復方草豆蔻合劑中干姜的薄層色譜鑒別方法的耐用性研究

林維 梁詩敏 柴莉娜

復方草豆蔻合劑是中山市博愛醫院兒科常用中藥制劑,主要由草豆蔻、干姜、小茴香、肉桂等組成。方中草豆蔻,味辛,性溫,入脾胃經,具溫中祛寒、行氣燥濕之功效,能健脾胃,助運化［1,2］。而干姜、肉桂具有溫中驅寒、以助豆蔻化濕溫中之力,為臣藥［3］；小茴香溫腎散寒、和胃理氣止痛,為佐藥［4］。薄荷素油辛香走竄,平抑前藥之溫性,而且具導引之功,為使藥［5］。各藥協同,共奏溫中驅寒、健胃驅風的功效。用于小兒或成人脾胃虛寒所致的胃脹、食欲不振、惡性嘔吐等胃腸道疾病,療效顯著,一直以來深受醫生和廣大患者的歡迎［6］。本制劑質量標準為干姜的薄層色譜鑒別,經過前期薄層色譜鑒別方法摸索,建立了方中干姜薄層鑒別方法,為驗證此方法在不同廠家的薄層板、展開劑預飽和與否、不同濕度及不同溫度的情況下對薄層色譜鑒別檢查結果產生的影響,故對上述薄層色譜鑒別方法進行耐藥性試驗。

1 材料與方法

1.1 儀器 TG328A 型電光分析天平(湘儀天平儀器設備有限公司)；T1000 型電子分析天平(常熟市雙杰測試儀器廠)；AS 系列超聲波清洗機(天津奧特賽恩斯儀器有限公司)；ZF-1 型三用紫外分析儀(上海力辰儀器科技有限公司)。

1.2 試劑 干姜對照藥材(批號：120942-201309)購自中國食品藥品檢定研究院；復方草豆蔻合劑(批號：20210520,20210601,20210629)均由中山市博愛醫院制劑室生產提供；薄層板：硅膠G 薄層板［青島海洋化工有限公司,默克化工技術(上海)有限公司］；研究中所用的乙酸乙酯、石油醚(30～60℃)、三氯甲烷等均為分析純,均購于廣州化學試劑廠。

1.3 方法

1.3.1 供試品溶液制備 本品100 ml,置分液漏斗中,用石油醚(30～60℃)40 ml振搖提取2次,合并石油醚液,揮干,殘渣加石油醚(30～60℃)1 ml 使溶解,作為供試品溶液。

1.3.2 對照藥材溶液制備 對照藥材溶液的制備：取干姜對照藥材1 g,加乙酸乙酯10 ml,超聲處理20 min,濾過,濾液揮干,殘渣加乙酸乙酯2 ml 溶解,作為對照藥材溶液。

1.3.3 陰性對照溶液制備 陰性對照溶液制備：取姜酊的陰性對照,按照供試品溶液制備方法,制成缺姜酊的陰性對照溶液。

1.3.4 薄層色譜鑒別 吸取上述3 種溶液各5 μl,分別點于同一硅膠G 薄層板上,以石油醚(60～90℃)-三氯甲烷-乙酸乙酯(2∶1∶1)為展開劑,展開,取出,完成后取出并進行晾干處理,噴以2%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點清晰［7］。觀察供試品的色譜在與對照藥材相對應的位置上顯現出相同的斑點。

1.3.5 試驗條件 分別在3 種不同的硅膠薄層板、展開劑預飽和與否、不同濕度(18%和88%)、不同溫度(8℃和25℃)的條件下進行薄層試驗,考察方法的耐用性。其中點樣順序：①缺姜酊的陰性對照；②復方草豆蔻合劑(批號：20210520)；③復方草豆蔻合劑(批號：20210601)；④復方草豆蔻合劑(批號：20210629)；⑤干姜對照藥材(批號：120942-201309)。

2 結果

2.1 不同薄層板試驗 考察不同薄層板對薄層色譜的影響,結果表明,Merck 高效硅膠預制板(10×20 cm)和硅膠預制板(10×20 cm)圖譜斑點清晰,分離效果好。見圖1,圖2；硅膠G 自制硅膠板圖譜主斑點清晰,分離效果好。見圖3。

圖1 Merck 高效硅膠預制板

圖2 硅膠預制板

圖3 硅膠G 自制硅膠板

2.2 展開劑預飽和與否 展開劑預飽和15 min 的圖譜(見圖4)和未飽和的圖譜(見圖5)斑點都很清晰,分離效果都很好。

圖4 展開劑預飽和后薄層色譜圖

圖5 展開劑未預飽和后薄層色譜圖

2.3 不同濕度試驗 在雙槽展開缸的一側加不同濃度的硫酸,濕度18%(硫酸∶水=100∶95.5)薄層色譜與濕度88%(硫酸∶水=10.8∶100)相比較為清晰［8,9］,分離效果相近。見圖6,圖7。

圖6 濕度18% 薄層色譜圖

圖7 濕度88%薄層色譜圖

2.4 不同溫度試驗 低溫(8℃)與室溫(25℃)薄層色譜見圖8,圖9,結果表明,低溫下下薄層色譜,色譜斑點分離效果不好,對主斑點有影響。

圖8 低溫(8℃) 薄層色譜圖

圖9 室溫(25℃)薄層色譜圖

3 小結

干姜薄層色譜鑒別受溫度影響較大,實驗過程中應注意控制溫度條件。新建干姜的薄層色譜鑒別方法在3 種不同的硅膠薄層板,展開劑預飽和與否,不同濕度條件下各斑點的分離度均較好,在與對照藥材相應位置上均顯相同斑點,且斑點顯色清晰,表明該種薄層色譜鑒別方法耐用性較好,可作為復方草豆蔻合劑的質控方法。