荔枝P型ATP酶基因家族鑒定及其在采后貯藏過程中響應(yīng)拮抗菌N-1的表達(dá)模式分析

王 鑫，邵遠(yuǎn)志，湯 月，李 雯*

荔枝P型ATP酶基因家族鑒定及其在采后貯藏過程中響應(yīng)拮抗菌N-1的表達(dá)模式分析

王 鑫1，邵遠(yuǎn)志2，湯 月2，李 雯1*

1. 海南大學(xué)園藝學(xué)院海南省熱帶園藝作物品質(zhì)調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南海口 570228；2. 海南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，海南海口 570228

P型ATP酶是植物體內(nèi)一種重要的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在果實(shí)能量代謝和酸代謝中發(fā)揮重要作用，并廣泛參與植物離子運(yùn)輸、抗逆、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等各項(xiàng)生命活動，然而在荔枝或其他無患子科植物中尚未對P型ATP酶基因家族進(jìn)行全面分析，本研究基于‘妃子笑’荔枝轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，通過對這些基因進(jìn)行生理生化分析、生物信息學(xué)分析和表達(dá)分析，共鑒定了28個(gè)P型ATP酶基因家族成員基因，探討P型ATP酶在荔枝采后貯藏過程中的潛在功能。結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)發(fā)育分析表明該基因可以分為5個(gè)亞家族，同一亞族的基因在基因結(jié)構(gòu)和motif基序方面具有很大的相似性，其蛋白二級結(jié)構(gòu)主要以α-螺旋為主，亞細(xì)胞定位預(yù)測分析發(fā)現(xiàn)LcPAs多定位于線粒體（21/28）。通過轉(zhuǎn)錄組分析，在采后貯藏期間，荔枝P型ATP酶家族基因中上調(diào)表達(dá)的基因明顯高于下調(diào)表達(dá)基因，暗示其可能在荔枝采后品質(zhì)劣變過程中發(fā)揮著積極的抵御作用。使用拮抗菌N-1處理荔枝可以有效抑制其果實(shí)采后褐變和病害的發(fā)生，結(jié)合RT-qPCR結(jié)果，發(fā)現(xiàn)拮抗菌N-1處理能誘導(dǎo)和在整個(gè)貯藏過程中的上調(diào)表達(dá)，并維持了較高的ATP酶活性，進(jìn)一步說明P型ATP酶家族基因在抑制荔枝病變過程中發(fā)揮著重要作用。本研究為了解荔枝P型ATP酶基因家族基因的進(jìn)化和功能分析提供了參考，為深入了解拮抗菌N-1保鮮機(jī)理的分子調(diào)控機(jī)理提供新的證據(jù)。

荔枝；P型ATP酶基因家族；轉(zhuǎn)錄組；拮抗菌N-1

P型ATP酶是在植物整個(gè)生命過程中都發(fā)揮重要作用的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，參與廣泛的細(xì)胞基本代謝過程。迄今為止，在闡明P型ATP酶的結(jié)構(gòu)、功能和調(diào)控特性方面都取得了極大的進(jìn)展。植物P型ATP酶在結(jié)構(gòu)上有一個(gè)亞基，8～12個(gè)跨膜（TM）片段，N端和C端暴露于細(xì)胞質(zhì)，以及一個(gè)大型的中央細(xì)胞質(zhì)的結(jié)構(gòu)域，其上包含磷酸化和ATP結(jié)合位點(diǎn)，P型ATP酶最重要的一個(gè)特征是形成一個(gè)磷酸化的中間產(chǎn)物，因此被命名為P型，P型泵的復(fù)雜性也反映了P型ATP酶的多樣性和這些轉(zhuǎn)運(yùn)體具有離子特異性[1]。目前已經(jīng)從擬南芥全基因組序列中鑒定出45個(gè)編碼P型ATP酶的基因[2]，從向日葵基因組中鑒定出13個(gè)P型H+-ATP酶基因家族成員[3]，從陸地棉中鑒定出98個(gè)P型ATP酶家族基因[4]，從大豆基因組中鑒定了105個(gè)P型ATP酶基因[5]，從水稻中鑒定出43個(gè)P型ATP酶基因家族成員等，通過蛋白序列和系統(tǒng)發(fā)育比較，一個(gè)共同的被子植物祖先擁有至少23個(gè)P型ATP酶基因家族成員的集合[6]，說明它普遍存在于各種生物中，并廣泛參與植物離子運(yùn)輸、抗逆性、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等各項(xiàng)生命活動。近年來大量研究表明P型ATP酶和植物的酸代謝密切相關(guān)，從矮牽牛的遺傳分析中發(fā)現(xiàn)2種P型ATP酶PH1和PH5，這2種酶通過改變花瓣細(xì)胞液泡酸度從而改變花的顏色[7]，通過進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，這2個(gè)基因在柑橘類水果的酸調(diào)控中發(fā)揮重要作用[8]。此外，P型ATP酶還參與細(xì)胞內(nèi)PH穩(wěn)態(tài)的調(diào)控，為植物多胺（plant polyamines）PA前體向液泡運(yùn)輸提供動力[9]，并在大豆鹽、干旱、寒冷、磷酸鹽饑餓等脅迫下被顯著誘導(dǎo)或抑制[5]，在水稻和擬南芥的非生物脅迫中發(fā)揮重要作用[10]。

