KANNO血型系統（KANNO，037）的研究進展①

鐘 靖 龔晨輝 史華山 李凌波（邵陽市中心醫院輸血科，邵陽 422000）

人類紅細胞膜蛋白的遺傳變異可以通過“自然”產生的同種抗體來檢測，或通過妊娠、輸血等免疫途徑產生的免疫抗體來檢測，也可通過其他的方法如DNA序列分析來檢測紅細胞膜蛋白的多態性，但只有DNA分析才能檢測到卻沒有發現相應抗體的多態性不能稱為血型系統抗原［1］。2013年以來，共有10個新血型系統被確認，即分子基礎為跨膜蛋白SMIM1（基因名SMIM1）的Vel血型系統（VEL，034）［2］，以補體調節蛋白CD59（基因名CD59）為基礎的CD59血型系統（CD59，035）［1］，以核苷轉運蛋白1（基因名SLC29A1）為基因產物的Augustine血型系統（AUG，036）［3］，朊蛋白（prion protein，PrP）PRNP基因錯義突變所確認的KANNO血型系統（KANNO，037）［4］，基于癌癥相關的B4GALNT2基因變異而確認的Sid血型系統（SID，038）［5］，以及2021年正式確認的作為膽堿轉運體蛋白（編碼基因SLC44A2）的CTL2系統、ATP結合盒轉運蛋白（編碼基因ABCC4）的PEL系統、上皮膜蛋白3（編碼基因EMP3）的MAM系統、糖基磷脂酰肌醇錨定蛋白（編碼基因PIGG）的EMM系統、ATP結合盒轉運蛋白（編碼基因ABCC1）的ABCC1系統［6］。目前，國際輸血協會（international society of blood transfusion，ISBT）已確認由345個紅細胞抗原構成的43個人類紅細胞血型系統［6］。其中037號KANNO血型系統抗原編碼基因產物是KANNO糖蛋白，基因名PRNP，表達紅細胞KANNO抗原的糖蛋白為朊蛋白（prion protein，PrP），也稱細胞型朊蛋白（cellular prion protein，PrPC），與引起人克雅氏癥（creutzfeldt-Jakob disease，CJD）的朊病毒（scrapie prion protein，PrPSC）氨基酸序列完全一致，KANNO糖蛋白肽鏈上氨基酸發生谷氨酸（Glu）到賴氨酸（Lys）的基因突變（E219K），是KANNO陰性表型的分子基礎。本文主要針對KANNO血型系統的研究進展做一綜述。

1 KANNO血型系統的發現和血清學

早在1991年，一位49歲姓KANNO的日本婦女因子宮肌瘤入日本福島醫科大學附屬醫院治療，因嚴重貧血（Hb 5.5 g/dl）于5 d內共輸注5 U紅細胞。該患者既往無輸血史，有妊娠史，至輸血后第10天間接抗人球蛋白試驗（indirect antiglobulin test，IAT）出現微弱陽性，其產生的免疫性IgG抗體與所有鑒定譜細胞均發生反應，不與自身細胞凝集。經詳細檢測發現，該抗體與所有已知抗體不同，命名為同種抗體抗-KANNO（取先證者名字）［7］。

截至2014年，在日本共發現并鑒定了28例抗-KANNO抗體，含有抗體的28例患者中26例確定為紅細胞KANNO抗原陰性，在研究患者含有的抗-KANNO抗體IgG亞型時發現主要為IgG1，亦發現共存的IgG1和IgG2，共存的IgG1和IgG3，以及IgG4。28例中26例是女性，其中25例有妊娠史，全部28例中10例曾有輸血史，但未發現發生溶血性輸血反應（hemolytic transfusion reactions，HTRs）。調查的全部28例患者中孕婦14例，抗-KANNO導致新生兒紅細胞直接抗人球蛋白試驗（direct antiglobulin test，DAT）陽性病例中均未發展成新生兒溶血性疾?。╤emolytic disease of the fetus and newborn，HDFN），除了1例分娩后第2天新生兒總膽紅素升至15 mg/dl，接受光療治療24 h后緩解，歸因于ABO不相容的妊娠。抗-KANNO抗體大都由免疫反應產生，但產生因素由妊娠刺激多于輸血刺激，抗-KANNO臨床意義不大，可進一步對其抗原生物化學和遺傳學進行研究。而研究認為KANNO抗原屬于高頻抗原，該抗原較少或無臨床意義［8］。

