豬采血技術在藍耳病防控工作中的應用

杜銀平

（揚州市畜牧獸醫和水產技術指導站 江蘇揚州 225000）

豬藍耳病也即豬繁殖與呼吸綜合征，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，根據感染毒株致病力的強弱又可分為高致病豬藍耳病和經典豬藍耳病。經典豬藍耳病最早于1987 年在美國發生和鑒定，此后迅速在全球范圍內擴散開來，于1995 年傳入我國。經典豬藍耳病主要引起妊娠母豬的繁殖障礙和仔豬的呼吸道癥狀，造成母豬流產和產死胎、弱胎，仔豬和生長豬呼吸困難、耳朵發紺，生長性能變差，嚴重影響養殖場生產成績。高致病性豬藍耳病毒株于2006 年起逐漸成為我國優勢流行毒株，與經典豬藍耳病相比，高致病性豬藍耳病具有更高的致病力，養殖場內豬群不分年齡、性別均可感染發病，發病豬只除出現經典豬藍耳病癥狀以外，還伴隨著體溫明顯升高，以致達到41℃以上的情況，高致病性豬藍耳病可以導致更高的發病率和死亡率，給養殖場造成嚴重經濟損失。時至今日，豬藍耳病仍然在全球范圍內纏綿難退，是危害世界多國生豬養殖業的重點疫病。

鑒于豬藍耳病對生豬養殖產業的嚴重危害性，加之部分養殖場存在豬藍耳病反復發生和流行的情況，因此及時監測和掌握養殖場內豬藍耳病病原感染情況和抗體水平，是準確制定豬藍耳病防控策略的首要前提。對養殖場豬群進行豬藍耳病病原檢測和抗體水平監測均需用到血液樣品，采集血液樣品是進行豬群藍耳病監測工作的第一步，血樣采集質量往往可以直接影響后續檢測效果，因此血樣采集工作對于豬藍耳病防控至關重要。由于眾多養殖場豬藍耳病動態防控的需要，血樣采集工作需求十分頻繁；并且當前養殖場的生豬養殖體量一般比較大，又決定了血液采集樣本數量較大；而生豬又存在皮下脂肪較厚、靜脈血管暴露不充分、保定比較困難等有礙于血樣采集的因素。因此，如何保速、保質、保量完成血樣采集工作是對基層采樣人員的嚴峻挑戰和反復考驗，在此很有必要對豬藍耳病防控工作中所需采血技術的種類選擇、操作要點、應用經驗、注意事項等進行綜合分析，以助一線采樣人員及時、安全、高效完成豬血采樣任務，進而增強豬藍耳病防控工作的準確性和時效性。

1 豬采血技術種類

多種豬采血技術可以在藍耳病防控工作中得以應用，根據每頭次采血量的多少可以將豬采血技術分為微量采血技術和多量采血技術，其中微量采血技術主要包括豬耳緣靜脈采血技術、豬尾靜脈采血技術和豬股靜脈采血技術，多量采血技術主要包括前腔靜脈采血技術、四肢靜脈采血技術、腋靜脈采血技術和乳靜脈采血技術等。微量采血技術適用于僅做豬藍耳病病原學檢測之時，此時血液樣品需求量較小，一般0.5～1mL 血量便可以滿足豬藍耳病病原學核酸提取和檢測要求。多量采血技術適用于豬藍耳病血清學檢測之用，也適用于同時做病原學和血清學檢測之用，一般采集3～5mL 品質優良的血液樣品即可以滿足檢測之用。此外，不同體格大小的豬所適用的微量采血技術和多量采血技術均具有一定差異，因此在藍耳病防控工作中需根據實際監測項目需要，在不同豬群選取最為適用的采血方式?，F將每種采血技術的適用特點和操作要點論述如下。

