Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB聯合檢測在艾滋病并涂陰性肺結核診斷中的應用價值

李春明，覃美容，黃燕好

（佛山市三水區人民醫院，廣東 佛山 528100）

艾滋病是一種危害性極大的疾病。該病具有傳染性，常見的傳播途徑包括性傳播、血液及血制品傳播、母嬰傳播，其中以性傳播最為多見。該病是由人類免疫缺陷病毒（HIV）感染所致，隨著疾病的不斷發展，HIV 會攻擊人體免疫系統，讓人逐漸喪失抵御疾病的能力。有研究指出，艾滋病晚期患者可因出現嚴重感染、惡性腫瘤而致死[1-3]。涂陰性肺結核是一種常見的肺結核[4-5]。目前在我國針對涂陰性肺結核的診斷，X 線檢查應用最為廣泛，且X 線對肺部異常陰影的發現率高，但其特異性較差，對非結核難以定性，對于非結核性肺部疾病的診斷難度也較大[6]。臨床上常用到的涂陰性肺結核實驗室檢查包括T-SPOT.TB 檢測以及支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測，以上兩種檢驗方法針對涂陰性肺結核的陽性檢出率高，能及時發現肺結核[7-8]。本文對2020 年1 月至2020 年11月期間在我院接受治療的初診為涂陰疑似肺結核的50例艾滋病患者進行研究，旨在探討Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB 聯合檢測在艾滋病并涂陰性肺結核診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2020 年1 月至2020 年11 月期間在我院接受治療的初診為涂陰疑似肺結核的艾滋病患者50例，將其分為涂陰肺結核組（25 例）和非結核組（25例）。涂陰肺結核組中有男性患者15 例，女性患者10例；年齡區間41 ～57 歲，平均年齡為（51.12±1.17）歲。非結核組中有男性患者14 例，女性患者11 例；年齡區間39 ～57 歲，平均年齡為（50.98±1.20）歲。兩組患者的一般資料相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。研究對象的納入標準：臨床確診為艾滋病的患者；初診為涂陰疑似肺結核的患者；年齡大于18 歲，小于65 歲。研究對象的排除標準：合并有其他部位結核病灶的患者。

1.2 方法

進行T-SPOT.TB 檢測的具體方法如下：采用T-SPOT.TB 試 劑 盒( 英 國 Oxford Immunote Ltd.) 進行檢測。抽取患者的靜脈血, 分離外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs), 用AIM-V 培養液重懸細胞, 制備成濃度為2.5×105/mL的細胞懸液。將微量板放入37℃孵箱培養16 ～20 h后, 洗板并加入堿性磷酸酶標記的二抗, 將培養板置于2 ～8℃的環境中孵育1 h 后進行PBS 洗板。最后加入BCIP/NBT 底物工作液顯色, 于顯微鏡下進行計數判讀。進行支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測的具體方法如下：在支氣管鏡下使用一次性灌洗裝置分3 次將150 mL 的生理鹽水灌入患者的支氣管肺泡內，每次灌入50 mL 左右，生理鹽水的溫度控制在37℃左右。灌洗完畢后使用負壓緩慢吸引，調整回收負壓為50 ～80 mmHg，確保液體回收率大于40%。將患者的支氣管肺泡灌洗液送檢，進行Xpert MTB/RIF 檢測。將采集到的標本與氫氧化鈉異丙醇處理液按1:2 的比例混合，充分震蕩后于室溫下靜置15 min，在MTB 生物危險降低至1/106 后將混合液轉移至一次性塑料反應盒中。將反應盒放置于GENE Xpert 儀器（生產廠家：美國Gepheid 公司）中進行全自動檢驗，2 h 后讀取結果。

1.3 觀察指標

觀察對比兩組患者T-SPOT.TB 檢測的結果，陽性為肺結核；觀察對比兩組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測的結果，陽性為肺結核。

1.4 統計學方法

本次試驗使用SPSS 22.0 統計分析軟件進行數據分析。計量資料用均數± 標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者T-SPOT.TB 檢測結果的對比

涂陰肺結核組患者T-SPOT.TB 檢測結果的陽性率為80.00%，非結核組患者T-SPOT.TB 檢測結果的陽性率為16.00%。涂陰肺結核組患者T-SPOT.TB 檢測結果的陽性率顯著高于非結核組，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳情見表1。

表1 兩組患者T-SPOT.TB 檢測結果的對比[例（%）]

2.2 兩組患者支氣管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF檢測結果的對比

涂陰肺結核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測結果的陽性率（84.00%）顯著高于非結核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測結果的陽性率（4.00%），差異有統計學意義（P＜0.05）。詳情見表2。

表2 兩組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測結果的對比[例（%）]

3 討論

艾滋病是由感染HIV 引起的一種強傳染性疾病，患者的免疫系統遭到破壞，易發生各種感染性疾病，其中肺結核是艾滋病最為常見的機會性感染之一。結核病與艾滋病是一組可相互促進病變進展、惡化，迅速導致患者死亡的伴發病[9-10]。相關的研究指出，HIV 陽性患者感染結核桿菌后，結核病的發病率較HIV 陰性者高30 倍，且雙重感染患者的病死率高達1/3，遠遠高于單純肺結核群體[11-13]。針對艾滋病并發涂陰性肺結核的診斷，目前主要依靠X 線檢查和相關實驗室檢查[14-15]，其中X 線檢查的應用最為廣泛，但其特異性較差，對非結核難以定性，對于非結核性肺部疾病的診斷難度也較大[16-17]。T-SPOT.TB是一種操作簡單的酶聯免疫斑點檢測方法，該方法的靈敏度高，能夠準確捕獲細胞周圍的細胞因子。肺泡灌洗液檢驗是指通過微生物學及化學方法對肺泡灌洗液進行分析并獲得檢驗結果。為提高艾滋病并發涂陰性肺結核的檢出率，我院采取T-SPOT.TB 檢測聯合支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測對患者進行檢查。研究結果顯示，涂陰肺結核組患者T-SPOT.TB檢測結果的陽性率（80.00%）顯著高于非結核組患者T-SPOT.TB 檢測結果的陽性率（16.00%），差異有統計學意義（P＜0.05）；涂陰肺結核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測結果的陽性率（84.00%）顯著高于非結核組患者支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測結果的陽性率（4.00%），差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，T-SPOT.TB 檢測聯合支氣管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF 檢測在艾滋病并涂陰性肺結核診斷中的應用價值較高，值得在臨床上推廣。