2019年，YOSUKE OMAE等［4］通過全基因組關聯研究（genome-wide association study，GWAS）和全外顯子組測序（whole-exome sequencing，WES）方法，確定了編碼KANNO抗原的基因PRNP。分析發現，被調查的KANNO陰性的18例個體，其純合基因型的兩條染色體均發生了PrP的PRNP基因第219個氨基酸Glu到Lys的基因突變（E219K）。另外，應用單克隆抗體特異性固定化紅細胞抗原（monoclonal antibody specific immobilization of erythrocyte antigens，MAIEA）法，在紅細胞特異膜蛋白上定位KANNO抗原，并進一步將抗-KANNO血清應用于表達不同基因候選蛋白的細胞，發現抗-KANNO僅與表達正?；騊rP的KANNO陽性型細胞結合，而不與表達E219K突變（缺乏Glu）基因PrP的KANNO陰性型細胞結合。說明KANNO陰性表型人PRNP基因發生E219K變異后產生了針對“Glu型”PrP的同種抗體“抗-KANNO”，并由此確定了KANNO是新的紅細胞血型系統抗原。研究認為，鑒于亞洲人更容易出現KANNO陰性表型，而輸血和妊娠是產生抗-KANNO的關鍵因素，PrP在這些因素影響下的功能將是KANNO血型未來血清學研究的重點［4］。

2019年8月，ISBT將高頻率抗原KANNO正式確認為紅細胞血型系統抗原［6］。從而也證實了與人CJD、Gerstmann-Str?ussler-Scheinker綜合征（Gerstmann-Str?ussler-Scheinker syndrome，GSS）、家族性致死性失眠癥（fatal familial insomnia，FFI）、阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）以及動物的牛海綿狀腦?。╞ovine spongiform encephalopathy，BSE）及羊瘙癢?。⊿crapie）等［9-14］朊病毒病有關的PrP是一個新的人類血型。

2 KANNO血型的分子基礎及多態性

KANNO血型系統包含1個抗原KANNO，KANNO抗原的編碼基因位于20號染色體（4686456-4701588），基因名PRNP［6］。PRNP（NC_000020.11）是一個16 kb的基因，包含兩個外顯子，外顯子1屬于一個非編碼外顯子，可以作為轉錄起始位點，對調控PrP在細胞中的表達水平有重要作用；編碼朊蛋白PrP基因的開放閱讀框（open reading frame，ORF）位于外顯子2，該蛋白由253個氨基酸組成（圖1）［15］。一項對PRNP基因及獨立于PRNP編碼序列并與PRNP具有主要基因連鎖的PRND（prionlike doppel gene）基因的測序顯示，在PRNP的開放閱讀框的25 kb范圍內已發現56個SNPs位點（圖2），PRNP編碼區M129V、E219K等發生了氨基酸殘基取代，是錯義突變，A117A、G124G等未發生氨基酸殘基取代，為沉默突變［16］。此外，在PRNP基因密碼子51至91之間，存在1個八肽重復區域，組成是由1個九肽（27 bp，R1）及緊隨其后的4個八肽（24 bp）重復（R2，R2，R3和R4），可結合一定數量的Cu2+，與PrP構象轉變密切相關，4個相同的八肽僅核苷酸序列有小的變異［17］。PRNP的大多數致病突變是錯義突變（如E200K、D178N、A117V突變等），但是有幾個八肽重復插入（octapeptide repeat insertion，OPRI）突變、一些無義突變（如Q160X替換等）和至少一個的八肽重復刪除（octapeptide repeat deletion，OPRD）突變已被鑒定出來也屬于致病突變［17］。編碼KANNO血型抗原的PRNP基因具有豐富的多態性，紅細胞膜蛋白上這些變異中的一個（E219K）已經被同種抗-KANNO抗體所定義，并構成了KANNO抗原表位表達的基礎。可以設想，人紅細胞PrP的PRNP基因的其他多態性如果針對某種氨基酸也產生相應的同種抗體并被鑒定，那么KANNO血型系統將可能會有新的抗原加入進來。