1.1 豬耳緣靜脈采血技術

豬耳緣靜脈采血技術是最為常用的豬微量采血技術，在病原監測項目比較少、血液需求量較少的情況下可以選用這種采血方式。如果僅對監測豬群進行豬藍耳病病原學檢測時，每頭次的血液樣本需求量一般不超過1mL 全血樣品，耳緣靜脈采血完全可以滿足采血任務要求。與其他采血技術相比，耳緣靜脈采血具有對采血豬創傷較小、保定要求相對較低、操作相對簡便等優點，并且一般情況下20kg 以上的豬耳緣靜脈條件均可以滿足耳緣靜脈采血技術要求。當然，耳緣靜脈采血也存在采血量較少、容易發生溶血、血清難以分離的特點，因此一般不適用于豬藍耳病血清學監測任務。

豬耳緣靜脈采血技術操作要點如下：首先做好保定工作，由1～2 名助手借助保定器具做好豬的保定工作，并握緊豬耳朵根部，使耳緣靜脈充分擴張。其次做好采血部位消毒工作，采血人員可以用酒精棉球對豬耳緣靜脈處皮毛進行反復擦拭，達到清潔消毒和進一步清晰暴露血管的目的。然后做好進針采血工作，待豬耳部消毒液干燥之后，術者持采血針頭逆血流方向呈30°夾角平緩進針，待回血后即可抽取所需量的血液。最后做好采血部位止血消毒工作，采血結束后用干燥棉球壓迫進針處并拔針，壓迫止血數分鐘，待無明顯血液滲出之后用碘酒棉球擦拭消毒采血部位，然后解除豬只保定。

1.2 豬尾靜脈采血技術

豬尾靜脈采血技術是一種獸醫臨床適用的微量采血技術，未實施斷尾手術的中大豬均可適用該采血方式，該采血技術適用于豬藍耳病病原學檢測。豬尾靜脈采血位置位于豬尾腹面正中線兩側，中大豬第6～7 尾椎、也即距離尾根15～20cm 處尾靜脈血管粗細變化不大，適宜進針采血，甚至在不用特意保定的情況下便可完成尾靜脈少量采血；小豬因存在不時卷尾搖尾的情況，且小豬尾靜脈較細，不適宜進針，所以50kg 以下的小豬一般不宜采用尾靜脈采血。

豬尾靜脈采血技術要點：首先做好豬的安撫工作，豬尾部采血一般可以不用實施保定，選擇豬自由采食的放松時刻從后側面靠近豬，采血人員用一只手平舉豬尾，使豬尾與背部平齊。其次是做好采血部位清潔消毒工作，采血人員用酒精棉球反復擦拭豬尾腹部距離尾根15～20cm 及其附近位置，達到清潔消毒的目的，同時找準進針位置。然后是做好進針采血工作，采血人員找準采血位置，平緩進針采血，針管回血后抽取所需用量血液。最后做好止血消毒工作，采血人員用干燥醫用棉球壓住進針處，拔出針頭后持續壓迫止血幾分鐘，止血結束后用碘酒棉球對采血部位進行擦拭消毒。

1.3 豬股靜脈采血技術

豬股靜脈位于豬腹股溝內，是獸醫臨床上使用不太廣泛的一種微量采血法，可適用于豬藍耳病病原學檢測樣品采血。豬股靜脈采血需對豬進行仰臥保定，股靜脈的探及需要使用摸脈法，因此對采血人員具有較高的股靜脈采血操作經驗要求。

股靜脈采血技術操作要點如下：首先是做好豬的保定工作，由輔助人員對采血豬進行仰臥保定。其次是做好血管探及和消毒工作，采血人員采用摸脈法在豬腹股溝內探及豬股靜脈，用手指按壓股靜脈近心端，使其更加充盈，用酒精棉球對預采血部進行反復擦拭，以達到清潔消毒和進一步暴露股靜脈的作用。然后做好采血工作，找準進針部位，持采血針以15°角進針，待有回血現象則順勢抽取所需用量的血液即可。最后做好止血消毒工作，待采血完畢，用干燥醫用棉球壓住進針處并拔出針頭，并用棉球持續壓迫采血部位數分鐘，直至無血液滲出為止，并用碘酒棉球擦拭采血部位以進行消毒，解除豬只保定。