生防治作為一種安全健康的應(yīng)對果蔬保鮮問題的新途徑，是最有希望替代傳統(tǒng)化學(xué)保鮮劑的一種保鮮方法，其中拮抗菌生物防治具有安全、綠色和環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)，成為荔枝采后保鮮技術(shù)研究的熱點(diǎn)[11-12]。然而拮抗菌作為保鮮劑的作用機(jī)理十分復(fù)雜，目前可以確定的是果實(shí)能量代謝在其中起到了十分重要的作用。提高果實(shí)的能荷水平可以減緩桃[13]、梨[14]和枇杷[15]等果實(shí)病害的發(fā)生，陳夢茵[16]研究發(fā)現(xiàn)外源ATP處理能提高Ca2+-ATPase和H+-ATPase酶活性，維持果實(shí)較高的ATP含量，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，維持細(xì)胞的抗氧化系統(tǒng)，使龍眼果實(shí)免受病菌帶來的傷害。因此，研究P型ATP酶基因家族，篩選出該家族中可能響應(yīng)拮抗菌作用信號的關(guān)鍵基因，可能有助于探明拮抗菌保鮮劑的作用機(jī)理，提高采后荔枝的果實(shí)品質(zhì)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試?yán)笾ζ贩N為‘妃子笑’，采摘于海南省澄邁縣荔枝種植園。剔除病果、機(jī)械損傷果，留0.5 cm左右果柄、大小均一的荔枝果實(shí)為材料。將挑選后的荔枝均勻分為2組，一組于108CFU/mL拮抗菌N-1懸液中浸泡20 min，另一組用清水浸泡相同時(shí)間用作對照，隨后晾干。每30個(gè)果實(shí)裝一框，用80 cm×120 cm的保鮮膜輕裹，放置于25℃的智能人工氣候（RH：85%～90%）中貯藏，每2 d取樣一次。取30個(gè)果實(shí)用于觀察，并測定好果率和荔枝果皮的ATP酶活性[16]，果皮使用液氮研磨，并使用天根RNA提取試劑盒（多糖多酚植物總RNA提取試劑盒DP441）提取荔枝果實(shí)總RNA，使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（MonScriptTM RTIII All-in-One Mix With dsDNase）將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA保存?zhèn)溆谩?/p>

暹羅拮抗菌N-1從自然感病的熱帶水果中分離，隨后保存在–80℃環(huán)境中，該拮抗菌在之前的實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)得到鑒定[17]。在使用之前，N-1拮抗菌在28℃條件下于PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)2 d，隨后轉(zhuǎn)移到NA培養(yǎng)基中培養(yǎng)36 h，最后稀釋拮抗菌懸浮液濃度為108CFU/mL，備用。

