聯合檢測CK19、MC、TPO及CD56在甲狀腺乳頭狀癌病理診斷中的意義

李永春，彭鳳翔，高蓉梅，葉小娟

（武警四川省總隊醫院檢驗病理科，四川 樂山 614000）

甲狀腺乳頭狀癌是惡性程度較低且較常見的一種甲狀腺癌[1-2]。此病患者在病程初期多無明顯癥狀，隨著病情的進展，會出現頸部腫塊、吞咽困難、呼吸困難等典型癥狀，嚴重影響其生活質量，威脅其生命安全。因此，當患者觸及頸部有包塊時，需及時就醫，早診斷、早治療，以改善甲狀腺乳頭狀癌患者的預后，延長其生存時間。臨床診斷中，需重視甲狀腺乳頭狀癌與甲狀腺良性結節、甲狀腺腫間的鑒別診斷，以確保患者能夠獲得優質且有針對性的治療措施。除甲狀腺球蛋白、甲狀腺激素等常見指標外，細胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK19）、間皮細胞（mesothelial cell，MC）、甲狀腺過氧化物酶（thyroid peroxidase，TPO）及神經細胞黏附分子（neural cell adhesion molecule 1，NCAM-1，又稱CD56）這四項指標也能反映受檢者甲狀腺的功能、狀態[3-4]。因此，本研究擬針對CK19、MC、TPO、CD56 在甲狀腺乳頭狀癌病理診斷中的應用情況進行探討，分析這四項指標聯合檢測的診斷價值，以提升甲狀腺乳頭狀癌臨床診斷的準確率。具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020 年1 月至2021 年11 月我院收治的102 例甲狀腺乳頭狀癌患者和98 例甲狀腺良性病變患者作為研究對象。將其中98 例甲狀腺良性病變患者納入對照組，將其中102 例甲狀腺乳頭狀癌患者納入觀察組。診斷標準：1）觀察組病情符合《甲狀腺微小乳頭狀癌診斷與治療中國專家共識（2016 版）》[5]中的相關診斷標準；2）對照組經細針穿刺活檢確診為甲狀腺良性病變。病例納入標準：1）符合上述診斷標準；2）年齡為24 ～80 歲；3）頸部有可觸及的腫塊且存在吞咽困難等癥狀；4）臨床資料齊全；5）自愿簽署知情通知書，且經醫院倫理委員會批準同意。病例排除標準：1）合并其他惡性腫瘤；2）有甲狀腺乳頭狀癌病史；3）有語言、精神、意識障礙，配合度低；4）中途退出本研究。對照組中有男37 例，女61 例，年齡24 ～80 歲，平均（52.08±4.18）歲。觀察組中有男36 例，女66 例，年齡25 ～78 歲，平均（51.53±3.87）歲。兩組患者的性別、年齡相比無明顯差異（P＞0.05），有可比性。

1.2 方法

兩 組 患 者 均 進 行CK19、MC、TPO、CD56 檢測。檢測方法：采集患者手術切除后的甲狀腺病變組織樣本或經細針穿刺獲得的組織樣本，用10% 中性緩沖福爾馬林固定，常規處理組織，行石蠟包埋及連續切片，切片厚度為3 ～4 μm。采用免疫組化SP（streptavidin-perosidase） 法 對CK19、MC、TPO、CD56 這四項指標進行檢測。采用抗體免疫組化試劑盒（GenomeMe，型號IHC019）進行CK19 染色檢測，采用SP 試劑盒（福州邁新生物技術有限公司）進行MC、TPO、CD56 染色檢測。陽性判定標準：CK19陽性定位于細胞質；MC 陽性定位于細胞膜；TPO 陽性定位于細胞質、細胞膜；CD56 陽性定位于細胞膜和（或）細胞質。上述四項指標的陽性判定標準均為顯色呈棕黃色，按染色強度計分：0 分無著色、1分淡黃色、2 分棕黃色、3 分棕褐色；按陽性細胞比計分：0 分無陽性細胞、1 分占比＜25%、2 分占比25% ～50%、3 分占比＞50%。將兩個計分結果相加進行綜合評估，0 分為陰性（-）、1 ～2 分為弱陽性（+）、3 ～4 分為中陽性（++）、5 ～6 分為強陽性（+++）。

