富血小板血漿的應(yīng)用及研究進展

莊雅雯 曾奕明

福建醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院，福建 泉州 362000

富血小板血漿（platelet-rich plasma，PRP）是指通過多次離心的方法從自體新鮮全血中分離出來的血小板濃縮物，含有大量生長因子。由于PRP具有促進損傷組織修復(fù)、瘢痕修復(fù)等功能，且來源于自體，避免了免疫原性和一些傳染性疾病感染的風(fēng)險，制作過程便捷經(jīng)濟，對機體創(chuàng)傷小，近年來，在骨科、口腔頜面外科、婦產(chǎn)科、眼科、耳鼻喉科、普通外科和整形美容科等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用。特別是在歐美國家，PRP 應(yīng)用已非常廣泛。因此，本文展開綜述，探討富血小板血漿的應(yīng)用和研究進展。

1 PRP的發(fā)展歷史

1954 年，PRP 的 概 念 由Kingsley 首 次 提 出[1]。1977 年，PRP 首次被Harke 等[2]分離并制備。隨后Okuda 等[3]率先發(fā)現(xiàn)了血漿中含有多種生長因子，能夠促進組織修復(fù)再生。自2006 年開始，PRP 逐漸被認(rèn)定為促進毛發(fā)生長的新型治療工具，并被認(rèn)為是治療雄激素性脫發(fā)和斑禿的一種新療法[4]。PRP 是近年來備受關(guān)注的促進創(chuàng)面愈合和修復(fù)的新方法。近年來，歐美國家已有大量關(guān)于PRP 在創(chuàng)傷愈合方面的報道，由于PRP 制備簡單且為自體成分，并且沒有免疫排斥與傳播疾病的風(fēng)險，目前，在骨科[5]、口腔科[6]、整形美容科[7]等多個領(lǐng)域都已被研究報道。但目前PRP 釋放的生長因子促進創(chuàng)面愈合修復(fù)的機制仍需進一步闡明，而且PRP 的制備方法及有效濃度暫無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，PRP 可能受到其他技術(shù)變量的影響，PRP 的最佳濃度、劑量和時間都有待進一步研究。

2 PRP的作用機制

PRP 富含一系列生長因子、細(xì)胞因子和其他血漿蛋白，其中最主要成分是血小板，在血小板的α 顆粒中，富含有多種生長因子。當(dāng)PRP 中的血小板被激活時，α 顆粒可釋放一系列的生長因子，如血小板衍化生長因子（platelet diffraction growth factor，PDGF）、血 管 內(nèi) 皮 細(xì) 胞 生 長 因 子（vascular endothelial cell growth factor ，VEGF）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、成纖維細(xì)胞生長因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）等生長因子[8]，這些可能是血小板發(fā)揮功能的真正效應(yīng)因子。這些生長因子通過協(xié)同和拮抗作用形成復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，保持著機體內(nèi)環(huán)境的動態(tài)平衡，共同促進損傷組織愈合和再生。由于PRP 中各種生長因子促進創(chuàng)面修復(fù)的機制還未完全闡明，且生長因子內(nèi)部聯(lián)系也錯綜復(fù)雜，想在臨床上得到廣泛應(yīng)用，還仍需探索。

在PRP 中，除了較高的血小板濃度外，還含有白細(xì)胞及少量的紅細(xì)胞。在機體的宿主防御中，白細(xì)胞可誘導(dǎo)多種炎性細(xì)胞聚集，加強機體的局部抗感染能力，發(fā)揮加快損傷組織修復(fù)的作用。有文獻報道稱PRP 具備一定的抗菌效果，可以提供一個良好的微環(huán)境來促進損傷組織的修復(fù)，對于常見污染血小板的革蘭陽性球菌有明顯的抑制作用[9]。

3 PRP的制備

目前PRP 的制備方法眾多，可分為成分血單采集、血袋采集、PRP 專用分離套裝、試管法手工采集全血制備等。應(yīng)用于臨床研究中的PRP 絕大多數(shù)采用密度梯度離心法制備，根據(jù)全血中的白細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞的沉降速率不同，將全血進行二次離心后最終獲得含高濃度血小板的血漿。

