CCK、Cx43、GLP-1對2型糖尿病胃輕癱患者胃排空的預測價值及其相關(guān)性分析

張雪蓮，王 博，張玄娥，張曉燕，顧 蕾，周尊海

(同濟大學附屬楊浦醫(yī)院內(nèi)分泌科,上海 200090)

2型糖尿病是一種慢性代謝疾病，胃輕癱是該病的常見并發(fā)癥，是糖尿病患者胃動力障礙、胃排空延遲引起的，主要致病因素有胃腸道植物神經(jīng)病變、胃腸激素分泌紊亂、高血糖等，主要表現(xiàn)為惡心、噯氣、上腹痛、體重下降等[1-2]。該疾病病程較長，若長期控制不佳，易引起心臟和大血管的微血管病變，威脅患者健康[3]。2型糖尿病功能性消化不良是由于糖尿病神經(jīng)損傷影響了胃腸道系統(tǒng)，以腹脹、腹瀉、便秘為主要臨床表現(xiàn)，可持續(xù)反復發(fā)作[4]。膽囊收縮素(cholecystokinin，CCK)是由小腸黏膜細胞釋放，可刺激胰腺酶的合成與釋放；間隙連接蛋白43(connexin 43，Cx43)是腸道功能重要的連接蛋白，具有促進平滑肌細胞興奮性的功效；胰高血糖素樣肽1(glucagon-like peptide-1，GLP-1)可抑制胃酸分泌，減緩胃內(nèi)容物的排空[5-6]。有研究顯示，CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃輕癱疾病中表達異常，但有關(guān)三者相關(guān)性的研究相對較少[7]。本研究通過檢測CCK、Cx43、GLP-1表達情況，探究CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃輕癱中的表達及與胃排空的相關(guān)性。報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年12月—2021年3月我院收治的2型糖尿病胃功能異常患者127例，其中功能性消化不良49例設(shè)為消化不良組，糖尿病胃輕癱患者78例設(shè)為胃輕癱組，另選擇同期體檢的胃功能正常的健康者50例設(shè)為對照組，所有受試對象均進行胃半排空時間測定。經(jīng)檢查所有受試對象胃腸道均未出現(xiàn)器質(zhì)性的病變，且結(jié)合輔助檢查，化驗室檢查排除肝膽胰疾病，結(jié)締組織，腎病。胃輕癱患者伴有周圍神經(jīng)系統(tǒng)病變，而且沒有反酸或者是特殊的疼痛感。3組性別、年齡、體重指數(shù)比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；消化不良組與胃輕癱組并發(fā)高血壓、高血脂比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組一般資料比較Table 1 Comparison of general data among three groups

本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審批通過。

納入標準：①所有患者均符合《中國2型糖尿病防治指南》2020版中相關(guān)診斷標準[8]，確診為2型糖尿病胃功能異常；②意識清楚;③自愿參與本研究。排除標準：①患有消化道疾病；②患有精神類疾病；③患有惡性腫瘤；④2年內(nèi)接受過腹部手術(shù)。

1.2方法

1.2.1CCK、Cx43、GLP-1水平檢測 所有受試對象入院次日7∶00采集空腹靜脈血5 mL，恒溫靜置1 h，離心處理(轉(zhuǎn)速3 000 r/min、離心半徑10 cm)，-60 ℃?zhèn)溆谩Ｋ胁僮髁鞒叹凑彰嘎?lián)免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)試劑盒說明書操作，試劑盒購自瑞普利金(上海)生物科技有限公司。待測血清稀釋，酶標板每孔添加150 μL稀釋后的待測血清，膠紙封孔，恒溫靜置40 min，棄反應液，洗滌液注滿，浸泡1 min,洗滌5次，甩干，添加生物素化抗體，膠紙封孔，恒溫靜置30 min，棄反應液，重復洗滌步驟，添加酶標抗體，膠紙封孔，恒溫靜置30 min，棄反應液，添加顯色劑，避光顯色，添加終止液，震蕩均勻，在全自動酶標儀(上海添時科學儀器有限公司，型號：HBS-1096B)450 nm波長處，檢測CCK、Cx43、GLP-1水平。

1.2.2放射性核素法檢測固體胃排空功能 所有受試對象在參與研究期間,服用二甲雙胍片、格列美脲片控制血糖，二甲雙胍片(浙江國光生物制藥有限公司，國藥準字H33020526)0.5 g/次，1次/d，隨餐服用；格列美脲片(北京北陸藥業(yè)股份有限公司，國藥準字H20010567)2 mg/次，1次/d，餐前半小時服用。檢測前1 d晚餐后禁食10 h,檢測當日所有受試對象均于7∶30食用早餐，將由核素99Tc-DTPA標記的雞蛋煎至固體狀,每例受試對象均食用2個,使用核素掃描儀(安徽中科中佳科學儀器有限公司)對受試對象胃部進行顯像處理，在進食結(jié)束后10、20、30 min分別采集圖像,隨后每30 min采集圖像,連續(xù)觀察2 h，胃排空延遲患者可適當向后延遲,每30 min采集圖像,至胃內(nèi)放射性指數(shù)值下降一半以下，觀察期間所有受試對象禁食禁水，ROI技術(shù)處理圖像,計算胃半排空時間。

