寧波地區(qū)32 233例女性HPV感染情況及亞型特征分析

應(yīng)歡歡 胡劍 莫翼軍 牧啟田

子宮頸癌位列女性最常見惡性腫瘤第四位，僅次于乳腺癌、結(jié)直腸癌和肺癌。具有較高的發(fā)病率和死亡率，據(jù)統(tǒng)計(jì)僅2018年，全球就新增57 萬子宮頸癌患者，并有31 萬人死于該疾病[1]。我國在2018 年新增子宮頸癌患者約10.6萬，死亡人數(shù)約4.8萬，且發(fā)病年齡呈年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重危害著女性的生命健康。人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是一種無包膜的小環(huán)狀雙鏈DNA 病毒，目前已發(fā)現(xiàn)的HPV 亞型有200 多種，其中超過40 種與生殖道感染相關(guān)[2]。根據(jù)其致癌潛力可分為高危型HPV 和低危型HPV。有研究表明，大約99.7%的子宮頸癌中可檢測(cè)出高危型HPV，高危型HPV的持續(xù)感染是導(dǎo)致子宮頸癌的重要因素[3]。很多報(bào)道證實(shí)，HPV 的感染情況和亞型分布特征在不同的地區(qū)間存在較大差異[4-5]。為了解寧波地區(qū)女性HPV 感染現(xiàn)狀及基因型分布特征，本研究收集了寧波市第一醫(yī)院2019-2021 年檢測(cè)的32 233 例女性的HPV 分型結(jié)果，分析了寧波地區(qū)女性HPV感染情況和亞型分布特點(diǎn)，為本地區(qū)子宮頸癌的防治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年1 月-2021 年12 月在寧波市第一醫(yī)院婦科門診就診并行HPV 分型檢測(cè)的32 233 例女性。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）自愿接受HPV 分型檢測(cè)，在月經(jīng)來潮后10～18 d 采樣；（2）檢查前3 d 無陰道沖洗和陰道內(nèi)藥物使用，檢查前1 d 無性行為。排除標(biāo)準(zhǔn)：行子宮切除術(shù)或盆腔放化療。年齡13～89歲，平均（40.10±12.28）歲。按年齡分為＜30 歲、30～39 歲、40～49 歲、50～59歲和≥60 歲組。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審批，獲得入組人員或其家屬的知情同意。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 醫(yī)護(hù)人員以專用宮頸脫落細(xì)胞采集器進(jìn)行采樣。先以窺陰器暴露子宮頸，用棉拭子擦去子宮頸口過多的分泌物。取出宮頸刷置于子宮頸口，單方向旋轉(zhuǎn)4～5 周以獲得足量的上皮細(xì)胞樣本，然后將宮頸刷頭部放入洗脫管中，沿刷柄折痕處將宮頸刷柄折斷，旋緊洗脫管蓋，洗脫管中已加有專用細(xì)胞保存液，做好樣本標(biāo)識(shí)4 ℃保存待檢，保存不超過24 h。-20 ℃保存不超過3 個(gè)月，樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

1.2.2 HPV DNA 分型檢測(cè) 全部檢測(cè)流程均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，可檢測(cè)24 種HPV 基因型，包括18 種高危型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83 型）和6 種低危型（HPV6、11、42、43、44、81 型）。

1.2.3 儀器與試劑 北京博暉創(chuàng)新生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的核酸芯片檢測(cè)儀（型號(hào)BHF-VI）及其原裝配套試劑盒。

1.3 觀察指標(biāo)（1）分析HPV 感染情況及各亞型分布情況。（2）分析各年份HPV 感染情況。（3）分析不同年齡組HPV 感染情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)處理采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0 進(jìn)行，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV 感染情況及各亞型分布情況 32 233 例受檢者中，HPV 陽性7 916例，總感染率為24.56%（7 916/32 233）。24 種型別均有檢出，其中高危型HPV陽性5 715例，感染率為17.73%（5 715/32 233），占總感染例數(shù)的72.19%（5 715/7 916）；低危型HPV 陽性1 190例，感染率為3.69%（1 190/32 233），占總感染例數(shù)的15.03%（1 190/7 916）；高低危混合型HPV 陽性1 011例，感染率為3.14%（1 011/32 233），占總感染例 數(shù)的12.78%（1 011/7 916）。高危型HPV 各亞型檢出率前5 位依次為52 型1 841 例（16.20%），58 型1 054 例（9.28%），16 型921 例（8.11%），51 型664 例（5.84%），53 型608 例（5.35%）。低危型HPV 各亞型檢出率前5 位為42 型611 例（5.38%），81 型518 例（4.56%），44 型419 例（3.69%），6 型366 例（3.22%），43 型299 例（2.63%），見表1。

