林潤昌 , 吳 凱 , 廖治鋒 , 蔡順萍 , 徐 亮 , 施遠國 , 李 繁 , 黃潤良 , 藍榮彬 , 邱廣斌 , 姜桂娥 , 黃平華,譚理琦
(1.深圳市動物疫病預防控制中心,廣東 深圳 518000;2. 深圳聯合醫學檢驗實驗室,廣東 深圳 518000 ;3. 新瑞鵬寵物醫療集團有限公司,廣東 深圳 518000;4. 深圳市瑞派寵物醫院管理股份有限公司,廣東 深圳 518000)
自2019年12月以來,新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)肺炎引發的人際傳播,全球累計確診病例已超過5.4億例,死亡病人630多萬,波及220多個國家和地區,病毒大流行已嚴重危害了人類生命健康安全。疫情流行期間,一些國家和地區相繼報道了不同動物(包括貓、狗、水貂、水獺、獅子、老虎、白尾鹿、倉鼠等)感染SARS-CoV-2的個案[1],引發了人們對寵物傳染SARS-CoV-2的擔憂,因此,開展集中隔離人員密接寵物的風險監測十分必要。
2022年3月中旬,深圳市福田區上沙塘晏村突發新冠肺炎疫情,急需對1萬多戶居民進行異地集中隔離,同時需要對150萬平方米區域的公共場地及排水系統進行清理消殺,并且需要對264只密接寵物進行集中隔離托管。為解決隔離人員的后顧之憂,防范密接寵物傳播疫情風險,福田區在塘晏村率先使用集裝箱設立簡易的寵物臨時安置點,集中接收隔離人員密接寵物。為應對深圳市可能出現的新一輪新冠疫情,深圳市成立了涉疫寵物風險管控工作專班,并在光明區快速建立全國第一家寵物集中托管中心,承擔全市各區收集和托管密接寵物任務。本試驗對集中隔離人員密接寵物進行風險監測,聯合了深圳市瑞派寵物醫院管理股份有限公司、新瑞鵬寵物醫療集團有限公司以及具備新冠病毒核酸檢測資質的深圳聯合醫學檢驗實驗室對塘晏村寵物臨時安置點和寵物集中托管中心2個托管點的318只寵物及其環境進行樣品采集和監測。由于國家尚未制定針對寵物的SARS-CoV-2采樣與核酸檢測方法,參考2003年SARS期間動物防控經驗,寵物的SARS-CoV-2采樣和核酸檢測均參照人的相關標準《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第八版)》附件10新冠病毒樣本采集和檢測技術指南進行[2]。
1.1 監測項目 新型冠狀病毒核酸。
1.2 監測對象 主要對2個寵物托管點的318只寵物進行監測。其中,塘晏村寵物臨時安置點托管的264只寵物,包括貓196只,犬59只,鴨1只,兔1只,倉鼠7只;寵物集中托管中心的54只寵物,包括貓28只,犬26只。
1.3 監測時間 對塘晏村臨時安置點的寵物監測從2022年3月18日—2022年4月6日,歷時19 d;對集中托管中心的寵物監測從2022年3月26日—2022年6月15日,歷時82 d。2個時間段共持續監測90 d。
1.4 主要儀器與試劑 核酸提取儀器:全自動核酸工作站NFAST 96L(深圳聯合醫學科技有限公司);核酸檢測設備:實時熒光定量PCR擴增儀:MA-6000型實時熒光定量PCR儀(蘇州雅睿生物技術股份有限公司);核酸提取試劑:核酸提取試劑(深圳聯合醫學科技有限公司);核酸檢測試劑:新型冠狀病毒2019-nCoV核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)(廣州達安基因股份有限公司)。
1.5 人員防護 采樣人員的防護按照《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第八版)》附件12《重點場所、重點機構、重點人群和特定人群新冠肺炎疫情防控指南》執行[2]。
1.6 采樣方法