1.3統(tǒng)計學方法 應用SPSS 26.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料比較采用單因素方差分析和SNK-q檢驗；計數(shù)資料比較采用χ2檢驗；繪制ROC曲線，分析CCK、Cx43、GLP-1對2型糖尿病胃排空的預測價值；相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.13組血清CCK、Cx43、GLP-1水平比較 消化不良組和胃輕癱組CCK、Cx43水平低于對照組，GLP-1水平高于對照組，胃輕癱組CCK、Cx43水平低于消化不良組，GLP-1水平高于消化不良組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組血清CCK、Cx43、GLP-1水平比較Table 2 Comparison of serum CCK, Cx43 and GLP-1 levels among three groups

2.23組胃半排空時間比較 消化不良組和胃輕癱組胃半排空時間長于對照組，胃輕癱組胃半排空時間長于消化不良組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 3組胃半排空時間比較Table 3 Comparison of gastric half-emptying time among three groups

2.3CCK、Cx43、GLP-1對2型糖尿病胃排空的預測價值 CCK、Cx43、GLP-1聯(lián)合檢測對2型糖尿病胃輕癱中的預測價值明顯優(yōu)于單一診斷。見表4，圖1。

圖1 CCK、Cx43、GLP-1預測2型糖尿病胃排空的ROC曲線圖

表4 CCK、Cx43、GLP-1對2型糖尿病胃排空的預測價值Table 4 Predictive value of CCK, Cx43 and GLP-1 in gastric emptying in type 2 diabetes mellitus

2.4CCK、Cx43、GLP-1的相關(guān)性分析 CCK、Cx43呈正相關(guān)(r=0.482；P<0.001)；CCK、GLP-1呈負相關(guān)(r=-0.356；P<0.001)；Cx43、GLP-1呈負相關(guān)(r=-0.619；P<0.001)。見圖2。

圖2 CCK、Cx43、GLP-1的相關(guān)性分析

3 討 論

糖尿病是一種內(nèi)分泌代謝類疾病，其中2型糖尿病發(fā)病例數(shù)較多，胃輕癱是該病常見的并發(fā)癥，主要表現(xiàn)為腹痛、口干、嘔吐等，老年人由于胃腸功能下降，是糖尿病的高發(fā)人群[9-10]。糖尿病發(fā)病機制主要與胰島素抵抗、胰島素分泌不足相關(guān)[11]。長期高血糖、微量元素缺乏等導致胰島細胞損傷，產(chǎn)生胰島素抵抗；影響胰島素分泌的主要因素有自身免疫、長期胰島素抵抗等[12]。

本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病胃輕癱患者血清CCK水平較低。CCK是一種肽類激素，由氨基酸組成，可調(diào)節(jié)協(xié)調(diào)胃腸活動，具有刺激膽囊收縮、興奮胰酶分泌的作用[13]。據(jù)有關(guān)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病胃輕癱患者的CCK水平降低，且隨著病情加重CCK水平隨之下降，且胃半排空與CCK水平呈負相關(guān)[14]。有學者研究顯示，糖尿病胃輕癱患者的CCK水平降低，可能是CCK水平降低可抑制胃腸激素的分泌，從而抑制胃排空[15]。本研究結(jié)果顯示，胃輕癱組胃半排空時間延長，可能是CCK水平降低抑制了胃排空。

本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病胃輕癱患者血清中Cx43水平較低。Cx43是重要的間隙連接蛋白，可通過細胞間隙進行信息和能量的交換，在信息調(diào)控與傳導等生理過程有重要作用[16-17]。有研究顯示，糖尿病胃輕癱大鼠酪氨酸激酶受體、Cx43表達明顯下降，經(jīng)紅芪多糖干預后，酪氨酸激酶受體、Cx43表達上升，胃排空時間減少，可能與紅芪多糖可減輕胰島素抵抗、促進胃腸功能修復相關(guān)[18]。Cx43在2型糖尿病胃輕癱患者血清中異常表達，可能與胰島素分泌、胰島素抵抗相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病胃輕癱患者血清中GLP-1水平較高。GLP-1由回腸內(nèi)分泌細胞分泌的一種腦腸肽，可作為2型糖尿病藥物的作用靶點[19-20]。有專家調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病胃輕癱的發(fā)生發(fā)展常伴隨著GLP-1水平異常，且胃半排空與GLP-1水平呈正相關(guān)，因此調(diào)節(jié)機體GLP-1水平至關(guān)重要[21]。本研究結(jié)果顯示，胃輕癱組胃半排空時間延長，可能是GLP-1在胰島素抵抗中有重要作用，可抑制胰高血糖素及胃酸分泌、抑制食欲、延遲胃排空。

本研究結(jié)果顯示，CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃輕癱患者中表達異常，CCK、Cx43呈正相關(guān)；CCK、GLP-1呈負相關(guān)；Cx43、GLP-1呈負相關(guān)，三者聯(lián)合檢測診斷2型糖尿病胃輕癱價值較高，可彌補單一診斷的不足。但由于本研究選取病例數(shù)較少，有一定的局限性，在下一步研究中可加大樣本量，以證實CCK、Cx43、GLP-1在2型糖尿病胃輕癱中的聯(lián)合診斷價值。

綜上所述，2型糖尿病胃輕癱患者CCK、Cx43水平降低，GLP-1水平升高，胃半排空時間延長，三者共同參與胃輕癱的發(fā)生，有望成為診斷2型糖尿病胃輕癱的血清檢測指標。