1.2 方法

1.2.1 荔枝P型ATP酶家族基因的收集與鑒定 利用Pfam數(shù)據(jù)庫（http://pfam.xfam.org/）獲取P型ATP酶家族基因的結(jié)構(gòu)域（PF00690、PF00122、PF13246）的比對文件構(gòu)建隱馬爾可夫模型（HMM）文件。然后，利用TB-tools軟件對荔枝蛋白數(shù)據(jù)庫進(jìn)行HMM搜索。此外，所有P型ATP酶蛋白序列均通過SMART（http://smart.emblhe- idelberg.de/）和NCBI（http://www.ncbi.nlm.n-ih. gov/cdd/）手動篩選結(jié)構(gòu)域，并去除缺乏P型ATP酶結(jié)構(gòu)域的蛋白序列[18]。

1.2.2 系統(tǒng)進(jìn)化樹分析 利用MEGA-X軟件對荔枝、蘋果、獼猴桃、擬南芥、巴旦木、辣椒和蒺藜苜蓿共7個(gè)不同種屬物種的P型ATP酶基因家族全長蛋白序列進(jìn)行比對，對比結(jié)果在Jalview軟件中進(jìn)行美化分析，再使用MEGA-X軟件繪制進(jìn)化樹，并通過FigTree軟件進(jìn)行美化[19]。

1.2.3 保守基序和理化性質(zhì)分析 利用MEME （http://memesuite.org/t-ools/-meme）網(wǎng)站對荔枝P型ATP酶家族基因進(jìn)行motif分析，共設(shè)置15個(gè)motif，其他參數(shù)為默認(rèn)設(shè)置，隨后利用ExPAsy（http://web.expasy.org/com-pute_pi/）在線軟件預(yù)測P型ATP酶基因家族成員蛋白理化性質(zhì)信息，包括氨基酸數(shù)、分子量、等電點(diǎn)、總平均疏水指數(shù)；通過Plant-mPLoc（http://www.csbio.sjtu.edu. cn/bioinf/-plant-multi/）在線軟件預(yù)測該基因家族蛋白的亞細(xì)胞定位，并利用GOV IV（http://npsa prabi.-ibcp.fr）在線軟件預(yù)測蛋白二級結(jié)構(gòu)[20]。

1.2.4 基于轉(zhuǎn)錄組的荔枝P型ATP酶家族基因表達(dá)分析 使用荔枝轉(zhuǎn)錄組（FPKM）值表示在各P型ATP酶家族基因的表達(dá)量，并用TBtools軟件繪制熱圖和維恩圖顯示該家族基因在荔枝貯藏過程中的表達(dá)水平。其中熱圖依據(jù)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)FPKM值作圖，以分析荔枝貯藏前期（0、2d）和后期（6、8d）基因表達(dá)差異；維恩圖中差異基因篩選均以0 d為作為參照，以轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)-value和log2(FC)值為依據(jù)篩選差異基因。

1.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析 根據(jù)荔枝P型ATP酶家族基因的ORF序列，在網(wǎng)站（https:// primer3.ut.ee/）上設(shè)計(jì)引物序列，并在DNAMAN軟件上驗(yàn)證引物的可靠性，設(shè)計(jì)好的引物交由中美泰和生物技術(shù)有限公司合成。使用Mona公司試劑盒（MonAmpTM ChemoHS qPCR Mix）進(jìn)行RT-qPCR擴(kuò)增，荔枝P型ATP酶家族基因的相對表達(dá)水平采用2–DDCT法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化分析[21]，并用GraphPad Prism 8軟件構(gòu)建基因表達(dá)柱狀圖。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SAS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 對荔枝P型ATP酶基因家族的鑒定

通過對荔枝轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行篩選，并結(jié)合在線工具SMART（http://smart.emb-lheidelberg.de/）和NCBI（http://www.ncb-i.nlm.nih.gov/cdd/）的結(jié)構(gòu)域分析，共鑒定出28個(gè)P型ATP酶基因家族成員，并對所有的家族成員進(jìn)行系統(tǒng)編號，將其命名為～。

荔枝28個(gè)P型ATP酶基因家族成員的氨基酸長度范圍在203（LcPA28）～1061（LcPA25）之間不等，相對分子質(zhì)量范圍為50 926.22～ 259 788.49 Da，等電點(diǎn)范圍為4.75～5.14，所有蛋白均為疏水性蛋白，脂肪系數(shù)范圍為17.29～ 29.66，α-螺旋占比最大。亞細(xì)胞定位預(yù)測發(fā)現(xiàn)荔枝大多數(shù)P型ATP酶家族基因定位于線粒體（21/28），其次定位于細(xì)胞膜（5/28）、葉綠體（LcPA15）和細(xì)胞質(zhì)（LcPA22）中（表1）。