1.4 豬前腔靜脈采血技術

豬前腔靜脈采血技術是獸醫臨床上使用非常頻繁的多量采血技術，豬藍耳病抗體水平監測血液樣本采集可以采用前腔靜脈采血方式。該采血方式具有前腔靜脈比較粗且體表暴露相對清晰、采血速度較快、所采血液血清析出質量高等特點。同時，豬前腔靜脈采血對豬的保定技術要求相對較高，并且不同體格大小的豬只保定方式也有所差異，一般情況下20kg 以下的小豬可以采用仰臥保定，較大仔豬和成年豬則需采用站立保定方式。

豬前腔靜脈采血技術操作要點如下：首先對采血豬進行保定，由2 名及以上保定人員根據豬的大小選用仰臥保定或站立保定方式對采血豬進行穩妥保定，仰臥保定小豬時由一名保定人員握緊豬的兩條后肢并盡量向后拉伸，另一名保定人員在豬的頭側下壓其下頜骨而使得豬頭部緊緊貼地，進而保證豬前肢處于踏空狀態并與軀體呈垂直夾角，以充分暴露其位于第一對肋骨與胸骨結合凹陷處的前腔靜脈；對中大豬選用站立保定方式，用保定繩或保定器將豬的上頜骨吊起，至豬頭頸部與水平面呈30°夾角，此時豬的兩個前肢處于剛剛著地的狀態，此時豬的前腔靜脈充分向外突出。其次要做好采血部位消毒工作，采血人員者采用酒精棉球對預進針部位及附近皮毛進行反復擦拭消毒。然后是做好進針和采血工作，找準進針部位之后垂直進針，根據豬的大小適當調整進針深度，一般為3～5cm 為宜，如果扎中血管可見血液自動源源流入針筒，根據檢測要求抽取所需用量血液即可。最后做好止血工作，術者用消毒后的干燥醫用棉球壓住進針處后再拔出針頭，棉球壓迫止血數分鐘，待無明顯血液滲出后用碘酒消毒采血部位，解除豬只保定。

1.5 豬四肢靜脈采血技術

豬四肢靜脈采血技術也是獸醫臨床上常用的豬多量采血技術，豬四肢皮膚相對較薄，因而四肢靜脈體表探及相對容易，并且進行四肢靜脈采血也無需進行麻醉，操作難度較小，對豬的傷害也比較小，所采集血液血清分離質量優良，可以滿足豬藍耳病病原學和血清學檢測需求。

豬四肢靜脈采血技術要點如下：首先是做好采血豬保定工作，豬四肢靜脈采血需要對豬進行側臥保定，并且為了最大程度減少因為豬掙扎而造成采血人員傷害，最好用寬布條對豬的四肢進行捆綁固定。其次是做好采血部位備皮消毒工作，采血人員用動物剃毛器將四肢采血部位豬毛剃除，前肢靜脈采血位置一般在肘關節下方腋窩處，后肢靜脈采血位置一般在膝關節下方范圍內，豬毛清理過后采用酒精棉球進行反復擦拭消毒。然后進行采血工作，為了使四肢血管更加充盈，可以用止血帶對采血前肢或后肢的近心端進行適度結扎，待血管充盈至拇指可觸及的程度，找準血管進針采血，抽取所需用量血液。最后做好止血和消毒工作，采血人員用干燥消毒棉球壓住進針處后拔出針頭，解除結扎止血帶，并用棉球持續壓迫止血3～5min，待無明顯血液滲出后用碘酒消毒采血部位，解除豬只保定。

1.6 豬腋靜脈采血技術

豬腋靜脈采血是獸醫臨床上的一種經驗采血方法，腋靜脈位于豬腹部第一肋骨與胸骨結合處凹窩前方，在豬側臥保定的情況下清晰可見，適用于多量采血，所采血液適用于豬藍耳病病原學和血清學檢測。

