虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗在布魯菌病抗體檢測中的應用對比

孔嘉名

（本溪市疾病預防控制中心檢驗科，遼寧 本溪 117000）

布魯菌病又被稱作布病，主要由布魯氏菌感染引發所致，是全球廣泛流行的人畜共患病[1]。與牛、羊、豬有密切接觸史的屠宰人員和飼養員是布病高危群體[2]。若布病患者未得到及時、有效的治療，則會由急性轉為慢性，誘發隱性病灶，導致患者病情反復發作，嚴重影響患者身體健康和正常勞動能力。早期診斷對合理制訂治療方案、改善布病患者預后具有重要意義[3]。傳統的細菌培養檢測方法雖具有較高的準確性，但耗時較長，易延誤治療時機。隨著醫學技術的不斷發展，布病血清學凝集試驗成為臨床行之有效的檢測方法，具有操作便捷、快速、易于判斷的優勢，但仍存在漏診情況。為探尋更加可靠的檢測方法?；诖?，本研究旨在分析虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗在布病抗體檢測中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017 年7 月至2019 年7 月本心中366 例待檢的疑似布病陽性標本，其中男208例，女158例；年齡25～73歲，平均（49.03±8.17）歲。患者均對本研究知情，本研究經醫院倫理委員會審核批準。納入標準：疑似陽性；均接受虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗進行布病抗體檢測。排除標準：依從性差，無法配合研究；血液系統疾??；臨床資料不完整。

1.2 方法 ①采集血液標本，抽取患者晨起空腹靜脈血3～5 ml，促凝處理后2～8 ℃冷藏備用。②虎紅平板凝集試驗，使用中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所提供的虎紅平板凝集抗原，于冰箱內保存備用，溫度2～8 ℃。檢測時取血清標本30 μl，滴于干凈玻片上，取等量虎紅平板凝集抗原，使其與玻片上血清充分混合，5 min后用裸眼判定結果。③試管凝集試驗，使用中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所提供的布魯氏菌抗原液，于冰箱中保存備用，溫度2～8 ℃。布魯氏菌抗原液用0.9%氯化鈉溶液稀釋10倍，取血清40 μl添加到第1試管中，試管內含有0.9%氯化鈉溶液960 μl，均勻混合，取混合液500 μl添加到第2試管中，試管內含有0.9%氯化鈉溶液500 μl，按照1∶1的比例進行倍比稀釋，其余各5管以此類推。將稀釋10倍的布魯氏菌抗原液500 μl添加至各血清稀釋管中，混合均勻，常溫放置24 h觀察結果。根據《布魯菌病診斷標準》[4]判斷檢測結果，虎紅平板凝集試驗陽性標準：出現25%凝集（+）或以上；試管凝集試驗陽性標準：抗體滴度≥1∶100++。

1.3 觀察指標 ①比較虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗的檢測陽性率。②以細菌培養結果為金標準，分析并比較虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗在布病抗體檢測中的結果。③比較虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗兩種檢查在布病抗體檢測中的診斷效能，包括準確度、敏感度、特異度、漏診率和誤診率，敏感度=真陽性例數（/真陽性+假陰性）例數，特異度=真陰例數（/真陰性+假陽性）例數，準確度=（真陽性+真陰性）例數/總例數，漏診率=假陰性例數（/真陽性+假陰性）例數，誤診率=假陽性例數（/真陰性+假陽性）例數。

1.4 統計學方法 采用SPSS 23.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以“”表示，采用t檢驗，計數資料以[n（%）]或率（%）表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗的檢測結果分析 兩種檢查方法檢測布病抗體的陽性率比較差異無統計學意義，見表1。

表1 虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗的檢測結果分析Table 1 Analysis of the detection results of Rose bengal plate agglutination test and standard tube agglutination test

2.2 虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗在布病抗體檢測中的結果比較 細菌培養結果顯示，366 例疑似布病感染者中布病抗體檢測陽性15 例，陰性351 例，陽性率為4.10%（15/366）。以此為參照，虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗兩種檢測方式診斷布病抗體檢測的結果，見表2。

