CYP2C19基因多態性與呼和浩特地區急性腦梗死氯吡格雷抵抗的相關性分析

伏紅霞 傅永旺 李攀

1內蒙古自治區人民醫院神經內科，呼和浩特 010017；2內蒙古自治區人民醫院高壓氧科，呼和浩特 010017

腦血管病已成為威脅人類健康和生命的主要疾病之一，急性缺血性腦卒中是最常見的腦血管病類型，在中國每年有超過200萬的新增病例［1］。我國腦卒中發病率和病死率呈現出由北向南的地理梯度，東北地區最高，南方地區最低［2］。氯吡格雷與阿司匹林合用或單用已被證明可以減少急性缺血性卒中或短暫性腦缺血發作（TIA）患者的新卒中發生［3-4］。對氯吡格雷反應存在個體差異，盡管使用氯吡格雷治療，甚至在使用雙抗血小板藥物治療的患者中，仍有大量后續卒中發生，可能與CYP2C19基因多態性相關［5-6］。因此，研究腦梗死的治療和預防尤為重要。本研究以呼和浩特地區急性腦梗死為研究對象，探討氯吡格雷抵抗與急性腦梗死的相關性，為急性腦梗死治療提供依據。

資料與方法

1、一般資料

選取2018年5月1日至2019年10月30日內蒙古自治區人民醫院收治的急性腦梗死患者181例，男105例，女76例，年齡43～85歲，平均66.46歲。入選標準：以《2018中國急性缺血性腦卒中診治指南》為診斷依據［7］；發病7 d內的急性非心源性缺血性腦卒中患者；頭顱MRI檢查證實為急性腦梗死。排除標準：對氯吡格雷、阿司匹林過敏的患者；美國國立衛生研究院卒中量表（NIHSS）評分＞15分；有心房顫動、出血性疾病、嚴重肝腎功能異常、自身免疫性疾病、惡性腫瘤的患者；近1全月有重大手術者；使用抗凝藥物者；有精神病史患者及不能配合治療者等。本研究經內蒙古自治區人民醫院醫學倫理委員會審核批準，所有患者及其家屬均知情，自愿參與本研究并簽署知情同意書。

2、CYP2C19基因型測定

在治療前采集所有患者的外周肘靜脈血5 ml，所有標本均外送廣州金域醫學檢驗中心有限公司進行CYP2C19基因檢測，通過限制性片段長度多態性聚合酶鏈反應（PCR-RFLP）方法進行檢測。按DNA提取試劑盒說明（TIANGEN）提取DNA，根據GenBank收錄的CYP2C19核苷酸序列及相關文獻合成引物［8］。擴增后按照PCR（20μl體系），10μl產物添加1μl限制性內切酶、2μl緩沖液進行酶切，對其進行凝膠電泳檢測分析結果，判斷基因型。根據患者體內CYP2C19酶活性將患者分為快代謝型（基因型CYP2C19*1/*1）、中 代謝 型（基因 型為CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3）和慢代謝型（基因型為CYP2C19*2/*2、CYP2C19*2/*3、CYP2C19*3/*3）。

3、資料收集

收集曾于內蒙古自治區人民醫院神經內科住院患者的臨床資料，包括性別、年齡、吸煙、飲酒、高血壓史、糖尿病史、三酰甘油、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、同型半胱氨酸（Hcy）、NIHSS評分。吸煙史定義為：吸煙年限為≥1年，且每日吸煙≥2支，種類為卷煙或旱煙；飲酒史定義為：飲酒年限為≥2年，且每日飲酒量≥1 g，種類為白酒。

4、統計學方法

本研究采用SPSS19.0統計學分析軟件，計數資料用構成比（%）表示，行χ2檢驗，正態分布的計量資料以（±s）表示，組間比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

1、氯吡格雷基因型檢測結果

181例急性腦梗死患者中，快代謝型92例（50.83%）；中代謝型69例（38.12%）；慢代謝型20例（11.05%）。

2、急性腦梗死患者臨床資料比較

3組患者的年齡、吸煙史、飲酒史、三酰甘油、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、葉酸、維生素B12、Hcy、高血壓、糖尿病比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05），3組患者NIHSS評分差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

3、不同CYP2C19基因型患者腦梗死復發情況比較

3組急性腦梗死患者隨訪1年，終點事件發生率快代謝型為3.26%（3/92）、中代謝型為5.80%（4/69）、慢代謝型為20.00%（4/20）。根據CYP2C19基因型，生存分析Log-Rank檢驗分析，快代謝型和慢代謝型比較差異有統計學意義（χ2=7.856，P=0.005）。

討 論

急性腦梗死是指各種原因所致腦部血液循環障礙，引起局部腦組織缺血，導致缺血性壞死，出現相應區域神經功能缺損的一類臨床綜合征。治療上應及時給予抗血小板治療，氯吡格雷是抗血小板藥物之一，其作為一種腺苷二磷酸受體拮抗劑，抑制血小板聚集，這種機制在血小板聚集試驗中與阿司匹林有協同作用［9］。氯吡格雷是一種無活性的前體藥物，在人體吸收、代謝后才能轉化發揮抗血小板聚集作用［10］，其在肝代謝過程中，CYP2C19基因編碼的細胞色素P450酶具有重要作用。氯吡格雷抗血小板聚集在急性腦梗死患者間存在個體差異［9，11］，在服用藥物中會再次引發急性或亞急性臨床缺血事件。因此，抗血小板聚集治療可有效治療急性腦梗死和降低腦梗死患者的復發風險。

本研究通過對181例急性腦梗死患者進行CYP2C19基因基因檢測，發現有89例患者有抵抗，其中69例（77.53%）為中代謝型，20例（22.47%）為慢代謝型，慢代謝型患者選用西洛他唑抗血小板治療。檢測氯吡格雷基因型對急性腦梗死患者選擇抗血小板藥物具有重要的臨床指導意義。

本研究收集了181例急性腦梗死患者的一般資料，包括患者年齡、吸煙史、飲酒史、三酰甘油、總膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、葉酸、維生素B12、Hcy、高血壓、糖尿病，通過對這些因素進行統計分析，發現遺傳因素與CYP2C19抵抗有關。另外NIHSS評分與CYP2C19基因相關，慢代謝型患者NIHSS評分較快、中代謝型高。隨訪1年內，快代謝型患者有3例（3.26%）復發，中代謝型患者有4例（5.80%）復發，慢性代謝型患者有4例（20.00%）復發，快代謝型腦梗死患者復發率顯著低于慢代謝者，差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，急性腦梗死CYP2C19基因檢測可以提示醫師在臨床用藥中注重個體化用藥，根據患者的基因型合理選擇藥物，并合理調整藥物劑量，從而改善缺血性卒中的預后和降低缺血性卒中的發生率。本研究CYP2C19慢代謝型患者樣本量相對較少，今后工作中不斷納入更多病例，深入研究內蒙古呼和浩特地區急性腦梗死患者氯吡格雷抵抗，為臨床預防和治療提供思路和方向。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突