郝 征
(1.保定學院生物化工與環境工程學院,河北 保定 071000;2.中國農業科學院植物保護研究所-保定學院土壤修復聯合中心,河北 保定 071000)
草莓(Fragaria×ananassaDuch.)營養價值豐富,被譽為“水果皇后”。因其含有豐富的維生素C、維生素A、維生素E、維生素B3、維生素B1、維生素B2、胡蘿卜素、鞣酸、天冬氨酸、銅、草莓胺、果膠、纖維素、葉酸、鐵、鈣、鞣花酸與花青素等營養物質[1],受到了人們的喜愛。
作為全國最早發展起來的兩大草莓基地之一的河北保定,自然地理條件優越,不僅周邊具有巨大的消費市場,其播種面積和產量在河北省也是排在第一。當地的栽培品種眾多,以‘紅顏’‘甜查理’為主。近幾年由于紅葉病的爆發,逐漸引入了‘隋珠’‘豐抗2號’和‘斯坦勒’等一些新的品種。保定地區早春偶有低溫氣候發生,使得草莓受到短時的低溫傷害,而給生產帶來了巨大的損失[2]。所以,了解新品種對當地氣候環境的適應度是目前迫切需要研究的問題。
本文通過測定和比較經過低溫處理的‘紅顏’‘甜查理’‘斯坦勒’‘隋珠’‘豐抗2號’這5個品種的葉綠素、可溶性糖、可溶性蛋白、丙二醛的含量和相對電導率變化情況,進一步評價了5個草莓品種的抗寒性,選出了更適于保定地區栽培的品種。
材料選用中國農業科學院植物保護研究所-保定學院土壤修復聯合中心形態建成室中栽培的‘紅顏’‘甜查理’‘斯坦勒’‘隋珠’‘豐抗2號’5個草莓的品種,以其葉片作為試驗樣品。
1.2.1 低溫處理
采用王沖等[3]的樣品處理方法,選取各品種草莓大小、長勢一致且無病蟲害的功能葉,用蒸餾水清洗干凈后,濾紙吸干水分,稱取1 g葉片,分別置于玻璃罐中,將其置于0℃、-5℃、-10℃、-15℃和-20℃的低溫下處理2 h。以常溫(25℃)條件下的葉片作為對照。每組處理設3次重復。
1.2.2 生理指標測定
測定經過不同低溫處理的葉片的葉綠素含量、可溶性糖含量、丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋白含量和相對電導率含量。
采用葉綠素儀測定葉綠素含量。采用蒽酮硫酸法[4]測定可溶性糖含量。采用硫代巴比妥酸法[5]測定MDA含量。采用考馬斯亮藍法[6]測定可溶性蛋白含量。使用電導率儀測定相對電導率含量[7]。
如圖1所示,經低溫處理,5個品種的草莓的MDA含量均在-20℃出現最大值,且均高于對照組,但變化趨勢各有不同。‘斯坦勒’隨溫度降低而升高;‘隋珠’呈先下降后上升的趨勢;其余3個品種均呈先上升后下降再上升的趨勢。其中‘甜查理’在-20℃與對照的差值最大(6.64 μmol/L)。隨后依次是‘斯坦勒’(5.57 μmol/L),‘豐抗2號’(4.43 μmol/L),‘隋珠’(3.61 μmol/L)。差值最小的是‘紅顏’(2.31 μmol/L)。

圖1 不同低溫處理對草莓MDA含量的影響Fig.1 The effect of different low temperature treatments on MDA content of strawberry
由圖2可發現,當溫度降低到-20℃時,5個草莓品種的葉素綠含量都低于對照(25℃),但變化趨勢不太一樣。除了‘紅顏’草莓的葉綠素含量呈先下降后上升再下降的趨勢,其余4種均呈先增高后降低的趨勢。其中‘紅顏’的葉綠素含量最大值出現在-10℃,‘甜查理’‘隋珠’‘豐抗2號’的最大值均出現在-5℃。對比最大值與對照的葉綠素含量差值,發現‘紅顏’的差值最大(9.3 SPAD),‘隋珠’的差值最小(2.1 SPAD)。

