多種有機磷農藥在GC和GC-MS/MS中的回收率對比研究

鄭樂濤，李 琰，趙迎春，李國富，胡嘉敏

（鶴山市農產品質量監督檢驗測試中心，廣東 鶴山 529700）

追求高效、準確、簡便的農殘檢測技術和方法，是每個農殘檢測實驗室努力的方向。在農殘檢測中，前處理方法和檢測儀器設備是檢測過程重點中的重點，應深入研究和改善。早些年，農檢實驗室引入的第一臺大型檢測設備多為氣相色譜儀（GC）[1]，因其性能穩定，操作和維護較為簡單，被從業者所青睞；農殘檢測一般運用《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》（NY/T 761-2008）的前處理方法[2]。近段時間，更為先進的三重四極桿氣質聯用儀（GC-MS/MS）[3]越來越被農檢實驗室采購使用，普及率逐步提高，多運用《食品安全國家標準植物源性食品中208種農藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質譜聯用法》（GB 23200.113-2018）中QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）[4]前處理方法。

本次試驗選取的試驗基質品種為冬瓜和柑。在我國，冬瓜種植面積大，消費量大，是餐桌上的常見農產品；而柑在南方地區種植居多，其不僅可以新鮮食用，還可以后期深加工為其他干制類產品。選取這兩種果蔬，具有較好的代表性和現實意義。通過添加甲胺磷、乙酰甲進行研究胺磷、甲拌磷、毒死蜱、甲基對硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷、樂果、殺螟硫磷這10種有機磷農藥，進行方法和儀器對比研究，根據試驗結果，驗證其差異。

1 材料和方法

1.1 試劑和耗材

甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、毒死蜱、甲基對硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷、樂果、殺螟硫磷標準溶液（100 μg/mL）、乙腈（色譜純）、硫酸鎂、氯化鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸氫二鈉、乙

二胺-N-丙基硅烷化硅膠、丙酮（色譜純）、乙酸乙酯（色譜純）、濾膜（0.2 μm，有機溶劑膜）、陶瓷均質子。

1.2 設備

三重四極桿氣質聯用儀（型號：Agilent 8890-7000D）、氣相色譜儀（型號：Agilent 7890B）、電子天平（型號：梅特勒托利多ME4002E）、離心機（型號：天美VELOCITY18R）、勻漿機（型號：天津恒奧HFJ-10）、水浴氮吹儀（型號：北京成萌偉業CM-24）、組織搗碎機（日本松下MX-151SG1）、漩渦振蕩器（型號：德國IKA MS3 control）。

1.3 主要設備運行條件

氣相色譜儀Agilent7890B運行條件：氣體流量：載氣20 mL/min、氫氣100 mL/min、空氣80 mL/min、加熱溫度：柱溫50℃～280℃、進樣口200℃、檢測器240℃。

檢測器類型：FPD色譜柱：DB-1701P。

三重四極桿氣質聯用儀Agilent7000D運行條件：氣體流量：1.2 mL/min、加熱溫度：柱溫60℃～310℃、進樣口280℃、接口280℃、離子源280℃、質譜類型：MSD色譜柱：HP-5MS UI。

兩部設備運行良好，狀態正常。

1.4 試驗基質樣品

冬瓜、柑（市場購買），各3 kg。

2 試驗步驟

2.1 樣品前處理

2.1.1 試驗樣品制備

將冬瓜和柑分別按以下方法制備：去柄，取全瓜或全果，切碎后，用四分法縮分，用組織搗碎機打成漿狀，封裝標記后備用。

2.1.2 試驗樣品農藥添加

對試驗樣品進行農藥添加，稱量數量和農藥添加情況見表1。

表1 試驗樣品農藥添加濃度情況表Tab.1 The pesticide addition concentration of experimental samples

2.1.3 試驗樣品提取和凈化

（1）NY/T 761—2008第1部分方法二的提取和凈化方法[5]：在稱量好的25 g試樣中加入50 mL的乙腈，通過勻漿機勻漿2 min，過濾到裝有6 g氯化鈉的具塞量筒中，手壓緊具塞量筒劇烈震蕩1 min后靜置30 min，使乙腈相和水相分層。靜置結束后，用刻度吸管吸取10 mL上層乙腈溶液，放入燒杯中，將燒杯放置在80℃的水浴氮吹儀中氮吹，蒸發至近干，加入2 mL丙酮，轉移至玻璃離心管，并用3 mL丙酮沖洗燒杯，再繼續轉移至玻璃離心管，定容至5 mL，漩渦混勻后用有機膜過濾到檢測樣品小瓶，約1 mL。