激活PRP 的方法有許多種，最常用的為凝血酶聯(lián)合鈣劑，也有Ⅰ型膠原、殼聚糖、氯化鈣等方法，但具體哪種激活方法更優(yōu)，則仍無定論。添加激活劑可促進生長因子的釋放，理論上更能促進創(chuàng)面愈合修復(fù)，但也有學(xué)者認(rèn)為額外添加外源激活劑會顯著增加血液制品污染的風(fēng)險。

關(guān)于PRP 制備及應(yīng)用方面的報道，還存在爭議。PRP 的制備受很多因素的影響，如離心力、離心時間、激活方式等[10]。隨著人們對PRP 研究的不斷深入和臨床的廣泛應(yīng)用，探索出最合適便捷的PRP 制備方法也是一項重要的研究課題。

4 PRP的應(yīng)用

4.1 PRP在骨科中的應(yīng)用

PRP 作為一種新型的生物制劑，基于其用于組織修復(fù)取得了良好的臨床療效，在骨科領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注，尤其值得一提的是將PRP 加入手術(shù)器械中。PRP 在骨科領(lǐng)域的試驗研究與臨床應(yīng)用均較多，包括骨、關(guān)節(jié)和韌帶等常見部位的損傷。Imagama 等[11-12]在腰椎后外側(cè)融合術(shù)（posterolateral fusion，PLF）中應(yīng)用PRP 促進骨愈合的療效，結(jié)果顯示，與對照組相比，術(shù)中應(yīng)用PRP，椎體融合率高，骨愈合快。Sengodan 等[13]將PRP 注射應(yīng)用于肩袖損傷，在治療后2 個月及3 個月，患者肩關(guān)節(jié)疼痛緩解，功能改善，在治療后2 個月的超聲也顯示了愈合良好。Samy 等[14]進行了一項前瞻性研究，將60 例股骨頸骨折患者隨機分為兩組，對照組采用閉合復(fù)位3枚空心螺釘內(nèi)固定，另一組加用PRP 治療，研究結(jié)果顯示加用PRP 組愈合時間短于對照組。

雖然許多研究表明PRP 在各種骨科疾病中顯示出一定的臨床治療功效，但設(shè)計嚴(yán)謹(jǐn)、權(quán)威性高、樣本量大的前瞻性隨機對照研究報道并不多，所以也有部分文獻認(rèn)為沒有足夠的臨床證據(jù)證明PRP是有效的。因此，在未來的臨床研究中，應(yīng)嚴(yán)格遵循“重復(fù)、對照、隨機化”的統(tǒng)計學(xué)原則，加大樣本量，盡可能減少偏倚，以便在骨科領(lǐng)域中更好地開展關(guān)于PRP 研究。

4.2 PRP在口腔頜面外科中的應(yīng)用

富血小板血漿和衍生產(chǎn)品在動物醫(yī)學(xué)口腔疾病的治療中已被證明是安全且有前途的工具，可改善此類軟組織和骨組織的愈合。Bardi 等[15]分別用異源富血小板血漿治療患有慢性面部蜂窩織炎的巨蟒和患有繼發(fā)于慢性牙周病的嚴(yán)重上頜骨溶解癥變色龍，結(jié)果證明單次給予異源富血小板血漿能夠阻止骨溶解進展。Razmara 等[16]探討單獨應(yīng)用膠原支架和富血小板血漿膠原支架在預(yù)防唑來膦酸誘導(dǎo)的大鼠頜骨壞死中的成功率。結(jié)果顯示治療組骨密度、成骨細(xì)胞數(shù)量均高于對照組，提示應(yīng)用富血小板血漿膠原支架可成功地預(yù)防頜骨壞死。

4.3 PRP在整形科中的應(yīng)用

近些年來，PRP 已成為整形外科領(lǐng)域中最引人注目的研究熱點之一。由于PRP 良好的促傷口愈合修復(fù)能力，因此在皮膚美容領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。單獨應(yīng)用PRP 或與其他療法相結(jié)合已被證明對某些美容問題和皮膚病有益。李志民等[17]使用點陣CO2激光聯(lián)合PRP 治療痤瘡瘢痕，結(jié)果顯示瘢痕區(qū)皮膚創(chuàng)面愈合加速，術(shù)后顯著改善面部外觀。除治療面部皺紋和瘢痕外，PRP 還可以應(yīng)用于斑禿。Albalat 等[18]將80 例斑禿的患者分為皮質(zhì)類固醇治療組Ⅰ和PRP 治療組Ⅱ，在不同時間點使用皮膚鏡評估和毛發(fā)再生長評分來評價結(jié)果。研究結(jié)果表明PRP 是一種安全且有前景的斑禿治療方法。

