亞輝龍iFlash3000C全自動化學發光免疫分析儀檢測甲狀腺功能激素五項的性能評價

劉景彬, 黃偉麗, 陳麗英

（云浮市婦幼保健院檢驗科, 廣東 云浮 527300）

0 引言

甲狀腺相關激素檢查臨床上主要用于甲狀腺功能相關疾病的診療, 但隨著對其深入研究發現, 甲狀腺相關激素異常與人體多個系統疾病存在一定相關性, 因此, 甲狀腺相關激素檢查廣泛應用于臨床。檢測甲狀腺相關激素的方法有很多種, 目前最常用的方法是化學發光免疫分析法。為了滿足臨床需要, 本科新購置了一臺亞輝龍iFlash3000C全自動化學發光儀, 根據ISO15189 CNAS-CL02：2012《醫學實驗室質基和能力認可準則》, 對新購置的儀器實驗室必須對其方法學分析性能予以驗證, 并對廠家提供的主要性能評價數據予以確認[1]。因此, 本研究參照美國臨床和實驗室標準化協會文件（CLSI）、ISO15189《醫學實驗室質量和能力的專用要求》及ISO17025相關文件[2-4], 并以東曹AIA2000全自動化學發光免疫分析儀為參照, 對iFlash3000C全自動化學發光免疫分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH的正確度、精密度、攜帶污染率、靈敏度及與參照分析儀檢測結果的相關性等性能進行了評價, 現報導如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

相關性評價標本來源于醫院體檢科健康體檢人員的標本, 其它評價標本均來源于各分析儀的參考品及質控品。

1.2 儀器與試劑

iFlash3000C全自動化學發光免疫分析儀、試劑、參考品及質控品（深圳亞輝龍生物科技）；東曹AIA2000全自動化學發光免疫分析儀、試劑、參考品及質控品（日本東曹）。

1.3 方法

分析前做好儀器維護及校準, 分析期間做好室內質控, 所有操作均嚴格按照儀器和試劑說明書及科室SOP操作規程進行。

1.3.1 正確度評價實驗

采用iFlash3000A分析儀分別測定儀器配套的高、低正確度參考品各1份, 每份測定2次, 分別計算均值（）及相對偏倚（Bias%）。計算公式：（Bias%）=（-靶值）/靶值×100%。

1.3.2 精密度評價實驗

參考CLSIEP5-A2文件, 批內精密度：對高、低兩個濃度水平的同一質控品同一時間內連續測定20次。批間精密度：高、低兩個濃度水平的同一質控品, 每天測定一次, 連續測20天。分別計算各濃度水平的、標準差（S）及變異系數（CV）。

1.3.3 攜帶污染率評價實驗

取1份高濃度標本連續測定3次（H1, H2, H3）, 再取1份低濃度標本連續測定 3次（L1, L2, L3）。計算公式：攜帶污染率（%）=（L1-L3）/（H3-L3）×100 。

1.3.4 靈敏度評價

實驗分別取T3, T4, FT3, FT4及TSH試劑盒中空白液連續測定5次, 計算和S, 并以2S作為相應檢測項目的靈敏度。

1.3.5 相關性評價實驗

采用iFlash3000C分析儀與東曹AIA2000全自動化學發光免疫分析儀對20份臨床標本進行T3、T4、FT3、FT4及TSH水平對比檢測, 評估兩臺儀器檢測結果的一致性。

1.4 統計學處理

采用SPSS 23.0統計軟件對檢測結果進行統計分析。

2 結果

2.1 精密度評價結果

iFlash3000C分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH批內和批間精密度CV%值分別為1.86%～5.37%和2.05%～7.01%, 均小于廠家給定的允許范圍（≤8.0%）, 結果見表1、2。

表1 批內精密度CV（%）評價結果（n=20）

2.2 正確度評價結果

iFlash3000C分析儀測定T3、T4、FT3、FT4及TSH的相對偏倚（Bias%）在-7.58%～7.63%之間, 均小于廠家允許要求范圍（≤10.0%）, 結果見表3。

表3 iFlash3000C分析儀測定T3、T4、FT3、FT4及TSH相對偏倚（Bias%）結果

2.3 攜帶污染率評價結果

iFlash3000C分析儀測定T3、T4、FT3、FT4及TS H攜帶污染率均低于廠家要求（≤1.0%）, 結果見表4。

表4 iFlash3000C分析儀測定T3、T4、FT3、FT4及TSH攜帶污染率（%）評價結果

2.4 靈敏度評價結果

iFlash3000C分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH指標的靈敏度分別為0.16nmol/L、0.25nmol/L、0.19pmol/L、0.23pmol/L及0.11mIU/L, 與廠家提供的基本一致。

