甲狀腺乳頭狀癌術后血清缺氧誘導因子2α和可溶性白介素-2受體的表達與預后的關系研究

魏 坦

惠州仲愷高新區人民醫院，廣東 惠州 516000

甲狀腺是人體最大的內分泌腺體，也是身體代謝的主 要調控器官。甲狀腺癌是臨床常見的甲狀腺惡性腫瘤，占全身惡性腫瘤的1%，其發病率與地區、種族、性別有關，其中女性發病率較高［1］。甲狀腺癌分型復雜，且不同分型甲狀腺癌病理發展規律不同，部分臨床癥狀較為隱匿，且生長緩慢，已引起學者的廣泛關注［2］。國家癌癥中心研究［3］表明，近年來，我國甲狀腺癌發病率呈上升趨勢，且乳頭狀腺癌在甲狀腺癌發病率的構成比重逐年升高。甲狀腺乳頭狀癌病情進展緩慢，外科手術治療的預后尚可。甲狀腺乳頭狀癌術后的復發和轉移是導致患者死亡的主要原因。有研究［4］發現，缺氧誘導因子2α（HIF-2α）在腫瘤細胞中發揮著重要作用，其表達水平與患者的預后密切相關。慢性炎癥反應參與惡性腫瘤的發生發展過程，其中可溶性白介素-2受體（SIL-2R）是白細胞介素家族較重要的細胞因子，其與肺癌、喉癌、消化系統腫瘤等多種惡性腫瘤有關［5］。本研究旨在探討甲狀腺乳頭狀癌術后血清HIF-2α、SIL-2R的表達與預后的關系，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取惠州仲愷高新區人民醫院2018年1月―2020年10月收治的60例甲狀腺乳頭狀癌患者及60例術后病理證實的良性甲狀腺結節患者作為研究對象，分別為乳頭狀癌組和良性組。其中乳頭狀癌組男20例，女40例；年齡30～55歲，平均年齡（45.22±4.12）歲；身體質量指數（BMI）16～26 kg/m2，平均BMI（22.35±2.25）kg/m2；病程1個月～4年，平均病程（1.93±0.35）年。良性組男22例，女38例；年齡31～55歲，平均年齡（45.34±4.10）歲；BMI 17～25 kg/m2，平均BMI（22.22±2.20）kg/m2；病程1個月～4年，平均病程（2.01±0.30）年。兩組患者一般資料具有可比性（P＞0.05）。本研究經醫院醫學倫理委員會批準通過。納入標準：（1）符合中華醫學會內分泌學分會制定的《甲狀腺結節和分化型甲狀腺癌診治指南》［6］中關于甲狀腺乳頭狀癌和良性甲狀腺結節診斷標準。（2）臨床資料齊全。（3）外科手術治療適應證。（4）患者及家屬均知情同意本項研究等。排除標準：（1）妊娠期、哺乳期女性。（2）合并其他原發腫瘤。（3）全身感染性疾病。（4）嚴重凝血功能障礙。（5）既往有頸部手術史。（6）入組前甲狀腺乳頭狀癌患者接受過放化療。（7）甲狀腺乳頭狀癌已出現遠端轉移。（8）酒精及藥物濫用史。

1.2 方法

1.2.1 收集臨床資料 收集甲狀腺乳頭狀癌患者的吸煙史、飲酒史、臨床分期、分化程度、隨訪復發等一般資料。患者出院后，每3個月采用門診復查、電話訪問等多種方式的隨訪，隨訪時間1年，隨訪日期截至2021年10月，隨訪率為100%。

1.2.2 血清HIF-2α水平測定 以磷酸鹽緩沖溶液（PBS）作空白對照，切片脫蠟，滅活內源性過氧化物，PBS沖洗，加入HIF-2α一抗，4℃過夜，第2天PBS沖洗，蘇木素復染，碳酸鋰返藍，二甲苯透明，樹膠封片。結果判讀：深黃色3分，棕黃色2分，淡黃色1分，無色0分，細胞陽性率在50%以上為3分，25%～50%為2分，5%～25%為1分，5%以下為0分。兩項得分相乘在3分及以上為陽性。

1.2.3 血清SIL-2R水平測定 抽取患者清晨空腹外周靜脈血5 mL，緩慢注入含乙二胺四乙酸二鈉的干燥食管，3 000 r/min離心10 min，置于低溫環境保存備用，采用全自動酶標儀（美國BIO-RAD，型號680），使用酶聯免疫吸附法檢測血清SIL-2R水平。所有標本經10%甲醇固定，HE染色及免疫組化染色，細胞核和細胞質內呈棕黃色顆粒為陽性，陽性細胞數在20%及以上為陽性，陽性細胞數在20%以下為陰性。

1.3 觀察指標

比較乳頭狀癌組和良性組患者血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性率，比較乳頭狀癌組患者血清HIF-2α和SIL-2R水平與臨床病理特征的關系及乳頭狀癌組患者預后復發情況與血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性表達的關系。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。Pearson相關系數進行相關性分析，多因素分析采用logistic回歸分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性情況

乳頭狀癌組血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性率高于良性組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性情況 例（%）

2.2 乳頭狀癌組血清HIF-2α水平與臨床病理特征的關系

乳頭狀癌分化程度低、復發患者血清HIF-2α陽性表達率高于分化程度高、無復發者，差異有統計學意義（P＜0.05），血清HIF-2α陽性表達率在其他病理特征間的比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 乳頭狀癌組血清HIF-2α水平與臨床病理特征的關系 例（%）

