[10]。紅細胞碎片將會被檢測儀器視為大體積的血小板顆粒計算在血小板計數中，對血小板分析產生影響，使得血小板直方圖出現異常現象，無法將血小板分布寬度、血小板體積計算出來，同時也無法準確顯示大血小板比率，產生警示信息[11]。所以在血常規監測中，除臨床疑似瘧疾，必須實施血涂片，對瘧原蟲進行檢查之外，還需要對檢測過程中血小板是否明顯減少情況進行觀察，或直方圖是否出現異常，或是否出現警示信息，另外散點圖、白細胞分類也可能出現異常現象，需要對血涂片進行復審以及分類，特別是在瘧疾高發季節，需要對瘧原蟲寄生情況進行仔細查找，避免誤診及漏診問題[12]。

4 結語

在血常規檢驗中，若發現直方圖異常以及血小板減低現象，另外伴隨白細胞散點圖異常或白細胞分類異常等，需要做好血涂片復審，并對白細胞予以分類，特別是夏秋季節發熱樣本，需要對瘧原蟲寄生情況予以仔細查找，避免誤診和漏診。