圖1 PRNP的氨基酸序列Fig.1 Amino acid sequence of PRNP

圖2 P RNP-PR ND基因座位點圖，包括與PRNP外顯子1和2相關的SNPs位點［16］Fig.2 Line drawing of P RNP-PR ND locus，including location of SNPs relative to PRNP exons 1 and 2［16］

KANNO抗原的表達是由PRNP肽鏈的第219位氨基酸所決定，由PRNP編碼區655～657 bp處密碼子GAG轉錄翻譯，產物是219位Glu，當基因發生c.655G＞A突變，翻譯產物的氨基酸發生G219L（E219K）突變，219位氨基酸殘基變為Lys，成為KANNO陰性表型（純合基因型，K/K）形成的分子基礎（表1）［4］。該突變曾在一位患有GSS的日本患者PRNP基因的開放閱讀框中被發現［18］，該患在PRNP基因102密碼子發生脯氨酸（Proline，Pro）到亮氨酸（Leucine，Leu）突變的同時出現了219密碼子Glu/Lys（E/K）雜合子的多態性。這一多態性導致最常見的帶負電荷的Glu被帶正電荷的Lys替代，且發現這一GSS家族患病者與之前報道的僅有PRNP基因102密碼子突變病例在臨床病理方面具有明顯不同。E219K變異是日本人群的一種正常多態性，等位基因頻率為12%，219位點Lys等位基因頻率為6%［18］，KANNO陰性表型頻率為0.4%～0.7%［4］。在意大利亦進行了類似研究，選取100例健康對照人群、70例CJD病例及34位發病者家族中的正常人群，對PRNP基因219位多態性進行研究。結果在所有的受檢者中均未發現219位E/K基因型多態性，推測不同地域結果的差異很大程度上與受研究人群種族背景的不同有關［19］。韓國對健康人群展開129、171、219位點等多態性研究發現，韓國健康人群219位點Lys等位基因頻率為4%，E/K基因雜合子頻率為7.94%，低于上述日本健康人群［20］。E219K突變主要存在于日本及其他東亞人群，一項對中國626例健康人群E219K多態性研究顯示［21］，中國不同民族人群E/K基因型頻率不同，漢族（10.2%）、回族（4.5%）、維吾爾族（2.2%）。另一方面，維吾爾族（98%）和回族（96%）219位殘基E/E頻率高于漢族（90%），中國漢族的219位K等位基因頻率（5.1%）、回族（2.3%）和維吾爾族（1.1%），但目前沒有在219密碼子發現K/K純合基因［21］。在世界范圍，已知PRNP基因219位E/K多態性基因頻率亞洲為2.6%，中東/北非為0.6%，大洋洲為5.6%［22］。另外，KANNO陰性表型在亞洲巴基斯坦和美洲古吉拉特（Gujarati）印第安人中均有發現，頻率分別約為1.04%和1.94%［4］。

表1 PRNP基因核苷酸和氨基酸變化預測及KANNO血型系統表型Tab.1 Nucleotide and predicted amino acid changes in PRNP gene and KANNO blood group system phenotypes

3 KANNO糖蛋白的生理生化

PRNP基因編碼翻譯產物是KANNO糖蛋白，已證實為PrP［4］。KANNO糖蛋白亦屬于膜分化抗原CD230，是人類細胞表面重要的腫瘤標志物，PrP在不同類型的腫瘤中過度表達，與不良預后和治療抵抗有關［23］。PrP不僅表達在紅細胞膜上，還主要存在于人腦、心臟、骨骼肌、腎臟、二級淋巴器官等多種組織細胞中。其中，在腦和脊髓神經元、神經膠質細胞、白細胞等的表達量相對更高［24-25］。PrP是哺乳動物中高度保守的膜錨定蛋白，可通過糖基磷脂酰肌醇（glycosyl phosphatidyl inositol，GPI）錨定在細胞膜上。人PrP（HuPrP）肽鏈由253個氨基酸組成，分子量33～35 kD，PrP含有以下特征性區域：N端片段（N-terminal fragment，NTF）信號肽，一個八肽重復區，蛋白質中央高度保守的疏水區、C端片段（C-terminal fragment，CTF）疏水區［26-29］。KANNO糖 蛋 白的第219位氨基酸位于HuPrP折疊域結構的C端第3個α螺旋區域內，接近PrP在紅細胞膜的GPI錨定部位，第1個α螺旋的側面是1個雙鏈反向平行的β折疊，其中第2個β折疊和第3個α螺旋間有1個大的環狀結構，KANNO陰性呈現219位Glu到Lys的突變（圖3）。