豬腋靜脈采血操作要點如下：首先做好豬的保定工作，2～3 名采血助手對采血豬進行側臥保定，適當調整豬前肢位置，使得豬腋下皮膚處于緊繃狀態，腋靜脈清晰暴露。其次做好清潔消毒工作，采血人員用酒精棉球反復擦拭腋靜脈處皮膚，達到清潔消毒和進一步暴露血管的目的。然后做好采血工作，采血人員用一只手壓住腋靜脈近心端，使腋靜脈更加充盈，另一只手持針采血，抽取所需用量的血液。最后做好止血消毒工作，采血人員用干燥消毒棉球壓住進針處，然后拔出針頭，持續壓迫止血3～5min，止血結束后用碘酒棉球對采血部位進行消毒，然后解除豬只保定。

1.7 豬腹皮下乳靜脈采血技術

豬腹部皮下乳靜脈采血法技術是一種適用范圍較廣的采血方法，目前普及程度不是很高，但該采血技術具有采集過程干凈衛生、采血量大、采集血液質量優良、豬只尤其是成年豬保定更為容易、對豬創傷小等優點。豬腹部皮下靜脈位于豬腹中線兩側各有一條，成年豬較粗，妊娠母豬和經產母豬乳靜脈更為明顯，仔豬相對較細，一般選取豬第1～4 對乳房外側的腹皮下靜脈進行采血。成年公豬和母豬采集乳靜脈血液可以站立保定甚至不用保定，選用該種方法較前腔靜脈采血更為安全和容易操作；而仔豬則需要以腹部朝上的方式進行保定，保定較為費勁，需借著仔豬掙扎導致乳靜脈更為怒張的情況下更方便進針。

豬腹部皮下采血技術操作要點：首先根據豬的大小選用合適的保定方法，成年豬站立保定，或在其側臥休息時不作保定，仔豬則采取腹部朝上方式保定，使得腹部皮下靜脈更為怒張。其次是做好消毒工作，采血人員在豬第1～4 對乳房外側乳靜脈處選取血管最為清晰的采血部位，并用酒精棉球反復擦拭采血部位，達到清潔消毒目的。然后是做好采血工作，采血人員輕撓豬采血部位附近的皮膚，以達到安撫和轉移注意力的效果，同時找準采血進針部位，采血人員手持采血針進針采血，待回血后抽取所需用量的血液。最后做好止血消毒工作，采血人員用干燥消毒棉球壓住進針處并拔出針頭，持續壓迫止血3～5min，止血結束后用碘酒棉球對采血部位進行消毒，解除豬只保定。

2 不同豬群對采血技術的選擇要求

豬藍耳病是一種嚴重影響豬呼吸道健康和豬群繁殖能力的傳染性疾病，豬藍耳病兼具豬群水平傳播和垂直傳播能力，藍耳病的暴發往往可以對養殖場繁殖鏈造成嚴重打擊，進而極大地影響場內經濟效益。目前大多數養殖場實施仔豬群、母豬群、公豬群、育肥中大豬群分欄、分舍甚至分區域養殖模式，這有利于豬藍耳病分豬群精準防控策略的制定和實施。豬藍耳病精準防控策略的制定和實施需建立在科學監測結果之上，因此針對不同豬群制定科學的血樣采集計劃對于開展豬藍耳病病原學和血清學監測工作至關重要。不同豬群因其體格大小和生理特點差異，適用于不同的微量采血技術和多量采血技術，現將豬藍耳病防控過程中仔豬群、母豬群、公豬群、育肥中大豬群所適用的采血技術分類論述如下。

2.1 仔豬群采血技術

仔豬因免疫系統發育尚不完全，抗病能力較差，仔豬群體一旦感染豬藍耳病，其發病率和死亡率較其他豬群要高，因此做好仔豬群豬藍耳病防控工作十分重要。仔豬因靜脈血管相對較細并且體表暴露不明顯，因此所適用的采血技術范圍較窄，如微量采血技術中的耳靜脈采血、尾靜脈采血均不太適用于仔豬采血，多量采血技術中的前腔靜脈采血因對仔豬創傷較大，養殖戶也比較抵觸采用這種采血方式?？傮w而言，仔豬適用的微量采血技術為股靜脈采血技術。仔豬適用的多量采血可以優先選擇創傷較小的四肢靜脈采血技術和腋靜脈采血技術，前腔靜脈采血技術和腹部乳靜脈采血技術也可適用。