2.2 系統(tǒng)進(jìn)化樹分析

通過聚類分析，將荔枝中28個(gè)LcPA蛋白分成5個(gè)亞組，Group Ⅱ、Group Ⅲ和Group Ⅴ均有3個(gè)成員，分別為、和，、和，、和，Group Ⅳ僅有1個(gè)成員，其余18個(gè)成員均屬于Group I（圖1）。

2.3 荔枝P型ATP酶基因家族結(jié)構(gòu)分析

利用MEME分析了荔枝P型ATP酶基因家族蛋白序列的15個(gè)保守motifs（圖2），這些基序的氨基酸組成如表2所示。本研究發(fā)現(xiàn)，所有LcPA蛋白均含有motif 2，表明其在荔枝P型ATP酶基因家族中高度保守，此外，高度保守的motif 4同樣存在于除外的所有LcPA蛋白中。在所有15個(gè)motif基序中，值從高到低排在前6的依次是motif 1、motif 4、motif 5、motif 7、motif 6、motif 2，均位于N末端結(jié)構(gòu)域。

表1 荔枝P型ATP酶基因家族成員信息

圖1 P型ATP酶基因家族系統(tǒng)進(jìn)化樹分析

2.4 荔枝P型ATP酶家族基因采后貯藏過程中的表達(dá)分析

根據(jù)荔枝P型ATP酶家族基因在荔枝采后貯藏過程中的表達(dá)水平繪制成熱圖（圖3A）和維恩圖（圖3B）。結(jié)果表明，在整個(gè)貯藏過程中出現(xiàn)明顯上調(diào)或下調(diào)表達(dá)的基因占到64.3%，且貯藏后期差異表達(dá)的基因數(shù)量明顯高于前期，上調(diào)表達(dá)基因的數(shù)量顯著高于下調(diào)表達(dá)基因。上調(diào)表達(dá)基因的大量富集暗示著該基因家族基因可能在‘妃子笑’荔枝品質(zhì)劣變過程中起到積極的抵御作用。

圖2 荔枝P型ATP酶基因家族motif分布

表2 荔枝P型ATP酶基因家族結(jié)構(gòu)域序列標(biāo)識

圖3 荔枝P型ATP酶基因家族的表達(dá)分析

2.5 拮抗菌N-1處理下果實(shí)外觀，好果率和ATP酶活性變化

隨著貯藏時(shí)間的增加，果實(shí)的好果率呈現(xiàn)明顯的下降趨勢，但在整個(gè)貯藏過程中，拮抗菌處理后的荔枝果實(shí)的好果率始終高于對照果實(shí)（圖4A，圖4B），從圖4A中可以看出，處理組荔枝果實(shí)的外觀，褐變及病變情況均好于對照組，說明拮抗菌N-1處理可以有效的抑制荔枝果實(shí)的褐變和病變。結(jié)合圖4C可知，拮抗菌處理的荔枝果實(shí)ATP酶活性在整個(gè)貯藏過程中顯著高于對照果實(shí)，說明拮抗菌可能通過提高ATP酶活性維持荔枝的高能荷狀態(tài)，增強(qiáng)荔枝的抗病性，減少荔枝營養(yǎng)物質(zhì)的損失，最終達(dá)到延緩荔枝果實(shí)衰老腐敗的目的。

2.6 部分LcPA家族基因在拮抗菌N-1處理下的表達(dá)

