影響獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的因素及對策

張文興

貴州省黔西南州興仁市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州黔西南 562300

在獸醫(yī)的實(shí)驗室中進(jìn)行抗體檢測，會無可避免的受到各種各樣因素的影響。筆者就當(dāng)前獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的影響因素進(jìn)行分析，并提出了盡可能避免影響結(jié)果的各種因素出現(xiàn)的措施，期望能夠提高獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1 免疫因素

1.1 實(shí)驗物種因素

在進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的過程中，需要進(jìn)行實(shí)驗物種的選擇，那么在進(jìn)行實(shí)驗物種的選擇過程中，要綜合性的根據(jù)各個方面的情況來進(jìn)行選擇，進(jìn)行一個正確的物種選擇，能夠大大增加獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如：在進(jìn)行實(shí)驗物種選擇的過程中，需要進(jìn)行10 ～20 d 的物種飼養(yǎng)，這樣能夠在進(jìn)行飼養(yǎng)的過程中進(jìn)行觀察，觀察其飲食狀況，判斷其是否存在營養(yǎng)不良的情況；觀察其生活狀態(tài)，判斷其是否存在隱性的遺傳病，并且這樣能夠更好的了解其健康狀態(tài)，防止物種自身的原因造成疾病或者死亡[1]。

1.2 實(shí)驗疫苗因素

如果獸醫(yī)實(shí)驗室選擇的疫苗存在著質(zhì)量不合格以及過期的現(xiàn)象，就會影響整個實(shí)驗的結(jié)果，那么對于疫苗的來源要通過正常渠道購買，部分實(shí)驗室人員為節(jié)省成本，通過不合法的渠道購買疫苗，對獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果造成影響，甚至造成了不可挽回的后果。另外，在進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的過程中，要使用單一變量法，每次進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測只進(jìn)行一種疫苗的注射，防止多種疫苗的注射造成物種的反應(yīng)，進(jìn)而影響檢測結(jié)果。

2 樣品因素

2.1 樣品的采集時間

樣本的采集時間對于獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測也會造成一定的影響，一般情況下，在進(jìn)行疫苗注射一段時間后，實(shí)驗室人員要分時間段的進(jìn)行疫苗作用的記錄，尤其是對于記錄結(jié)果的數(shù)值方面，包括極大值和極小值。同時在進(jìn)行樣本的采集和記錄過后，還要進(jìn)行不同物種以及不同疫苗之間的對比，防止偶然性情況對試驗檢測結(jié)果造成干擾。

2.2 樣品的采集方法

在獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測過程中，樣品的采集方法也會直接影響獸醫(yī)實(shí)驗室的檢測結(jié)果，尤其是在面對血清這種采集以及實(shí)驗都具有一定難度的樣本時，一旦出現(xiàn)采集的物種在采集前后出現(xiàn)死亡的情況，就會影響實(shí)驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。在采集時要采用血清采集的方式，并且要在無菌的條件下進(jìn)行，這樣能夠在一定程度上提高整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.3 樣品的處置和保管

在實(shí)驗物種血清樣品中會有一些凝血因子，這使得其特別容易凝固。那么在樣品的保管和處理過程中，通常會在其中添加一些化學(xué)試劑，在添加完化學(xué)試劑過后，還需要進(jìn)行離心處理，這樣才能夠讓樣品的保管更加妥當(dāng)。在實(shí)際進(jìn)行化學(xué)試劑的添加過程中，有許多實(shí)驗室人員會直接添加抗凝劑，這樣的方式也會造成實(shí)驗檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差。另外就是在完成前期的各項準(zhǔn)備工作之后，還需要采取正確的方式來進(jìn)行實(shí)驗樣品的保存，可以采用低溫冷凍的方式來進(jìn)行保存，也要注意實(shí)驗樣品的使用期限，防止過期造成的各項檢測結(jié)果不準(zhǔn)確[2]。

2.4 樣品的分裝

在進(jìn)行樣品的分裝過程中，也需要特別的注意，一旦不細(xì)致就可能對整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測造成影響，尤其是對于實(shí)驗這種需要極其細(xì)致的工作來說，更需要認(rèn)知和嚴(yán)謹(jǐn)。對于不同種類的樣品甚至同一種類的樣本的不同實(shí)驗都需要單獨(dú)的使用滴管和分裝瓶來進(jìn)行，每一個離心管和注射器只能對應(yīng)一份血清樣本，這樣能夠在樣品分裝方面給獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的影響降到最低。