2.2 母豬群采血技術

母豬群是養殖場豬藍耳病防控重點監測群體，母豬群體一旦感染豬藍耳病可產生嚴重的繁殖障礙，導致母豬出現流產、產死胎、弱胎、木乃伊胎的幾率大大增高，并且母豬感染豬藍耳病后可以垂直傳播病毒，導致仔豬群體感染發病，嚴重動搖養殖場繁殖鏈根基，因此母豬群豬藍耳病防控工作成效往往可以決定全場繁殖鏈防控策略的成敗。所以，母豬群體在豬藍耳病防控過程中血樣采集工作更為頻繁，并且母豬群所采血樣往往需要同時進行病原學和血清學檢測，以動態評估母豬群野毒感染情況和免疫抗體水平。母豬群最常采用的微量采血方式為耳靜脈采血，此外尾靜脈采血和股靜脈采血也可適用。母豬群多量采血方式可優先選擇乳靜脈采血、四肢靜脈采血、腋靜脈采血，在非必要情況下可以不必選用前腔靜脈采血，以免對母豬造成較大應激。

2.3 公豬群采血技術

公豬群體感染豬藍耳病之后可以影響其健康狀況和生產性能，并且公豬精液也可帶毒散毒，因此對于公豬的藍耳病防控工作不可松懈。養殖場留用公豬群體數量一般較少，所以疫病監測過程中有條件的情況下一般應做到公豬群全覆蓋。耳靜脈采血、股靜脈采血和尾靜脈采血三種微量采血技術均適用于公豬群，其中耳靜脈采血技術使用最為廣泛。公豬群適用的多量采血技術包括四肢靜脈采血、乳靜脈采血、腋靜脈采血和前腔靜脈采血，其中前腔靜脈采血技術最好不要頻繁適用，以免對公豬造成較大應激。

2.4 育肥中大豬群采血技術

育肥中大豬群是養殖場內體量最大的群體，因此在藍耳病防控工作中對該群體的整體血樣采集樣本量也比較大。三種常見微量靜脈采血技術包括耳靜脈采血、尾靜脈采血和股靜脈采血，在育肥中大豬群均適用，當然，實施了斷尾手術的育肥豬群不再適用尾靜脈采血技術。四種常見的多量靜脈采血技術包括前腔靜脈采血技術、腋靜脈采血技術、四肢靜脈采血技術和乳靜脈采血技術，對于育肥中大豬群均適用，可以根據實際需要選用合適的采血方式。

3 豬藍耳病防控過程中采血注意事項

鑒于目前部分養殖場存在豬藍耳病反復發作流行的情況，豬藍耳病防控工作需建立在場內豬藍耳病病原學和血清學動態監測基礎上，以科學制定養殖場豬藍耳病動態防控方案。因此，采血技術在豬藍耳病防控工作中至關重要且應用頻繁?？傮w而言，豬藍耳病防控過程中采血技術的應用需注意以下相關事項。

3.1 根據檢測要求選擇采血方式

豬藍耳病病原學檢測即可以使用抗凝全血樣品制備的血漿，也可以使用血液凝集之后析出的血清。整體而言，如果僅開展豬藍耳病病原學檢測之時，針對各個豬群選擇相適宜的微量采血方式進行血液樣品采集即可。值得注意的是，由于仔豬群適用微量采血方式有限，因此也可以靈活選擇合適的多量采血方式如四肢靜脈采血技術、腋靜脈采血技術等對仔豬進行微量采血。一般每頭次采集0.5～1mL 全血樣品即可滿足豬藍耳病病原學檢測要求，采血結束后應將新鮮采集的血液樣品注入含有EDTA2Na（乙二胺四乙酸二鈉）或檸檬酸鈉的抗凝管內，以制備血漿用于樣品核酸提取和豬藍耳病病原學檢測。