表1 HPV不同亞型分布

2.2 各年份HPV 感染情況 2019-2021 年進(jìn)行HPV 分型檢測(cè)的女性患者標(biāo)本共32 233例，其中檢出陽性標(biāo)本7 916例，總陽性率24.56%。2019 年檢測(cè)樣本9 030例，檢出陽性2 493例，陽性率27.61%，2020 年檢測(cè)樣本9 521例，檢出陽性2 321例，陽性率24.38%，2021 年檢測(cè)樣本13 682例，檢出陽性3 102例，陽性率為22.67%。不同年份HPV 陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=71.769，P＜0.001），呈現(xiàn)逐年降低的趨勢(shì)，見表2。

表2 2019-2021年寧波地區(qū)HPV感染情況

2.3 不同年齡組HPV 感染情況 不同年齡分組中，HPV 的感染率從高到低依次為，＜30 歲組，30～39 歲組，40～49 歲組，＞60 歲組，50～59 歲組，感染率分別為27.17%、25.54%、23.36%、22.31%、22.00%。HPV 感染者中，主要以單一型為主，陽性5 629例，感染率17.46%，占比71.11%（5 629/7 916），二重感染1 540例，感染率4.78%，占比19.45%（1 540/7 916），三重及以上者747例，感染率2.32%，占比9.44%（747/7 916），見表3。

表3 不同年齡組HPV感染情況

3 討論

中國是一個(gè)幅員遼闊，人口超14 億的大國，HPV 在中國不同省份的流行程度差異很大。許多研究報(bào)道了不同地區(qū)HPV 感染和基因型分布情況[6-8]。然而，關(guān)于寧波地區(qū)的HPV 流行情況的報(bào)道還比較少。本文是一項(xiàng)關(guān)于寧波地區(qū)HPV 基因型流行情況的大規(guī)模研究。本研究發(fā)現(xiàn)寧波地區(qū)HPV 總感染率為24.56%，與Liu 等[9]報(bào)道的浙江地區(qū)感染率22.8%接近，高于北京（21.67%）[10]、深圳（13.70%）[11]、河南（19.7%）[12]，低于吉林（34.4%）[13]、黑龍江（32.16%）[14]、山東（28.4%）[15]的感染率。各地區(qū)HPV 感染率差異的原因可能與經(jīng)濟(jì)條件、生活習(xí)慣、文化多樣性、采樣方式和HPV檢測(cè)方法等因素有關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)，2019-2021 年HPV 檢測(cè)的女性數(shù)量呈上升趨勢(shì)，而感染率處于下降趨勢(shì)，分析原因可能是，隨著經(jīng)濟(jì)條件的增長，人們的健康意識(shí)越來越強(qiáng)，有更多的人去醫(yī)院做子宮頸癌篩查，這其中會(huì)有很多的非子宮頸病變者，從而引起總感染率的下降。還有一個(gè)原因可能是陽性感染者經(jīng)過幾年的時(shí)間，由于自身免疫功能對(duì)HPV 的清除而使結(jié)果呈陰性，從而使總感染率下降。