1.3 觀察指標

對比兩組患者CK19、MC、TPO、CD56 的陽性檢出率及四項指標聯合檢測的陽性檢出率。陽性檢出率= ﹝（+）例數+（++）例數+（+++）例數﹞ / 總例數×100%。統計CK19、MC、TPO、CD56 單獨及聯合檢測診斷甲狀腺乳頭狀癌的效能。診斷效能包括靈敏度、特異度、準確率。靈敏度=真陽性例數/（真陽性例數+ 假陰性例數）×100%。特異度= 真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100%。準確率=（真陽性例數+真陰性例數）/ 總例數×100%。

1.4 統計學方法

使用SPSS20.0 軟件對數據進行統計學分析，計數資料以%表示，行χ2檢驗，計量資料以±s表示，行t檢驗，P＜0.05 表示組間比較差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對比兩組患者CK19、MC、TPO、CD56 的陽性檢出率

觀察組CK19、MC 的陽性檢出率均高于對照組，TPO、CD56 的陽性檢出率均低于對照組，差異有統計 學 差 異（P＜0.05）。 觀 察 組CK19、MC、TPO、CD56 聯合檢測的陽性檢出率高于對照組，差異有統計學差異（P＜0.05）。詳見表1-表5。

表1 對比兩組患者CK19 的陽性檢出率[例（%）]

表5 對比兩組患者四項指標聯合檢測的陽性檢出率[例（%）]

表2 對比兩組患者MC 的陽性檢出率[例（%）]

表3 對比兩組患者TPO 的陽性檢出率[例（%）]

表4 對比兩組患者CD56 的陽性檢出率[例（%）]

2.2 CK19、MC、TPO、CD56 單獨及聯合檢測診斷甲狀腺乳頭狀癌的效能

CK19、MC、TPO、CD56 聯合檢測診斷甲狀腺乳頭狀癌的靈敏度、特異度、準確率均顯著高于四項指標單獨檢測。詳見表6。

表6 CK19、MC、TPO、CD56 單獨及聯合檢測診斷甲狀腺乳頭狀癌的效能[%（例/例）]