豬藍耳病血清學檢測工作需要使用血液凝集之后析出的血清，如果需要開展血清學檢測、或同時開展病原學和血清學檢測，則針對各個豬群選用相適宜的多量采血方式進行采血，一般采集3～5mL 血液樣品便可以滿足檢測要求。將新鮮采集的血液樣品進行45°角靜置，待血清完全析出后，將血清轉移至新的容器內并做好標記，析出血清分別用于病原學和血清學檢測即可。

3.2 做好自身防護和豬只保定工作

采血人員和輔助人員在采血過程中應嚴格做好自身防護工作，穿好防護服，并佩戴一次性醫用口罩和乳膠手套，在采血過程中如出現防護服或手套破裂情況應及時更換。持針采血過程中應謹慎操作，避免針頭扎傷情況的出現。此外，根據采血技術的不同應選用和落實最為合適的豬保定或安撫方式，在保定過程中動作應盡量輕柔，最好采用撫摸方式安撫采血豬，避免采血豬躁動，保定確實之后應使得豬不能左右搖擺或前后移動，以免在采血過程中因豬掙扎造成采血人員及輔助人員人身傷害。

3.3 做好采血器具消毒工作

采血過程中所使用器具均應提前做好嚴格消毒工作，保證所使用采血器具和盛血器具清潔干燥。此外，應準備足夠量的醫用酒精棉球、干燥棉球和碘酒等，以備采血部位清潔消毒和止血之用。

3.4 掌握好進針角度和深度

根據采血技術和采血部位的不同，應掌握好進針角度和進針深度，如果出現血管被刺穿的情況應立即停止該部位采血，甚至放棄該頭次豬的采血工作，以免造成嚴重血腫而影響采血豬健康狀態。特別是采用前腔靜脈采血技術時，進針力度不能過大，進針深度不能過深，對于仔豬而言更要注意，以免扎傷采血豬的心包或心臟。

3.5 做好止血工作

采血結束后應即時做好止血工作，采用醫用干燥棉球壓迫進針部位數分鐘，確保針眼處無血液滲出后方可撤去止血棉球，并用碘酒擦拭采血部位以做好消毒工作。

3.6 做好血樣標記送檢工作

每頭次采血結束后應立即將血液緩緩注入提前備好的儲血容器內，做好樣品編號和標記工作，填寫采樣單，采樣單上要詳細注明養殖場點、豬群種類、存欄數、采血豬耳標號、日齡、豬藍耳病等疫苗免疫情況、豬只健康狀況等，采樣人員和養殖場主均應在采樣單上簽字并備注詳細聯系方式。用于血清學檢測的多量采血樣品需45°角傾斜放置于保溫冰盒內，以更好析出血清。所采樣品附帶采樣單要及時送往檢測部門，并且在運輸過程中應盡量避免樣品振蕩。

4 小結

綜上所述，血樣采集工作是做好動物疫病防疫監督工作的前提，對于需要開展常態化豬藍耳病防控工作的養殖場尤為重要。當前現代化養殖企業一般實施生豬繁殖鏈不同豬群分豬舍、分區域精準養殖，這為豬藍耳病分豬群分類防控提供了有利條件。豬藍耳病是一種可以引起感染豬病毒血癥的高度接觸性傳染性疾病，其活體豬群病原學和血清學檢測均依賴于血液樣本的采集。獸醫臨床長年以來積累了多種豬微量采血技術和多量采血技術，可供養殖場在進行仔豬群、母豬群、公豬群和育肥中大豬群豬藍耳病防控監測和血液樣本采集過程中合理選擇和使用。熟練掌握并選用最為適宜的采血技術，可以助采血人員安全、衛生、高效地完成血液樣本采集工作，進而有助于養殖場和相關部門制定和實施豬藍耳病科學防控策略，保障生豬養殖事業健康發展。