圖3 HuPr P（E219K，KANNO陰性）的折疊域結構3D圖示（PDB代碼2LFT）Fig.3 3D structure of the folded domain of HuPr P（E219K，KANNO-negative）（PDB code 2LFT）

PrP在內質網（endoplasmic reticulum，ER）合成并完成翻譯后修飾過程，最初經轉錄翻譯后得到的PrP蛋白含有253個氨基酸殘基，隨后N端22個氨基酸殘基在修飾過程中作為信號肽被裂解［30］。肽鏈的C末端亦有23個氨基酸殘基被切除，并與GPI錨鏈連接，后經過高爾基體運輸，分泌到細胞表面，通過GPI錨固定于細胞膜的磷脂雙分子層［31-33］。因此錨定在紅細胞膜上GPI的KANNO糖蛋白肽鏈只有208個氨基酸，在運輸到高爾基體前，PrP會在內質網形成部分折疊并形成二硫鍵［34］。當PrP從高爾基體運送到質膜表面時，PrP會存在非糖基化、單糖基化和雙糖基化三種形式［35］。但有研究表明，PrP糖基化與否對其結構和功能并無明顯影響［36］。

PrP有兩種構象異構體PrPC和PrPSc，通常PrPSc產生一個較小的耐受蛋白酶分子，約142個氨基酸，稱作PrP27-30，TARABOULOS等［37］用抗PrP27-30抗體分別檢測未經蛋白酶K處理的正常動物和羊瘙癢病感染動物的腦組織提取物，首次發現PrPC和PrPSc的存在。1986年BASLER等［38］通過PrP的部分序列克隆其同源互補DNA（cDNA）基因，確定了PrPC和PrPSc由同一PrP基因編碼。PrPC為正常PrP，生理狀態下PrPC具有可溶性，對蛋白酶K敏感，在細胞代謝過程中，可被蛋白酶完全降解、清除。PrPC作為一種細胞膜表面糖蛋白，參與細胞之間信號跨膜轉導、細胞黏附、Cu2+代謝、抗細胞凋亡、抗氧化應激等過程，敲除該基因可導致與晝夜節律有關的動物行為異常，亦與人及動物腫瘤、細菌及病毒性疾病等的發生發展相關［39-43］。PrPSc為異常蛋白，是PrP致病形式，不溶于水溶液，能抵抗蛋白酶K酶解作用，具有致病性和傳染性［44］。一般認為動物組織中出現PrPSc的原因是自身PrP基因突變、PrP基因翻譯錯誤或感染了外源的PrPSc所致［38］。PrP基因突變和翻譯錯誤可誘發PrPC發生蛋白質錯誤折疊，導致三維構象發生變化而產生PrPSc，而作為病原體的PrPSc在感染動物后以自身為模板，與體內正常表達的PrPC相互作用，將后者轉變成為具有感染能力的PrPSc，并逐步在體內聚集，引起動物和人朊病毒病［14］。PrPC和PrPSc在一級結構氨基酸序列上并無差異，但二級結構特征出現明顯差異，PrPC轉變成PrPSc的過程不涉及任何翻譯后共價化學鍵的修飾，僅空間結構中α螺旋和β折疊所占比例發生改變。PrPC的α螺旋占43%，β折疊占3%，以α螺旋為主；而PrPSc的α螺旋占30%，β折疊占43%，以β折疊為主［45-46］。提示PrP理化性質和生物學性質的改變可能僅與其空間結構的改變有關。另外，OPRI似乎沒有直接影響PrP的構象，但功能研究表明，額外的兩個或兩個以上的八肽重復使PrPC對蛋白酶更有抗性，更容易聚集，這可以促進PrPSc的形成，八肽重復膨脹也會影響銅與PrP的結合，從而增加兩者之間的相互作用并有可能降低PrPC的穩定性和耐聚合性［47］。PrPC在其構象形成過程中具有內在的向PrPSc構象轉變的傾向，因此朊病毒病的發生始于PrPC向PrPSc構象轉變，PrPSc進而引起蛋白質的進一步聚集，最終在動物大腦組織中出現淀粉樣蛋白沉積斑塊，可見由PrPC向PrPSc轉變是朊病毒病發生的關鍵［48］。