從LcPA基因家族在采后貯藏過程中的表達(dá)分析中初步篩選出在‘妃子笑’荔枝貯藏過程中可能起到關(guān)鍵作用的家族基因，并對這些基因在拮抗菌N-1處理后的表達(dá)情況進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析（圖5）。結(jié)果表明，拮抗菌N-1顯著誘導(dǎo)了基因和在整個(gè)貯藏過程中的上調(diào)表達(dá)，誘導(dǎo)基因、在荔枝貯藏第2天上調(diào)表達(dá)，并誘導(dǎo)基因、和在貯藏后期的上調(diào)表達(dá)，總體而言，拮抗菌N-1處理能誘導(dǎo)荔枝P型ATP酶基因家族基因的上調(diào)表達(dá)，這與ATP酶活性的變化一致。以上結(jié)果說明，荔枝LcPA家族基因在拮抗菌N-1抑制荔枝病變的過程中發(fā)揮著積極的作用，且響應(yīng)外源刺激信號的時(shí)期和作用也有所不同。

圖4 拮抗菌N-1處理下果實(shí)好果率和ATP酶活性變化

圖5 荔枝P型ATP酶基因家族成員在拮抗菌處理下的表達(dá)

3 討論

3.1 荔枝P型ATP酶家族基因的鑒定與結(jié)構(gòu)分析

采后果實(shí)是一個(gè)鮮活的有機(jī)體，時(shí)刻進(jìn)行著各種代謝活動，P型ATP酶基因家族在果實(shí)的能量代謝、酸代謝、脅迫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、逆境響應(yīng)等過程中發(fā)揮著重要的作用，目前已在蘋果[22]、柑橘[23-24]和梨[25]等多個(gè)物種中得到鑒定和研究。在本研究中，基于‘妃子笑’荔枝的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，共鑒定出28個(gè)荔枝P型ATP酶家族家族基因，并劃分為5個(gè)亞族，說明該家族在進(jìn)化上可能存在5個(gè)分支，這在擬南芥P型ATP酶基因家族的鑒定上也得到了驗(yàn)證[1]，這28個(gè)家族基因?qū)?yīng)蛋白的等電點(diǎn)、總平均疏水指數(shù)、α-螺旋和脂肪系數(shù)在荔枝中高度一致，表明該家族成員在進(jìn)化上比較保守，在motif的分布模式中，值高的motif基序基本分布于N-末端結(jié)構(gòu)域，說明N-末端結(jié)構(gòu)域比C-末端結(jié)構(gòu)域更加保守。荔枝P型ATP酶基因家族的亞細(xì)胞定位預(yù)測大多位于線粒體，而線粒體能夠參與植物細(xì)胞內(nèi)的諸多過程，如呼吸作用、產(chǎn)熱、抗逆機(jī)制、程序性細(xì)胞死亡和基因組進(jìn)化等[26]，另外還有少量基因定位于葉綠體、細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中，說明該基因家族不僅在能量代謝過程中發(fā)揮重要作用，還在植物的各種生理活動中發(fā)揮作用，也說明了該基因家族功能的多樣性。

3.2 P型ATP酶家族基因在采后荔枝貯藏保鮮過程中發(fā)揮重要作用

ATP酶作為能量代謝的關(guān)鍵酶，貫穿于細(xì)胞的整個(gè)生命過程。采后果實(shí)由于脫離了母體，切斷了能量供應(yīng)，其貯藏的能量又被不斷消耗，已有諸多研究證實(shí)，果實(shí)的能量虧損越嚴(yán)重，品質(zhì)劣變程度越嚴(yán)重，其衰老和死亡的速度和進(jìn)程越快[27]。高兆銀等[28]研究發(fā)現(xiàn)外源ATP處理可提高荔枝貯藏前期ATP合成酶基因表達(dá)量，保持荔枝果實(shí)的能量供應(yīng)，顯著延緩荔枝果實(shí)的成熟衰老，這與本研究中拮抗菌處理誘導(dǎo)基因、和在荔枝貯藏第2天上調(diào)表達(dá)的結(jié)果相似，說明這些基因可能是最先響應(yīng)拮抗菌處理觸發(fā)的信號。基因和則在整個(gè)貯藏過程中均被拮抗菌顯著誘導(dǎo)高表達(dá)，這些基因均定位于線粒體，研究表明，線粒體ATP合成酶是細(xì)胞功能的關(guān)鍵樞紐，控制著ATP的產(chǎn)生和細(xì)胞信號傳導(dǎo)，它受ATP酶抑制因子1（IF1）的調(diào)節(jié)，從而控制線粒體功能和線粒體活性氧的產(chǎn)生[29]，這在生理水平上也得到了驗(yàn)證，解偶連劑DNP可加劇活性氧的積累，降低能荷水平從而加速草莓衰老[30]。在拮抗菌的誘導(dǎo)下，荔枝線粒體ATP酶基因上調(diào)表達(dá)，荔枝ATP酶活性升高，其保護(hù)機(jī)制可能也是通過抑制線粒體活性氧的產(chǎn)生，進(jìn)而保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，最終抑制了荔枝果實(shí)品質(zhì)劣變，而基因基因和可能是維持荔枝高能荷狀態(tài)、抑制荔枝果實(shí)品質(zhì)劣變的關(guān)鍵基因。ATP除了作為能量貨幣的功能外，還起著胞外信號分子的作用，當(dāng)果實(shí)ATP含量過低時(shí)，會產(chǎn)生反饋調(diào)節(jié)[31]，基因、和在荔枝貯藏后期的上調(diào)表達(dá)說明其可能是ATP反饋調(diào)節(jié)的響應(yīng)基因。本研究表明以上幾個(gè)基因在荔枝采后貯藏保鮮過程中發(fā)揮著重要作用，可作為后續(xù)的研究重點(diǎn)，進(jìn)行基因功能的驗(yàn)證。

