陶 群
(建湖縣上岡鎮農業農村局,江蘇 鹽城 224700)
犬細小病毒疾病病原屬于細小病毒科,細小病毒屬,與貓的泛白細胞減少癥疾病病原同屬細小病毒亞群。
CPV為負鏈單股的DNA病毒,無囊膜,病毒粒子呈二十面體立體對稱,直徑18~26nm,基因組全長5323bp,有三種衣殼蛋白:VP1、VP2、VP3?;蚪M包含兩個開放式閱讀框(ORFs),分別編碼非結構蛋白NS1、NS2和結構蛋白VP1、VP2。VP3蛋白存在于成熟的CPV病毒中,是VP2的裂解物,它只出現于衣殼裝配后和包裝后的基因組中。
CPV主要在有絲分裂旺盛的細胞中繁殖,如老齡動物的淋巴系統和幼齡動物的許多組織。它能在犬貓腸肺腎的原代和傳代細胞中很好地增長,也能在貂肺、牛睪丸等細胞中增殖。37℃下培養3~4d即可出現細胞拉長、破碎、脫落等病變,傳代細胞同步接毒或是在有40%~50%細胞貼壁時接毒是提高CPV分離率和病毒滴度的傳統方法。
高度接觸性是CPV的主要特征,犬科、貓科動物不分年齡都可以感染?;疾∪爸委熀煤蟮臄y帶細小病毒犬是健康犬感染的主要傳染源,通過排糞、排尿、口水向外排毒,易感染的犬則通過間接接觸或直接而感染。
感染是由病毒的入侵所致,最小感染劑量未知,但似乎非常小,甚至小至100個TCID50/g。病毒入侵后在感染的頭兩天,病毒在口咽部復制,通過血流轉播到其他器官,3~5d后出現病毒血癥,雖然腸道病變嚴重,但其感染是全身性的,病毒通過血流感染而不是通過腸腔進入腸黏膜。
對于病毒入侵細胞的機制,有研究顯示,健康犬經消化道感染病毒后,病毒主要攻擊兩種細胞,一種是腸上皮細胞,一種是心肌細胞,分別表現胃腸道癥狀和心肌炎癥狀,心肌炎以幼犬多見。
犬細小病毒病在臨床癥狀上體現兩種發病型:急性出血性腸炎型和心肌炎類型。
心肌炎型:心肌炎型細小一般發生在大約40d的幼犬身上,而最初的疾病一般沒有明顯的癥狀,看上去很健康,一旦發作,就會由于心臟功能不全、心力衰竭、呼吸困難而死亡,從發病到死亡的時間很短,有時甚至來不及搶救。然而,一些犬只會出現輕度腹瀉的早期癥狀,如果及時治療,也許能挽救生命。
腸炎型癥狀:腸炎細小病毒可在犬體內潛伏7~14d,然后犬的體溫會立即上升至39.5~40.5℃,出現情緒低落、拒食、嘔吐、腹瀉等癥狀。在疾病的早期階段,嘔吐物是剛剛被吞進肚子的食物,然后隨著病情的嚴重,嘔出黃綠色的黏液,有時還伴有血。此外,在疾病開始時,狗的排泄物呈淺黃色,隨著疾病的發展,糞便變成褐色或番茄色,排便次數明顯增加,糞便也帶有一種特殊的臭味。一般來說,根據嘔吐物和番茄顏色的血便,狗可以被診斷為細小疾病。如果你繼續讓狗狗腹瀉,狗狗會嚴重脫水,眼球塌陷,皮膚失去彈性,體重下降,導致休克、昏迷和死亡。小狗患有腸炎型細小病,如急性發作,在1~2d內死亡;如慢性發作,發病過程可長達1周。
犬細小病毒病的病理變化:出血性腸炎病犬的剖檢病變是十二指腸和空腸充血、水腫,漿膜出血,腸腔內還有紅色的水樣物,回腸也有類似的變化。淋巴結和胸腺充血、出血。組織學檢查時可見小腸黏膜上皮壞死和脫落,絨毛萎縮,隱窩萎陷或擴張,或數減少。腸管與膀胱上皮細胞內有核內包涵體;心肌炎病犬的剖檢病變為肺嚴重水腫,漿膜出血,心肌和心內膜有非化 膿性壞死灶,心肌纖維彈力降低、水腫,并伴有出血斑紋,心肌病變細胞內 有核內包涵體。診斷:根據本病的臨床癥狀、流行特點和病理變化,可作出初步診斷。但對初發病例必須進行實驗室診斷,其中包括病毒分離鑒定,血凝和血凝抑 制試驗(此法是近年來在臨床上常用的特異、簡便的診斷方法)、熒光抗體試驗等。在診斷時應與犬瘟熱、犬傳染性肝炎、犬冠狀病毒病、犬輪狀病毒病加 以鑒別。