全球各地女性HPV 感染的基因型各不相同。了解不同地區(qū)HPV 基因型的分布對(duì)疫苗的發(fā)展至關(guān)重要。據(jù)報(bào)道，在亞洲最流行的高危型HPV 基因型是HPV16、HPV52、HPV58、HPV18 和HPV56型，在歐洲最常見的高危型HPV 基因型是HPV16、HPV18、HPV31、HPV33 和HPV58 型[16]。本研究顯示，寧波地區(qū)前5 位高危型HPV 基因型是HPV52、HPV58、HPV16、HPV51 和HPV53型，這與深圳地區(qū)、廣州地區(qū)的前5 位高危型HPV 基因型一致，而與黑龍江、蘇州、山東、北京等地區(qū)雖然在排序上有差異，但前5 個(gè)感染亞型還是一致的。與天津（HPV16、52、53、51、68 型），新疆（HPV16、52、58、53、66 型），三亞（HPV52、58、16、51、39 型）的前五位略有區(qū)別，但前三位還是一致的[8，10-14]。從國內(nèi)的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，高危型HPV 感染的前三位都是HPV52、16、58型，而在歐美多見的18 型在我國人群中的比例較低。這也跟Clifford 等[17]在研究中發(fā)現(xiàn)HPV58、52 型在亞洲人群中更常見一致。此外，本研究還調(diào)查了低危型HPV 的分布，結(jié)果顯示前3 種最常見的低危型HPV基因型分別是HPV42、HPV81、HPV44 型。低危型HPV 在子宮頸癌中是非常罕見的，主要引起生殖器疣、普通疣、扁平疣和許多其他皮膚病變[18]。當(dāng)前可用的HPV 預(yù)防性疫苗主要有3種，二價(jià)疫苗（HPV16、18 型），四價(jià)疫苗（HPV16、18、6、11 型），和九價(jià)疫苗（HPV16、18、45、52、58、31、33、6、11 型），本研究結(jié)果更支持九價(jià)HPV 疫苗在寧波地區(qū)的常規(guī)接種。但寧波地區(qū)高危型HPV 中常見的51、53 型未在九價(jià)疫苗內(nèi)，還有低危型HPV 主要是42、81型，也不在九價(jià)疫苗里，所以研發(fā)適合本地區(qū)的疫苗更加迫切，預(yù)防性疫苗如果可以包括HPV51、53、42、81 型的話可以更好地保護(hù)寧波地區(qū)女性的健康。

既往的研究顯示，HPV 感染率的年齡分布多呈U 形[11-14]。本研究發(fā)現(xiàn)寧波地區(qū)女性HPV 感染率具有獨(dú)特的年齡分布特征。HPV 的感染率從高到低依次為＜30 歲組，30～39 歲組，40～49 歲組，＞60 歲組，50～59 歲組，感染率分別為27.17%，25.54%，23.36%，22.31%，22.00%，感染率隨年齡的增長總體呈下降趨勢(shì)。其中30 歲以下的女性總感染率最高，而且該組的單一型別、二重型別和三重及以上型別感染率也最高。這一現(xiàn)象可能的原因是年輕女性更易從事無保護(hù)措施的性行為，而且頻率更高，再加上自身發(fā)育尚未完全成熟，更容易受到感染。據(jù)報(bào)道，年輕女性感染HPV 是暫時(shí)的，在大多數(shù)情況下，免疫系統(tǒng)會(huì)清除病毒[19]，因此，隨著年齡的增長，HPV 的感染率會(huì)逐漸下降。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著年齡的增長HPV 的感染率逐漸下降，而在大于60 歲組中HPV 感染率略有上升（22.31%），但未出現(xiàn)常見的第二個(gè)高峰。對(duì)于60 歲以上的婦女，HPV 的感染可能發(fā)生在年輕時(shí)，而當(dāng)前存在的感染可能是持續(xù)性感染。如果免疫系統(tǒng)不能消除HPV 并持續(xù)存在數(shù)年，這將是腫瘤發(fā)展的一個(gè)危險(xiǎn)因素。本研究還提供了單一、二重和三重及以上HPV 感染率的年齡分布。單一型感染率＜30 歲組最高，隨著年齡增長而下降。二重型別的HPV感染率以30～39 歲組最高，三重及以上型別的HPV感染率以＜30 歲組最高，且都隨著年齡增長而下降，但在大于60 歲組又都有回升。回升的原因可能是該年齡段女性處于絕經(jīng)期，免疫功能紊亂，機(jī)體抵抗能力下降所致。有研究顯示多重HPV 感染比單一型HPV 感染發(fā)展為子宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)更高[20]。本研究中，單一型HPV 感染率高于二重和三重及以上HPV 的感染率，為17.46%，二重HPV 和三重及以上HPV 感染率分別為的4.78%和2.32%。研究人乳頭狀瘤病毒的雙重和多重感染對(duì)研究人乳頭狀瘤病毒的流行具有重要意義，對(duì)開發(fā)多價(jià)HPV 疫苗也具有重要意義。

綜上所述，寧波地區(qū)女性HPV 感染率為24.56%，總體偏高，感染類型以單一型，高危型感染為主，最常見的高危亞型前5 位是HPV52、58、16、51 和53 型。隨著年齡的增長感染率呈下降趨勢(shì)，其中小于40 歲的女性具有較高的感染率，應(yīng)特別關(guān)注該群體。本研究提供的HPV 感染情況和亞型分布特征的大規(guī)模數(shù)據(jù)可為本地區(qū)HPV 預(yù)防疫苗的研發(fā)和子宮頸癌的防治提供數(shù)據(jù)支持。