盡管人們認識到PrPC向PrPSc轉化是疾病發生和發展的關鍵，但PrPSc如何復制和傳染，具體的機制仍不明確，目前對PrPC轉變為致病性PrPSc的解釋有3種假說［49］。其一為再折疊模型：假設PrPC發生去折疊達到一定程度，進而在PrPSc直接或間接影響下發生重折疊，形成折疊異常的致病性PrPSc；其二是種子模型：假設PrPC和PrPSc處于熱力學平衡，而PrPSc單體不穩定，聚集在一起后變得穩定，PrPSc聚集體通過結合PrPC單體促進PrPC的轉化，使平衡向形成致病性構象的方向移動；其三是模板輔助轉化模型：假設PrPSc在熱力學上比PrPC更穩定，但PrPC轉變為PrPSc需要克服能量障礙，在沒有PrPSc存在時，PrPC轉變為PrPSc的速度較慢，在PrPSc存在時，其與PrPC的結合降低了轉變所需的活化能，使PrPSc迅速增加，這種模式能夠解釋由于點突變而引起的基因朊病毒?。╣enetic prion diseases，gPrDs）。后兩種模式并不互相排斥，在PrPSc繁殖過程中有可能是這兩種模式共同作用。

4 KANNO血型基因與疾病

PrP是人紅細胞KANNO血型抗原，可表達在紅細胞膜表面，有獨立染色體基因位點，編碼PrP的PRNP基因存在于所有正常哺乳動物。HuPrP基因（PRNP）具有多種天然多態性，迄今為止已報道了全部超過60種PRNP突變，突變類型包括錯義突變、無義突變、八肽重復區的OPRI突變和OPRD突變等，目前能明確分類的突變類型超過40種［47］。

PrP基因（PRNP）突變是引起gPrDs的唯一已知原因，gPrDs是一種常染色體顯性突變［38］。gPrDs是由PRNP突變產生的PrPSc在腦內沉積所致，PrPSc具有傳染性和自我繁殖性，另外，PrPC轉化為PrPSc的過程可能也會導致神經損傷和損失［14，47］。多數gPrDs或表現為迅速發展的癡呆、共濟失調、肌痙攣等幾個月就死亡；或表現得緩慢，經過幾年的過程有輕度認知障礙、共濟失調、帕金森癥和老年癡呆；然而一些非常罕見的突變，在幾年甚至幾十年內有神經精神障礙和全身癥狀。根據PRNP突變類型、臨床特征及中樞神經系統組織病理改變將gPrDs分為3類：以皮層廣泛分布的海綿狀改變為特征的遺傳性克雅氏癥（genetic Creutzfeldt-Jakob disease，gCJD），以丘腦神經元局灶性丟失和膠質增生為特征的FFI，以PrP抗體染色陽性的淀粉樣斑塊大量沉積為特征的GSS。當前，已報告有23種PrP基因突變與gCJD的發病有關（P105T、G114V、R148H、D178N、V180I、T183A、T188A、T188K、T188R、T193I、K194E、E196A、E196K、E200K、E200G、V203I、R208H、V210I、E211Q、I215V、A224V、M232R、P238S），1種突變與FFI有關（D178N-129M），至少16種突變與GSS的發病有關（P84S、P102L、P105L、P105S、A117V、G131V、S132I、V176G、H187R、F198S、D202N、E211D、Q212P、Q217R、Y218N、M232T），另外有12個OPRI突變和1個OPRD突變被報告與gPrDs發病相關，6個與AD相關的致病性無義突變被報告位于C終端區的145、160、163、178、226和227密碼子［47］。

PrP基因的某些SNPs與gPrDs的發生關系復雜，有兩個常見的多態性位點：129位氨基酸殘基由甲硫氨酸（Met）突變為纈氨酸（Val）（c.385A＞G：M129V）；219位殘基由谷氨酸（Glu）突變為賴氨酸（Lys）（c.655G＞A：E219K）。這兩個多態性位點在gPrDs的發病過程中發揮重要作用。PRNP第129位密碼子可編碼甲硫氨酸（Met）、纈氨酸（Val），可表達基因型為M129M、M129V、V129V，129位密碼子多態性與gPrDs的易感性、臨床表型和病理特點有關，M129V被認為在散發型CJD（sporadic CJD，sCJD）、醫源型CJD（iatrogenic CJD，iCJD）、傳統型CJD（classical CJD，cCJD）中均發揮作用，純合子（M/M）型突變與歐美人中sCJD和變異型CJD（variant CJD，vCJD）的風險增加相關，但在亞洲人中不相關［51］。另外，如D178N突變，D178N伴129M時，臨床表現為FFI，而D178N伴129V（D178N-129V）時，臨床表現為gCJD［47］。KRASNIANSKI等［52］對6種突變類型的91例gPrDs患者的臨床資料進行分析時發現，M129M型占較大比例，且該類型患者與M129V、V129V型相比，發病年齡低、生存期短。