1.6.1 鼻拭子 對新冠陽性患者的寵物每天進行鼻拭子采樣檢測,連續7 d檢測結果為陰性的,第9天、第14天和離場前1天進行鼻拭子采樣檢測(單拭子采樣);對集中隔離人員(新冠陰性)的寵物在第1天和第3天進行鼻拭子采樣檢測,檢測結果為陰性的,第7天、第14天和離場前1天進行鼻拭子采樣檢測(單拭子采樣)。將拭子以垂直鼻子(面部)方向貼壁轉動進入鼻孔內,至鼻腭處,使拭子在鼻內停留15~30 s,然后邊擦拭邊旋轉緩慢取出,最后拭子頭置入采集管中。
1.6.2 環境拭子 對寵物籠舍、飲水器、食槽、墊料等表面每3天進行1次采樣檢測,每個場所采1~3份樣品(混采)。用病毒采樣管中的病毒保存液充分浸潤采樣棉簽后,在需要采集的樣品表面至少涂抹10 cm×10 cm的面積,不足者采集全部面積。對樣品表面進行多點分布式采樣。擦拭過的拭子放入含有3 mL采樣液的采樣管中,棄去尾部。將采集的樣品置于感染性樣品運輸箱,冷鏈運輸送深圳聯合醫學檢驗實驗室進行檢測。為避免消毒對核酸檢測結果的影響,所有采樣均在消毒前進行。
1.7 檢測方法及陽性結果處理 實時熒光定量PCR檢測,按照《新型冠狀病毒肺炎防控方案(第八版)》中附件10《新冠病毒樣本采集和檢測技術指南》[2]和選用試劑盒內說明書要求開展檢測工作和試驗結果質量控制及判定。如環境或寵物檢測出核酸陽性,則對該區場所進行封閉管理,區內所有寵物實施鼻拭子及環境拭子1天1檢,直到連續7 d核酸檢測為陰性。
2.1 托管寵物SARS-CoV-2監測 對集中托管的寵物采集鼻拭子,共1 032份樣品。所有樣品檢測均為陰性,見表1。

表1 托管寵物樣品SARS-CoV-2監測結果
2.2 托管寵物環境SARS-CoV-2監測 對寵物居住環境及其生活用具采集環境拭子,共771份樣品,所有樣品檢測均為陰性,見表2。

表2 托管寵物環境樣品SARS-CoV-2監測結果
為了建立集中隔離人員密接寵物風險管控長效機制,深圳市建立一家面向全市、場所固定、布局合理、設施完善、管理規范、風險可控的寵物集中托管中心,在全國率先探索出密接寵物集中托管的 “深圳做法”,涉疫寵物集中托管無一例死亡,無一例發病,無一例投訴,有效地解決了集中隔離人員寵物托管難題,防范了疫情傳播風險。
疫情期間,深圳市動物疫病預防控制中心嚴格參照新冠肺炎疫情防控技術要領劃分“三區三級兩通道”,制定了寵物接送、區域轉移、消毒、無害化處置、人員管理等全流程配套指引,結合2003年SARS期間動物防控經驗,初步建立了寵物采樣技術、檢測技術,采集了福田區塘晏村寵物臨時安置點和寵物集中托管中心的318只寵物的鼻拭子1 032份,環境拭子771份,均未檢出SARS-CoV-2,即便是寵物主確診感染了SARS-CoV-2,也沒有監測到陽性寵物。
對于不同動物感染SARS-CoV-2的個案[1],專業人士指出,動物受感染主要與新冠確診者的撫摸或喂養,與動物嗅聞丟棄的口罩,舔食受SARS-CoV-2污染的草地、水、空氣和食物等有關[3]。世界衛生組織(WHO)指出,人類之間互相傳染仍然是SARS-CoV-2蔓延的主要途徑,作為與人類關系密切的寵物是否具有傳播SARS-CoV-2的可能性,學術界還需要收集更多的證據。因此,對寵物持續開展SARS-CoV-2監測工作仍有必要。
目前,全球新冠肺炎疫情仍處于高位,SARS-CoV-2仍在不斷變異,疫情的最終走向還存在很大不確定性,疫情防控工作依然不能放松。犬、貓等寵物是人類的伴侶動物,與寵物主關系密切。為此建議:(1)妥善處置密接寵物。對于隔離人員的密接寵物可采取體表和環境消毒以及適當的隔離措施;不宜對密接寵物貿然采取撲殺措施,否則容易引發輿情,不利新冠肺炎疫情防控工作開展。(2)探索和完善檢測方法。完善寵物SARS-CoV-2的檢測方法,提高檢測敏感性和特異性,深入探究寵物是否會感染SARS-CoV-2,為進一步加強新冠疫情防控工作提供科學依據。(3)強化生物安全培訓,提高人員防護意識。做好個人防護是預防疫情傳播的主要手段,動物從業人員(寵物養殖人員、執業獸醫等)要積極參加生物安全培訓,提高安全防護意識,要加強自我健康監測,定期接受SARS-CoV-2檢測。