4.4 PRP在胸科的應(yīng)用

迄今為止，將PRP 應(yīng)用在胸科領(lǐng)域的文獻較少，Karina 等[19]研究靜脈內(nèi)自體激活富血小板血漿療法對COVID-19 重癥和危重癥患者“促纖維化細(xì)胞因子”白介素（interleukin，IL）-1β 水平的影響。研究表明，活化自體PRP 可通過降低患者血漿IL-1β 濃度和改善PaO2/FiO2比值來預(yù)防重癥COVID-19 患者肺纖維化。有研究在豬模型上應(yīng)用PRP，認(rèn)為PRP 可以促進生長因子的早期釋放，刺激吻合口血管生成，加速氣道外科手術(shù)的愈合，且能減少吻合口并發(fā)癥[20]，同樣地，Spartalis 等[21]也將PRP 應(yīng)用于豬模型，發(fā)現(xiàn)PRP 能夠加速支氣管殘端創(chuàng)面的愈合。但其應(yīng)用的時機及最佳劑量仍需進一步研究，且其可能出現(xiàn)的并發(fā)癥仍需更多的試驗研究來證實。

5 最新研究進展

盡管PRP 在再生醫(yī)學(xué)上廣泛使用，但迄今為止，其在生殖醫(yī)學(xué)中的研究仍較少。國外有報道于宮腔內(nèi)行自體PRP 輸注，成功治療1 例嚴(yán)重宮腔粘連綜合征患者，這一療法可以讓子宮內(nèi)膜組織再生，導(dǎo)致血管增加，子宮內(nèi)膜增厚，恢復(fù)子宮內(nèi)膜功能，從而成功受孕[22]。Nazari 等[23]將438 名有接受冷凍胚胎移植的反復(fù)植入失敗病史的女性患者隨機分配到干預(yù)組（PRP）和對照組。干預(yù)組在胚胎移植前48 h 宮內(nèi)輸注PRP 0.5 ml，對照組接受標(biāo)準(zhǔn)治療。393 名參與者完成了這項研究，結(jié)果顯示PRP 組的化學(xué)妊娠率、臨床妊娠率和活產(chǎn)率均高于對照組。Coksuer 等[24]的研究同樣也發(fā)現(xiàn)，在有反復(fù)植入失敗史的不明原因不孕癥患者中，使用自體PRP 治療可提高體外受精成功率和妊娠結(jié)局。宮內(nèi)自體PRP 輸注是一種安全、廉價的輔助治療，這也預(yù)示著PRP 在生殖醫(yī)學(xué)中有廣闊的醫(yī)療前景，但該技術(shù)仍必須通過更大規(guī)模的臨床試驗來驗證[25]。

6 PRP的優(yōu)缺點及展望

近年來，PRP 因其制備簡單、自身來源、無添加劑、無免疫排斥、安全可靠等優(yōu)點，在許多學(xué)科得到了廣泛的關(guān)注和應(yīng)用。但對于PRP 的基礎(chǔ)和臨床研究還不夠深入，生長因子的活性、細(xì)胞和分子生物學(xué)機制及其相互作用仍然沒有完全闡明，還需要更多的實驗數(shù)據(jù)和更高質(zhì)量的隨機對照研究。各種文獻報告中有許多矛盾，這可能是由于各種研究中PRP 制備方法尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)、PRP 應(yīng)用的時機及術(shù)后觀察時間的差異所引起的。所以，為了改善并提升試驗設(shè)計的準(zhǔn)確性，必須建立一個統(tǒng)一的PRP制備標(biāo)準(zhǔn)。隨著細(xì)胞和分子生物學(xué)的發(fā)展，以上這些問題會被逐一解開，PRP 的臨床價值將能得到更好地體現(xiàn)。