2.5 相關性

iFlash3000C分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH的結果與東曹AIA2000分析儀檢測結果具有良好的相關性, 相關系數（r）分別為0.9265、0.9547、0.9354、0.9402及0.9023, 符合臨床質量要求。

表2 批間精密度CV（%）評價結果（n=20）

3 討論

甲狀腺是人體內主要分泌T3、T4等甲狀腺功能相關激素的一個重要內分泌器官, 當甲狀腺分泌的激素紊亂, 導致甲狀腺功能亢進或甲狀腺功能減退, 進而影響人體內多個系統功能異常。若甲狀腺出現實質性病變時, 會導致甲狀腺囊腫、甲狀腺結節, 嚴重者會引發甲狀腺癌[5-7], 同時有研究表明, 人體多個系統器官發生實質性病變也會引起甲狀腺激素水平異常表達。因此, 檢測甲狀腺功能相關激素對甲狀腺功能及其相關性疾病的診療工作具有一定的必要性和重要性。

為臨床疾病診療提供科學、準確及可靠的檢測結果是實驗室最核心和基本的要求, 而準確可靠的檢驗結果有賴于分析儀的檢測性能, 檢測系統及儀器性能評價是保障臨床檢驗質量的重要措施[8-9]。目前化學發光免疫分析法是檢測甲狀腺功能相關激素最常用的方法, 其中亞輝龍iFlash3000C全自動化學發光儀是我國自主研發的一款運用先進的化學發光檢測技術, 具有檢測快速、準確、自動化高及檢測項目覆蓋范圍廣（如貧血、骨標志物、腫瘤、甲狀腺、心肌標志物、激素及傳染病）等多種特點, 廣泛應用于臨床多種疾病的診療[10-12]。但不同實驗室因工作人員操作習慣、中介水質、室內溫度及濕度等條件存在很大差異, 進而影響其各項檢測性能的穩定性[13-14]。因此, 每個實驗室必須根據自身的檢測系統和實驗室內環境對新購置的儀器進行檢測各項性能學評價和驗證, 只有待儀器驗證通過后才能用于臨床檢測, 且在日后使用過程中還要按一定周期進行再次驗證。

精密度是反映同一標本同一時間內檢測多次結果之間的一致性和重現性, 其性能評價是檢測系統和儀器性能學評價中最基本的一項性能指標。本評價結果顯示, 亞輝龍iFlash3000C檢測高低值T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的批內和批間精密度CV%值分別為1.86%～5.37%和2.05%～7.01%, 均小于廠家要求（≤8.0%）, 說明該分析儀在本實驗室檢測環境內檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的重復性好, 符合質量要求。

正確度是反映在一定條件下通過對定值的參考品、質控品或校準品進行多次測定的均值與靶值之間的吻合程度, 計算其相對偏倚（Bias%）, 若Bias%在廠家規定范圍內則可認為正確度評價可接受。按照NCCLS EP15-A[6]文件和 ISO15189文件中對正確度的評價要求, 可通過比對定值的校正品來對系統的正確度進行驗證。本評價結果顯示, 亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測高低值T3、T4、FT3、FT4及TSH水平均值與靶值的Bias%在-7.58%～7.63%之間, 均小于廠家要求（≤10.0%）, 同時亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測結果與參加衛健委會臨床檢驗中心能力比對的東曹AIA2000分析儀的結果具有良好的相關性（r＞0.900）, 表明該分析儀正確度良好, 性能驗證符合臨床室驗室質量要求。

攜帶污染是評價檢測結果可能受到該標本之前或之后標本的攜帶交叉污染影響, 確保檢驗結果的真實性和準確性, 而靈敏度是評價分析儀檢測待測物最低水平的能力, 對疾病早期診斷具有重要的意義, 避免漏診。本評價結果顯示, 亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的攜帶污染率極低（均＜1.0%）, 符合儀器廠家要求, 這可能與加樣和測試過程均采用一次性吸頭和反應杯有關。同時亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的靈敏度極高, 與廠家提供的基本一致, 表明該分析儀具有很強的檢測能力。

綜上所述, 亞輝龍iFlash3000C分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的正確度、精密度、攜帶污染、靈敏度及結果比對的相關性等方法學性能評價指標符合實驗室質量要求, 能為臨床上甲狀腺功能及相關疾病的診療工作提供準確、可靠的檢測結果, 滿足臨床要求。