2.3 乳頭狀癌組血清SIL-2R水平與臨床病理特征的關系

乳頭狀癌分化程度低、復發患者血清SIL-2R陽性表達率高于分化程度高、無復發者，差異有統計學意義（P＜0.05），血清SIL-2R陽性表達率在其他病理特征間的比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 乳頭狀癌組血清SIL-2R水平與臨床病理特征的關系 例（%）

2.4 乳頭狀癌組預后復發情況與血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性表達的關系

乳頭狀癌組患者預后復發與血清HIF-2α、SIL-2R水平均呈正相關（P＜0.05），見表4。

表4 乳頭狀癌組預后復發情況與血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性表達的關系

2.5 血清HIF-2α、SIL-2R水平表達與患者病理特征的多因素分析

logistic多因素分析結果顯示，甲狀腺乳頭狀癌組織中血清HIF-2α、SIL-2R陽性表達是影響分化程度和復發情況的獨立因素（P＜0.05），見表5。

表5 血清HIF-2α、SIL-2R水平表達與患者病理特征的多因素分析

3 討論

甲狀腺癌的病因主要有缺碘、相關激素及放射線的慢性刺激、家族遺傳等，可發生在任何年齡段［7］。甲狀腺癌的早期特征不明顯，甲狀腺內可觸及的表面不平的腫塊是主要臨床表現，給臨床診治造成一定的難度，容易耽誤治療，影響預后［8］。該疾病多見于女性，且以青中年人為主，由于女性甲狀腺癌常合并其他疾病，缺乏質硬或固定等表現，導致臨床缺乏對年輕女性甲狀腺癌的重視程度，通常確診時已到中晚期［9］。近年來，甲狀腺癌的發病率不斷增高，其病理類型占比也有顯著變化，乳頭狀癌仍占最高比重，其發病率顯著升高，其他病理類型占比有所下降，相比于男性甲狀腺癌，女性甲狀腺癌發病率和惡性程度更高，預后也更差［10］。因此，分析甲狀腺癌的生物學機制，選擇合適的分子標志物，對協助患者治療和判斷預后具有重要意義。近年來，隨著分子生物學和免疫學的不斷發展，甲狀腺乳頭狀癌的研究逐漸受到臨床關注，顯現出較高的應用價值，但對于甲狀腺乳頭狀癌的分子生物學機制尚處于探索階段［11］。

缺氧誘導因子是人體普遍存在的一類轉錄因子，包括HIF-1α和HIF-2α，兩種生物學作用不同，目前，臨床關于HIF-1α的研究較多，而HIF-2α的研究相對較少［12］。缺氧是腫瘤惡性增殖過程中的普遍現象，腫瘤細胞能夠通過活化缺氧誘導因子對缺氧產生應激反應［13］。缺氧誘導因子對腫瘤細胞的增殖機制涉及細胞分化、細胞代謝等生物過程［14］。缺氧狀態改下α和β亞基在細胞核內形成活性狀態的HIF-2，其可激活血管內皮生長因子發揮作用。在甲狀腺癌的侵襲和轉移過程中，有多種分子共同參與使腫瘤增殖，進而發生遷移。SIL-2R是一種復合性黏蛋白，其能夠特異性的與IL-2結合，抑制機體的免疫反應，減弱機體的內分泌效應，抑制已活化的T細胞的克隆化擴增［15］。因此，血清HIF-2α和SIL-2R均參與了甲狀腺乳頭狀癌的發生和發展過程［16］。本研究結果顯示，與良性組比較，乳頭狀癌組血清HIF-2α、SIL-2R水平陽性率升高，提示血清HIF-2α、SIL-2R水平的表達與甲狀腺乳頭狀癌的發生密切相關。本研究結果顯示，乳頭狀癌分化程度低、復發患者血清HIF-2α陽性表達率和SIL-2R陽性表達率高于分化程度高、無復發者，初步說明了甲狀腺乳頭狀癌患者血清HIF-2α、SIL-2R水平與分化程度和復發有著密切關系。進一步Pearson相關系數分析提示，乳頭狀癌組患者預后復發與血清HIF-2α、SIL-2R水平均呈正相關，甲狀腺乳頭狀癌組織中血清HIF-2α、SIL-2R陽性表達是影響分化程度和復發情況的獨立因素，表明血清HIF-2α、SIL-2R在甲狀腺乳頭狀癌中的過度表達與分化程度和復發情況有關，術后嚴密監測血清HIF-2α、SIL-2R表達情況有利于治療方案的制定，在預后中有一定臨床價值［17］。HIF-2α可參與甲狀腺乳頭狀癌細胞的浸潤和轉移，其水平越高，提示腫瘤的惡性程度越高，這可能與腫瘤內部缺氧導致實體瘤快速生長出現的轉移有關［18］。多數患者認為SIL-2R是某種酶進入血液形成的，而不是死亡細胞釋放，機體中的SIL-2R抑制了腫瘤患者的細胞免疫反應，因此，可認為SIL-2R可作為惡性腫瘤的活性標志［19］。以往的研究［20-21］也證實，腫瘤惡性程度越高的患者預后越差，因此，血清HIF-2α、SIL-2R與甲狀腺乳頭狀癌患者的預后密切相關。但本研究存在以下不足之處：（1）未進行大樣本研究。（2）本研究所選樣本人員均經過家屬同意才可以進行，具有一定的局限性。（3）本研究所納入的研究時間間隔較短，未進行多時間段的實驗研究，故需要后續學者進行多中心、大樣本及較長的時間跨度或者多時間段的進一步深入研究。

綜上所述，血清HIF-2α、SIL-2R在甲狀腺乳頭狀癌中的過度表達與分化程度和復發情況有關，術后嚴密監測血清HIF-2α、SIL-2R表達情況有利于治療方案的制定。