4.1.1 根據流行特點
本病雖然全年各時期均可發生,但多出現于溫度變化較大的時期。滿月斷奶的小犬一般體現為心肌炎為主要病癥,而其他時期犬多以腸炎為主要臨床癥狀癥。本病潛伏期為7~14d,病程4~7d或更長。該病全年都有發生,但2~4月份及即將入冬時期較多發,心肌炎型主要以3~4周齡的幼犬為主。飼養管理條件驟變或惡劣,長途運輸,季節變換,溫度突變等都可增加該病的發病率和病死率,惡化病情,加劇癥狀。
4.1.2 根據臨床癥狀
對于腸炎型的病犬,一般先嘔吐后腹瀉,糞便惡臭呈黃色或醬油色,內涵多量黏液及腸脫落物,病后2~3d糞便中出現血液,體溫由最初的升高降至正常,病犬呈脫水狀,精神萎靡,食欲廢絕。
而對于心肌炎型的病犬,多出現呼吸困難的癥狀,心悸亢進,并伴有呻吟,可視黏膜蒼白,體質衰竭。
4.1.3 根據病理剖檢變化
犬細小病毒病的病理變化:出血性腸炎病犬的剖檢病變是十二指腸和空腸充血、水腫,漿膜出血,腸腔內還有紅色的水樣物,回腸也有類似的變化。淋巴結和胸腺充血、出血。組織學檢查時可見小腸黏膜上皮壞死和脫落,絨毛萎縮,隱窩萎陷或擴張,或數減少。腸管與膀胱上皮細胞內有核內包涵體;心肌炎病犬的剖檢病變為肺嚴重水腫,漿膜出血,心肌和心內膜有非化 膿性壞死灶,心肌纖維彈力降低、水腫,并伴有出血斑紋,心肌病變細胞內 有核內包涵體。診斷:根據本病的臨床癥狀、流行特點和病理變化,可作出初步診斷。但對初發病例必須進行實驗室診斷,其中包括病毒分離鑒定,血凝和血凝抑 制試驗(此法是近年來在臨床上常用的特異、簡便的診斷方法)、熒光抗體試驗等。在診斷時應與犬瘟熱、犬傳染性肝炎、犬冠狀病毒病、犬輪狀病毒病加 以鑒別。
臨床診斷:根據發病動物的臨床癥狀并結合細小病毒病的流行特點,病犬同時具有細小病毒病典型病癥三種或三種以上可初步判定為細小病毒病。
血液常規檢測:采集病犬靜脈血液,經預處理后,應用血細胞分析儀對血樣進行檢測,分析整理所得數據。
用上述臨床診斷方法,僅可對該病作出初步診斷,若要確診,需進行實驗室診斷,目前主要的方法如下:
4.2.1 血常規檢查
血液常規檢查血液中紅、白細胞數量,及糞便中潛血檢查,可以作為本病診斷的參考。
4.2.2 PCR檢測
最新研究成果顯示:建立可檢測CPV病原的巢式PCR診斷技術,可不與犬流感病毒、狂犬病病毒。犬瘟熱病毒、犬腺病毒發生交叉反應,能檢測到10-9的CPV總RNA量,具有特異性強、靈敏度高、穩定性好的特性,但需要昂貴的儀器和試劑,操作煩瑣,檢測成本高,臨床應用較少。
4.2.3 ELISA抗體試劑盒檢測方法
ELISA方法有操作簡便、快速、靈敏,可以同時檢測大批量樣品等特點,且不需要太昂貴的試驗設備,故此法為該病大規模普查的首選方法。
4.2.4 采用CPV試劑盒快速診斷
該方法為實踐中簡單快捷的常用的確診方法,大致操作如下:用棉簽沾濕后在病犬糞便或肛門中取樣,將棉簽浸入裝有樣品的試管中,充分混勻后,用一次性滴管取上清液,滴到CPV檢測板上,5min后若在對照區和檢測區均出現紅色帶,則結果為陽性;若僅在對照區有紅線,則結果為陰性。目前該法技術成熟,成本適中,被動物醫院甚至許多養犬者廣泛使用。本疫控中心對該病診斷即選用此方法。
本病的治療原則是以支持療法配合特異性治療為主,并以對癥治療和控制繼發感染為輔。
4.3.1 支持療法