3 討論

甲狀腺乳頭狀癌是一種最常見的甲狀腺癌。流行病學調查數據顯示，在所有甲狀腺癌患者中，甲狀腺乳頭狀癌患者占85%～89.9%。甲狀腺乳頭狀癌多發于20 ～40 歲的青年人群，且女性的發病率高于男性。雖然此病的具體發病機理尚未明確，但臨床研究表明，遺傳、輻射、性別等因素會增加甲狀腺乳頭狀癌的發病風險。一般情況下，甲狀腺乳頭狀癌進展緩慢，惡性程度低，患者多能達到較好的預后效果。但此病若長期得不到有效的診治，腫瘤細胞仍會發生轉移，導致患者預后不佳[6-7]。因此，針對甲狀腺乳頭狀癌臨床上提倡早發現、早診斷、早治療，以改善患者的預后。為提升甲狀腺乳頭狀癌的臨床診斷效能，本研究探討了聯合檢測CK19、MC、TPO 及CD56 在甲狀腺乳頭狀癌病理診斷中的意義。研究結果顯示，觀察組CK19、MC 的陽性檢出率均高于對照組，TPO、CD56 的陽性檢出率均低于對照組，差異有統計學差異（P＜0.05）；觀察組CK19、MC、TPO、CD56 聯合檢測的陽性檢出率高于對照組，差異有統計學差異（P＜0.05）。提示甲狀腺乳頭狀癌患者與甲狀腺良性病變患者CK19、MC、TPO、CD56 的陽性檢出率存在顯著差異，將這四項指標聯合應用到甲狀腺乳頭狀癌的臨床診斷中，有助于幫助臨床醫師分析、評估患者甲狀腺的功能、狀態，提高診斷的準確率，原因可能是：1）CK19 是一種低分子量的細胞角蛋白，現階段其已成為臨床上常用的一種腫瘤免疫組織化學標記物。在生理學中，CK 主要有維持上皮組織完整性、連續性的作用，廣泛分布于上皮細胞中，并以骨架蛋白的形式存在于角質細胞中。甲狀腺乳頭狀癌作為源于濾泡細胞的惡性上皮腫瘤，可導致濾泡細胞嚴重受損，使細胞出現異樣的增殖分化，進而可在患者的血液及病理組織中檢出CK19 水平呈顯著上升的趨勢，整體呈彌漫陽性表達，靈敏度較高[8-9]。但由于甲狀腺疾病均易導致CK19 水平上升，甲狀腺結節、腺瘤等甲狀腺良性病變患者CK19 的陽性檢出率也較高，因此該指標的特異度較低。在臨床診斷中，不可將CK19 作為單一的診斷指標。2）MC 作為間皮細胞，主要由中胚層發育而來。在生理學中，MC 主要有潤滑、保護器官的作用，是間皮表面微絨毛的重要抗原成分，屬于特異性標志物。甲狀腺一旦發生病變，即可檢測到MC 的水平顯著上升，有較高的靈敏度，能有效反映受檢者的甲狀腺病變情況，尤其是在腫瘤新生血管、腫瘤細胞生長轉移中的檢出效果較好。但與CK19 相似，MC 在甲狀腺增生結節、橋本甲狀腺炎等甲狀腺良性病變中的陽性檢出率也較高，故其特異度較低。因而在臨床診斷中，也需盡量避免將MC 作為唯一的診斷指標，需結合其他指標或影像學檢查結果等，對受檢者的病情進行綜合評估、預測。3）TPO 是催化甲狀腺激素的重要酶，主要由甲狀腺濾泡細胞合成[10]。甲狀腺濾泡細胞一旦出現異常增殖分化，TPO 的水平就會呈顯著下降的趨勢，即TPO 的水平與甲狀腺乳頭狀癌的惡化程度呈負相關，惡化程度越嚴重則TPO的檢測值越低。而在甲狀腺良性病變中，濾泡細胞未受到過多損傷，能維持較高水平的TPO。因而在TPO檢測中，若檢測結果為（-），則代表TPO 數目過少、受檢者甲狀腺乳頭狀癌的患病風險高。4）CD56 屬于神經細胞黏附分子。多項研究表明，神經細胞黏附分子在腫瘤抑制方面可能發揮一定作用，即CD56 的表達與腫瘤的惡化程度呈負相關。與TPO 相似，若CD56 的檢測結果為（-），則表明腫瘤惡化程度嚴重[11]。本研究的結果顯示，CK19、MC、TPO、CD56 聯合檢測診斷甲狀腺乳頭狀癌的靈敏度、特異度、準確率均顯著高于四項指標單獨檢測。這可能是因為CK19、MC、TPO、CD56 這四項指標均能反映受檢者的甲狀腺病變情況，但各指標均會受到一些因素影響，因而聯合檢測的效能更高。其中CK19、MC 在甲狀腺乳頭狀癌中呈高表達，在甲狀腺良性病變中普遍呈低表達，腫瘤惡化程度越嚴重，則CK19、MC 的檢測值越高；TPO、CD56 在甲狀腺乳頭狀癌中呈失（或低）表達，在甲狀腺良性病變中普遍呈高表達，腫瘤惡化程度越嚴重，則TPO、CD56 的檢測值越低。四項指標聯合應用，能有效消除、降低相關因素對檢出結果的影響，對提升整體的診斷效能有重要作用。張哲等[12]研究指出，CK19、MC、TPO、CD56 這四項指標的檢出結果都有可能出現假陽性、假陰性，單一應用有一定的局限性，而聯合應用的整體診斷效能則有所上升，這與本研究結果一致。

綜上所述，將CK19、MC、TPO、CD56 聯合應用到甲狀腺乳頭狀癌患者的病理診斷中，能提升診斷的準確率，值得推廣應用。