（2）GB 23200.113—2018 QuEChERS的提取和凈化方法[6]：稱量10 g試樣置于50 mL的離心管中，加入10 mL的乙腈，再加入0.5 g檸檬酸氫二鈉、1 g氯化鈉、4 g硫酸鎂、1 g檸檬酸鈉和一顆陶瓷均質子。劇烈振蕩1 min，離心5 min（4 200 r/min）。準確吸取6 mL上清液到15 mL離心管中，加入885 mg硫酸鎂、150 mg乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠，旋渦1 min，再離心5 min（4 200 r/min），用刻度吸管吸取2 mL上層清液于試管中，放置在40℃的水浴氮吹儀中氮吹，蒸發至近干，加入1.0 mL乙酸乙酯，漩渦混勻后用有機膜過濾到檢測樣品小瓶，約0.8 mL。

2.2 標準溶液配制

將濃度為100 μg/mL的甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、毒死蜱、甲基對硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷、樂果、殺螟硫磷，用丙酮稀釋配制至10 μg/mL，再分別用2.1.3制備出來的冬瓜和柑基質[7]，稀釋配制成這10種農藥的混合標準工作溶液，濃度分別為0.005 μg/mL、0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1 μg/mL。

2.3 上機檢測

按試劑空白、試樣、混合標準工作溶液（基質）的順序在氣相色譜儀（GC）和三重四極桿氣質聯用儀（GC-MS/MS）檢測。

3 試驗結果與分析

3.1 定量的線性關系

在氣相色譜儀（GC）上0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL系列濃度混合標準工作溶液，在三重四極桿氣質聯用儀（GC-MS/MS）上0.005 μg/mL、0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL系列濃度混合標準工作溶液，繪制標準曲線。從表2中可以看出，兩種方法的10種有機磷農藥的線性相關系數均＞0.990，線性關系良好。

表2 線性方程和相關系數Tab.2 The linear equation and correlation coefficient

3.2 冬瓜基質的回收率和精密度

冬瓜基質下，兩種方法的不同添加濃度的回收率和精密度情況見表3。

表3 兩種方法的回收率和精密度（冬瓜基質）Tab.3 The recovery rate and precision of the two methods(wax gourd matrix)

總體數據為：GB 23200.113—2018 QuEChERS法的回收率在47.0%～120.0%，總體平均回收率為79.6%，精密度在2.5%～8.3%。NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率在43.0%～106.0%，總體平均回收率為77.7%；精密度在0.8%～5.1%。

對分析部分異常試驗數據可知，添加濃度為0.01 mg/kg的各種農藥回收率起伏較大，精密度較大；GB 23200.113—2018 QuEChERS法中的甲拌磷的回收率較低，NY/T 761—2008第1部分方法二的丙溴磷、毒死蜱、甲胺磷回收率偏低；其他農藥的回收率均能落在60.0%～100.0%的理想區間且精密度良好。

總體分析可知，兩種方法的回收率差別不大。

3.3 柑基質的回收率和精密度

柑基質下，兩種方法的不同添加濃度的回收率和精密度情況見表4。

表4 兩種方法的回收率和精密度（柑基質）Tab.4 The recovery and precision of the two methods(citrus matrix)

總體數據為：GB 23200.113—2018 QuEChERS法的回收率在51.0%～120.0%，總體平均回收率為76.9%；精密度在2.3%～9.8%。NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率在45.0%～102.0%，總體平均回收率為77.6%；精密度在0.9%～6.2%。

對部分異常試驗數據進行分析可知，添加濃度0.01 mg/kg的各種農藥回收率起伏較大，精密度較大；GB 23200.113—2018 QuEChERS法中的甲胺磷、甲拌磷的回收率偏低；其他農藥的回收率均能落在60.0%～100.0%的理想區間且精密度良好。

總體分析可知，NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率稍微好一些。

4 結論

通過10種有機磷農藥運用NY/T 761—2008第1部分方法二和GB 23200.113—2018 QuEChERS法分別在GC和GCMS/MS得出的數據和分析結果可知，兩種試驗方法在冬瓜和柑這兩種果蔬基質上NY/T 761—2008第1部分方法二的回收率稍高一點，兩種方法的精密度均符合試驗要求。但GB 23200.113—2018 QuEChERS法所用試劑較安全，操作較簡便，高效，GC-MS/MS的樣品檢測時間較短。希望以后通過眾多科研人員對GB 23200.113—2018 QuEChERS法在GC-MS/MS上進行不斷摸索、研究、優化、改進，逐步提高農藥回收率，為農殘檢測探索出一種優良的試驗路徑。