另一影響gPrDs發生的多態性位點是219密碼子（rs1800014），其中純合基因型的兩條染色體均發生E219K突變表現為KANNO陰性。這一突變最早由KITAMOTO等［52］在日本精神分裂癥患者基因組中發現。現已知該突變存在于日本及其他東亞或東南亞正常人群，而在歐洲人群中極少發現［54］。第219位E/K雜合子基因型占日本正常人群12%，但在CJD患者中則未發現E/K基因型［18］，推測PRNP基因上的E219K可能對sCJD有保護作用。CJD監測項目在東亞人群中發現了E219K多態性的高發生率，沒有確診的CJD患者攜帶這種多態性，這表明E219K雜合現象可能是CJD的一個保護性因素［55］。Ivana等利用重組磁共振結構的HuPrP（殘留物90-231）攜帶E219K多態性，發現E219K多態性的保護是由于改變了表面的電荷分布，此外還影響了朊病毒轉換的關鍵抗原決定簇細微的結構并重新排列［56］。盡管E219K雜合性顯示對sCJD的發展具有顯著的保護作用，但這種基因型并不能完全保護朊病毒病的獲得型或遺傳型形式，密碼子219位基因型的影響在散發型、獲得型和遺傳型之間的差異原因尚不清楚，但可能與最初生成的PrPSc數量有關［57］。

5 展望

KANNO紅細胞血型在2019年8月被確認為第37號血型系統。在那之前，人血清中特異性的抗-KANNO抗體已被發現，表達KANNO抗原的蛋白質被鑒定，其基因也已被克隆。與Konps系統類似，鑒于KANNO系統抗原抗體亦不導致HTRs和HDFN，其對輸血安全影響不大［58］。且編碼KANNO抗原的基因PRNP編碼正常PrPC和致病性PrPSc，PrPC和PrPSc又與KANNO抗原具有相同的抗原表位（氨基酸序列），這使得今后對KANNO系統的研究將主要集中在更準確地探究KANNO血型抗原和抗體對疾病的影響，以及在疾病診斷甚至是治療中的作用。

當前，已明確定義人KANNO陰性表型是PrP基因一個多態性突變，這種突變在日本以外的亞洲人群中以約5%比例存在，且幾百人中就有1人攜帶純合子。另一有趣的發現是，當人一條染色體發生這種突變時，對gCJD具有很強的抵抗性，因此KANNO血型對朊病毒病的影響也備受關注，對亞洲人KANNO血型與朊病毒病關系的研究也更有意義。

朊病毒病一直備受關注，其病因主要是在人或動物腦組織內出現并沉積大量異常的PrPSc而導致神經細胞死亡。診斷朊病毒病的金標準是檢測到PrPSc，但因正常人體內也存在的PrPC與致病性PrPSc相比，僅在空間構象上不同，所以檢測PrPSc并不容易。鑒于KANNO陰性表型人產生的抗-KANNO是針對“Glu型”PrP的免疫性抗體，可以設想一種檢測紅細胞上PrPSc的方法?？梢圆杉疜ANNO陰性表型人含抗-KANNO的血漿（抗-KANNO特異性針對Hu-PrP基因219密碼子的Glu），然后制備疑似患朊病毒病患者的紅細胞，使用蛋白酶K處理消化破壞紅細胞上PrPC（亦破壞KANNO抗原），保留紅細胞上的PrPSc（對蛋白酶K具有抗性），則在Coombs試驗中，IgG型抗-KANNO可與蛋白酶處理后的紅細胞上PrPSc發生反應。理論上，這可以成為利用血凝試驗檢測人群中高頻率KANNO陽性表型人PrPSc的一種簡單易行的新方法。