病犬禁食,每天至少輸液1次,必要時每天2次,連用5~7d。以能量合劑補充病犬維持生命所需能量;輸鉀以治療病犬因多日不食引起的鉀失衡;靜滴碳酸氫鈉以緩解后期因長期未進食引起的酸堿平衡紊亂,防止酸中毒。
4.3.2 特異性治療
應用犬細小病毒高免血清或細小病毒單克隆抗體,1ml/kg,肌肉注射,1次/d,連用3~5d。也可二者聯合應用。
以上結果顯示聯合應用高免血清和單克隆抗體;治療效果最佳,而不應用特異性治療的病犬病死率極高。
4.3.3 對癥治療
對于頑固性嘔吐的病犬,肌注愛茂爾、阿托品;應用磺胺脒2g、藥用炭2g、安普霉素1g、云南白藥2g、止血敏2g深部灌腸以止瀉。VK1、VK2用于止血。
4.3.4 控制繼發感染
氨芐青霉素50mg/kg與丁胺卡那霉素10mg/kg聯用療效確切。
4.3.5 犬細小病毒病的免疫
CPV最低抗體保護值為1:80。使用的免疫程序如下:對于1周歲以下的犬,應用犬瘟熱、犬細小病毒二聯疫苗或犬瘟熱、細小病毒、傳染性肝炎、副流感四聯疫苗,剛斷奶后首免,間隔2~3周免疫1次,再間隔2~3周再免疫1次,以后每年免疫兩次。對于1周齡以上的犬,用上述疫苗每年免疫兩次,間隔2~3周。
(1)雖然目前CPV的高免血清和單克隆抗體已經非常普及,但就治愈率來講,如果病犬小于1周歲,并且沒有特別及時地送往專業醫院治療,即使聯合應用血清及單克隆抗體,治療效果也不容樂觀。除此之外,心肌炎型的病犬多呈急性經過,而且應激反應強烈,故診斷和難度往往大于腸炎型病犬。
(2)1歲以上的犬,患細小病毒病的概率最低,而5周齡以上1歲以下的幼犬發病率最高,這也就驗證了綜述部分的對于不同年齡的犬發病率不同的理論。5周齡以內的幼犬發病率明顯低于5周齡以上1歲以下的幼犬的原因應符合上面論述過的理論,即斷奶前的幼犬,可以通過哺乳,獲得母源抗體,從而降低了該病的發病率,而哺乳停止,母源抗體消失,自身免疫機制還未建立的幼犬是該病主要的感染對象。
(3)對于CPV主要的感染對象往往是純種犬的問題,目前還沒有相關研究結果可以解釋。筆者認為,人們飼養的純種犬通常必須從狗市或者寵物商店才能購得,而這些商人的意識及道德缺失,應該是造成純種犬患細小病毒病概率高的原因之一。
(4)由于患病犬的就診時間不同,導致在開始檢測時病犬處于不同的病程及感染狀態,故各受檢樣品間數據差異很大。另外,犬細小病毒病程中白細胞數量整體呈下降趨勢,其途中升高者,是由于繼發細菌感染,激活機體免疫系統所致。
(5)臨床實踐證明,應用在治療部分提及的中藥配方,配以西藥特異性療法并適當支持治療,可提高該病的治愈率。方中:大黃、黃連、黃柏、黃芩有殺菌抗病毒、清熱化濕,澀腸止痢等功效,并能提高機體免疫力,地榆、田三七、烏賊骨、白芨、生蒲黃等對消化道均有止血作用;白頭翁則能清熱燥濕、涼血止痢、吸收消化道毒物,減輕腸道負擔;甘草則調和諸藥。西藥特異性治療,輔以中藥調節機體平衡,增強自身免疫力,這種方法有望在臨床實踐中得以普及。
(6)犬細小病毒病的發病初期,往往僅表現出精神不振,食欲降低或廢絕,體溫升高,很難與其他疾病如感冒,犬瘟熱等病相區分,因此很多畜主從經濟方面考慮而放棄進行CPV試劑盒診斷,從而貽誤了最佳治療時機。而細小病毒病的治療時機最為關鍵,一旦錯過,則治療難度增大數倍。這是造成該病治愈率不高的主要原因。
由于筆者臨床有限,接診病例的數量有限,所得數據不能非常精確地揭示客觀規律,但通過對這有限的數據加以統計分析,所得的結論對獸醫工作者在細小病毒病方面的臨床工作也有一定的借鑒意義。