3 實(shí)驗室因素

3.1 實(shí)驗器械的檢測

在進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的過程中，需要用到大量的器械，無論是一個器械進(jìn)行檢測，還是多個器械共同進(jìn)行檢測，一旦檢測的器械出現(xiàn)了質(zhì)量問題或者老化和損壞，那么整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的結(jié)果都會受到影響。在這樣的情況下就需要實(shí)驗室的工作人員在進(jìn)行儀器采購時，選擇質(zhì)量過關(guān)的器械，并且在進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測之前，要進(jìn)行誤差的測試實(shí)驗，防止新引進(jìn)的儀器本身存在著誤差，最終導(dǎo)致獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差，也防止其影響整個獸醫(yī)實(shí)驗室后期的實(shí)驗檢測。

3.2 實(shí)驗試劑的檢測

每個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體進(jìn)行檢測的過程中，都會使用到一種或者幾種的實(shí)驗試劑，在這樣情況下，實(shí)驗試劑的準(zhǔn)確性以及濃度和純凈度就會直接的影響獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果。另外，由于每個實(shí)驗幾乎都會使用到實(shí)驗試劑來進(jìn)行檢測，那么在進(jìn)行實(shí)驗試劑的選擇時就需要更加謹(jǐn)慎，在進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的過程中，也要對實(shí)驗試劑所需溫度、濕度等相關(guān)環(huán)境因素進(jìn)行保證，只有在最好的發(fā)揮實(shí)驗試劑的效果之下，進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測，才能體現(xiàn)整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.3 實(shí)驗室溫度

由于獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的科學(xué)性，那么對于實(shí)驗室的溫度要求也十分高，一些獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測在不同的溫度下會產(chǎn)生不同的結(jié)果，只有將溫度控制在一個實(shí)驗需要的溫度，才能更好的進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測。正常情況下，要進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測，溫度必須保持在24 ～26 ℃之間，一旦超出這個溫度范圍，那么這個溫度差的缺口將會對許多的分離試驗造成影響，可能還會存在一定的催化反應(yīng)，這就不利于實(shí)驗人員進(jìn)行實(shí)驗過程和結(jié)果的記錄，這樣較快的實(shí)驗速度會給整個實(shí)驗過程出現(xiàn)誤差造成機(jī)會。

4 人為操作因素

4.1 加樣操作因素

在人為的操作因素中，尤其要注意加樣操作的因素，因為在這樣的情況下容易產(chǎn)生氣泡，這樣就會影響獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，并且對于所加樣品的數(shù)量要嚴(yán)加控制，因為很多樣品都是被冷藏或者冷凍，那么在進(jìn)行加樣之前要將其進(jìn)行“解凍”，不能讓其與所要加入的樣品之間的溫度差過大，這些加樣方面的因素，如所加樣品的溫度、數(shù)量、氣泡等等都會影響獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果，要想保證獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)減少人為因素的影響。

4.2 洗板次數(shù)因素

ELISA 檢測相關(guān)抗體時，加完二抗進(jìn)行孵育后需進(jìn)行洗板，通常對于獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測來說有手工和機(jī)洗兩種，那么在洗板時要注意次數(shù)方面的影響。如果洗板次數(shù)太少，可能還會殘留著一些藥液；如果洗板次數(shù)太多也會讓接下來使用的反應(yīng)時間延長，這就會間接的導(dǎo)致獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。

4.3 結(jié)果判定因素

在完成顯色之后，就需要進(jìn)行結(jié)果的判定，在進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的判定時，需要在完成顯色反應(yīng)的20 min 以內(nèi)完成，在這個過程中，一旦超過查看結(jié)果的時間，那么整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的實(shí)驗就會被廢棄。要想獲得準(zhǔn)確的結(jié)果，就需要重新進(jìn)行實(shí)驗，將之前的各個步驟重復(fù)進(jìn)行操作，在這個過程中不僅浪費(fèi)了大量的時間，同時也浪費(fèi)了一定的人力和物力，往往一些獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測實(shí)驗在最終的結(jié)果判定過程出現(xiàn)偏差，導(dǎo)致整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的失敗，這是目前在進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測過程中浪費(fèi)性最大的影響因素。

5 環(huán)境因素

同在樣本因素中的實(shí)驗室溫度因素一樣，整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測過程的環(huán)境也是影響獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素，在這樣的情況下需要將整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測操作過程的溫度控制在19 ～24 ℃之間，這樣才有利于各個實(shí)驗過程對于不同溫度要求的控制，減少環(huán)境因素對獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的影響，能夠在很大程度上確保獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，在獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的過程中，要想保持獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，要從人為因素、免疫因素以及樣品因素入手，避免這三種因素的出現(xiàn)造成整個獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測出現(xiàn)錯誤或者誤差，由于造成獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測出現(xiàn)誤差的因素較多，那么在實(shí)際進(jìn)行獸醫(yī)實(shí)驗室抗體實(shí)驗的過程中，需要盡可能的避免能夠控制的因素，以提高獸醫(yī)實(shí)驗室抗體檢測的準(zhǔn)確性。