表2 虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗在布病抗體檢測中的結果比較（n）Table 2 Comparison of results of Rose bengal plate agglutination test and standard tube agglutination test in the detection of brucellosis antibody(n)

2.3 虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗檢測布病抗體的診斷效能評價 虎紅平板凝集試驗檢測布病抗體的敏感度高于試管凝集試驗，漏診率低于試管凝集試驗（P＜0.05）；試管凝集試驗檢測布病抗體的特異度高于虎紅平板凝集試驗，誤診率低于虎紅平板凝集試驗（P＜0.05）；兩種檢測方法的檢測準確性比較差異無統計學意義（χ2=0.612，P=0.433）。見表3。

表3 虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗檢測布病抗體的效能評價[%（n/N）]Table 3 Evaluation of the efficacy of tiger red plate agglutination test and tube agglutination test for detecting brucellosis antibodies[%(n/N)]

3 討論

布病起病緩慢，感染后患者缺乏特異性癥狀，可表現為亞急性、急性、慢性等多種類型，易出現誤診、漏診情況，延誤患者病情，影響預后[5-6]。由于細菌培養具有較高的檢驗條件要求，且檢驗時間較長，因此，多采用血清學方法進行布病檢測。相關報道顯示，虎紅平板凝集試驗快速易行，試驗簡便，有助于篩查布病患者；試管凝集試驗是診斷布病的常用手段，具有較高的特異度和準確度[7-8]。目前，虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗已被列入國家布病診斷標準，其中虎紅平板凝集試驗陽性即可判定為可疑病例，試管凝集試驗滴度1∶100++及以上即可判斷為陽性病例，可作為早期篩查布病的重要依據。

本研究結果顯示，虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗檢測布病抗體的準確度比較差異無統計學意義，提示兩種檢測方法在布病檢測中均具有較高的準確性，診斷結果相近。其中虎紅平板凝集試驗檢測布病抗體的敏感度高于試管凝集試驗，試管凝集試驗的特異度高于虎紅平板凝集試驗，可改善誤診情況，兩種檢查方法互為補充，能為醫師鑒別布病感染病例提供可靠的參考依據。分析后可知，盡管虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗兩種方法在布病抗體檢測中具有較高的準確度，但兩種方法檢測的抗體類型各異。其中虎紅凝集抗原呈酸性，pH值3.6～3.9，而在酸性條件下會抑制IgM的活性，因此，該方法主要用于篩查IgG類抗體，試管凝集試驗則主要以IgM 類抗體檢測為主。動物和人在感染布病后，體內均會出現IgM、IgG 抗體，但IgM 水平隨著病情的發展而快速下降，尤其是在慢性布病患者的血清中，IgM 水平呈低表達狀態，因此，通常需依靠IgG檢出此類病例。本研究中兩種方法的檢測陽性率存在一定差異，其中虎紅平板凝集試驗檢測的陽性率為6.01%，試管凝集試驗的陽性率為4.64%，證實了這一觀點。結合本研究結果表明，虎紅平板凝集試驗檢測成本較低，操作便捷，僅需依賴肉眼即可明確診斷結果，具有診斷快速、易于判斷、敏感度高的優點，在布病的流行病學調查和大范圍篩查中發揮著重要的作用。臨床中為了保證檢測結果的準確性，建議急性布病患者2 周后行血清學復查，以明確診斷結果，減少誤診，也可對虎紅平板凝集試驗陽性的樣本進行試管凝集試驗復查，以提高布病抗體檢測的診斷效能，進一步改善漏診、誤診情況[9-11]。

綜上所述，在布病抗體檢測中應用虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗均可有效檢出布病患者，二者的診斷準確性相當，其中虎紅平板凝集試驗檢測布病抗體的敏感度更高，漏診率更低，試管凝集試驗的特異度更高，誤診率更低，兩種檢測方法互為補充，可為醫師診斷布病提供可靠參照，具有重要的應用與推廣價值。