圖2 不同低溫處理對草莓葉綠素含量的影響Fig.2 The effect of different low temperature treatments on chlorophyll content of strawberry
如圖3所示,隨溫度的下降,除‘紅顏’的相對電導率呈先下降后上升的趨勢,其余4個草莓品種的相對電導率都呈先上升后下降的趨勢,并且5個草莓品種的相對電導率最大值均出現在-15℃,且明顯高于對照組。與對照相比,在-20℃時,‘豐抗2號’的差值最大(59%),其次是‘紅顏’(50.9%)。‘隋珠’(43.9%)、‘斯坦勒’(44.4%)和‘甜查理’(45.6%)的差值差別不大。

圖3 不同低溫處理對草莓相對電導率的影響Fig.3 The effect of different low temperature treatments on relative conductivity content of strawberry
如圖4所示,經低溫處理,‘甜查理’‘隋珠’和‘豐抗2號’可溶性糖的最大值出現在-10℃,‘紅顏’出現在-15℃,‘斯坦勒’出現在-20℃。‘紅顏’和‘甜查理’的可溶性糖含量呈先下降后上升再下降的趨勢,到-20℃時均比對照值低,且‘紅顏’的下降程度最大(3.135 mg/g);其余3個品種呈先下降后上升的趨勢,到-20℃時均比對照值高,其中‘豐抗2號’與對照值差值最大(2.432 mg/g),其次是‘斯坦勒’(2.34 mg/g)。

圖4 不同低溫處理對草莓可溶性糖含量的影響Fig.4 The effect of different low temperature treatments on soluble sugar content of strawberry
如圖5所示,經低溫處理后,5個品種草莓的可溶性蛋白的含量均呈先下降后上升的趨勢。‘隋珠’和‘豐抗2號’在-20℃時的可溶性蛋白含量最高,且均高于對照。同時,‘隋珠’與對照的差值最大(2.517 mg/g)。而‘紅顏’‘甜查理’和‘斯坦勒’的可溶性蛋白含量隨溫度的降低,均低于對照值。在-20℃時,‘甜查理’與對照的差值最大(3.241 mg/g),其次是‘紅顏’(1.724 mg/g)。

圖5 不同低溫處理對草莓可溶性蛋白含量的影響Fig.5 The effect of different low temperature treatments on soluble protein content of strawberry
研究表明,低溫會造成細胞膜的損傷,活性氧大量積累,產生大量的丙二醛[8]。電導率的變化可以反映出生物膜的損傷程度,相對電導率越低,植物的抗寒性越好。植物葉綠素含量也會隨著溫度的下降而降低[9]。但植物體自身可以積累可溶性糖以維持細胞內外的滲透壓平衡,即低溫環境下可溶性糖的含量與植物的耐寒性呈正相關[10]。其可溶性蛋白含量會在一定的溫度范圍內一直升高,當溫度超出某一范圍后,植物體本身逐漸產生不可逆的損傷,其含量開始降低[11]。
從試驗結果可以看出,隨著溫度的降低,5個品種的草莓均受到了不同程度的傷害。在-20℃時,與對照相比,‘隋珠’的MDA積累量較少,葉綠素含量減少程度最小,且可溶性蛋白含量增加,這說明低溫對其造成的傷害較小,抗寒性最強。雖然‘紅顏’的葉綠素含量與可溶性糖含量降低最多,可溶性蛋白含量也下降,但其MDA積累最少,且相對電導率增加程度居中,說明其受到的傷害較小,其抗寒性較強。‘豐抗2號’的相對電導率增加量最多,MDA積累量和葉綠素減少量居中,可溶性蛋白和可溶性糖含量均上升,說明其雖然受到了較大傷害,但仍可通過代謝進行調節以抵御低溫,得出其抗寒性居中。‘斯坦勒’MDA積累較多,葉綠素含量下降較多。雖然其相對電導率增加量少于‘豐抗2號’,但可溶性蛋白含量降低,可溶性糖含量增加量也低于‘豐抗2號’,判斷其抗寒性比‘豐抗2號’差。‘甜查理’MDA積累最多,可溶性蛋白下降程度最大,可溶性糖與葉綠素含量下降,相對電導率增加,說明其受到的傷害最大,抗寒性最差。
綜上所述,5個品種的草莓抗寒能力從強到弱依次為:‘隋珠’‘紅顏’‘豐抗2號’‘斯坦勒’‘甜查理’。因‘紅顏’與‘甜查理’為保定地區的主栽品種,則判斷‘隋珠’‘豐抗2號’與‘斯坦勒’均可適應當地的低溫條件,可以被大面積栽培。