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Identification of P-type ATPase Gene Family and Analysis of Expression Pattern in Response to Antagonistic N-1 During Postharvest Storage in Litchi

WANG Xin1, SHAO Yuanzhi2, TANG Yue2, LI Wen1*

1. Key Laboratory for Quality Regulation of Tropical Horticultural Crops of Hainan Province, School of Horticulture, Hainan University, Haikou, Hainan 570228, China; 2. School of Life Sciences, Hainan University, Haikou, Hainan 570228, China

P-type ATPase is an important membrane transporter in plants. It plays a significant role in plant energy metabolism and acid metabolism. In addition, the enzyme is widely involved in plant ion transport, stress resistance, cell signal transduction and other life activities. However, p-type ATPase gene family has not been comprehensively analyzed in litchi or other sapindaceae plants. In this study, based on the transcriptome data of ‘Feizixiao’ litchi, 28 p-type ATPase genes were identified through physiological and biochemical analysis, bioinformatics analysis and expression analysis, to explore the potential function of P-type ATPase during postharvest storage of litchi. The structure and phylogenetic analysis showed that the gene could be divided into 5 subfamilies, the genes in the same subfamily had similar gene structure and motifs. The secondary structure of protein was mainly consisted of α -helix, and the N-terminal domain of LcPAs was more conserved than the C-terminal domain. Subcellular localization prediction analysis showed that LcPAs were mostly located in mitochondria (21/28). According to transcriptome analysis, the up-regulated genes of P type ATPase family genes in litchi were significantly higher than the down-regulated genes during postharst storage, which suggesting that they may play a positive role in the resistance of quality deterioration of litchi after harvest. As a safe and healthy preservation technology, the mechanism of antagonistic biological control is very complex. Results showed that the antagonistic N-1 treatment could effectively inhibit the browning and disease occurrence of litchi fruits after harvest. Combined with RT-qPCR results, it was found that antagonistic N-1 treatment could induce up-regulated expression of,,andduring the whole storage process, which further indicating that P-type ATPase family genes would play an important role in the antagonistic N-1 inhibition of litchi lesions. This study would provide a reference for understanding the evolution and biological function analysis of p-type ATPase gene family in litchi, it also provide new evidence for further understanding the molecular regulation mechanism of antagonistic N-1 preservation mechanism.

litchi; p-type ATPase gene family; transcriptome; antagonist N-1

S667.1

A

10.3969/j.issn.1000-2561.2022.11.021

2022-02-25；

2022-04-04

海南省自然科學(xué)基金創(chuàng)新研究團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（No. 320CXTD430）；海南省研究生創(chuàng)新科研課題（No. Qhys2021-244）。

王 鑫（1994—），男，碩士研究生，研究方向：荔枝采后貯藏保鮮。*通信作者(Corresponding author)：李 雯（LI Wen），E-mail：liwen9-210@163.com。