李金萍
(內蒙古呼倫貝爾市阿榮旗興安鎮綜合保障和技術推廣中心,內蒙古 呼倫貝爾 162750)
1907年Tyzzer首次在家鼠身上發現隱孢子蟲,隨后在多種動物中也發現了該蟲,1976 年在美國首次發現人類感染隱孢子蟲的病例,表明隱孢子蟲病是一種重要的人畜共患寄生蟲病。隱孢子蟲主要寄生于動物的腸道,并主要引起幼齡動物腹瀉病。牛隱孢子蟲病主要見于犢牛,導致犢牛出現嚴重腹瀉甚至脫水癥狀,病情嚴重時可導致犢牛死亡。在我國內蒙古、北京、廣東等省均有牛隱孢子蟲病的報道,并且在規?;B殖場中犢牛感染隱孢子蟲的情況較為嚴重,給我國肉牛和奶牛養殖均造成了嚴重的影響。本文對牛隱孢子蟲病的病原特征、流行病學、臨床癥狀和病理變化、診斷方法和防控措施進行綜述,希望為犢牛隱孢子蟲病的防控工作提供參考。
牛隱孢子蟲病的病原為隱孢子蟲科隱孢子蟲屬的多種寄生蟲,如安氏隱孢子蟲、鼠隱孢子蟲、小隱孢子蟲、牛隱孢子蟲和瑞氏隱孢子蟲,其中安氏隱孢子蟲和鼠隱孢子蟲是人畜共患的隱孢子蟲。隱孢子蟲蟲體較小,從形態上很難將不同的隱孢子蟲進行區分,需要進行分子生物學試驗鑒定。不同類型的隱孢子蟲卵囊大小不同,形態相近,卵囊呈圓形或卵圓形,卵囊壁光滑,無微孔、極粒和孢子囊,每個卵囊內含有4個裸露的子孢子和1個殘體。隱孢子蟲主要寄生于宿主的上皮細胞內,尤其是腸道上皮細胞。隱孢子蟲有三種生殖方式,分別為裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖。宿主經口感染隱孢子蟲成熟的卵囊后,子孢子從宿主小腸脫囊逸出,附著于腸上皮細胞,在胞膜和胞質之間形成帶蟲空泡,隨后隱孢子蟲在空泡內進行無性繁殖。首先發育成滋養體,隨后發育為第一代裂殖體(6~8個裂殖體)、第二代裂殖體(4 個裂殖體)。第二代裂殖體分別發育為大配子體和小配子體,小配子體又分裂為16個無鞭毛小配子,隨后和大配子體形成合子。合子又可發育為薄壁型和后壁型兩種卵囊,但該階段卵囊無極帽和微孔。卵囊在宿主體內完成孢子發育,內含有4個子孢子和1 個殘體,但沒有孢子囊。薄壁型卵囊宿主可以自身感染,而厚壁型卵囊則通過糞便排出體外后才具有感染性。隱孢子蟲完成生活史一般為5~11 d。
隱孢子蟲可感染多種動物,目前已知至少有240種動物可感染隱孢子蟲。在牛場中,帶蟲牛和患病牛是主要的傳染源,其糞便中含有大量的隱孢子蟲卵囊,通過污染水源和飼料傳播卵囊,此外,蒼蠅等節肢動物、飼養人員也可機械性地攜帶隱孢子蟲卵囊。各日齡的牛均可感染隱孢子蟲,但年齡較大的牛感染后一般不會表現臨床癥狀,感染的牛排出的卵囊數量較少,但是犢牛尤其是剛出生1~2周的犢牛感染后臨床癥狀較為嚴重,且糞便卵囊數量也較多。易感牛通過攝入被隱孢子蟲卵囊污染的飼料和飲水后感染,犢??赏ㄟ^被隱孢子蟲卵囊污染的乳頭感染。
目前,隱孢子蟲的致病機制尚未完全闡明。隱孢子蟲主要寄生于腸上皮細胞刷狀緣空泡內,蟲體寄生后腸黏膜表面呈凹陷或火山口狀,當蟲體數量增多后可導致腸上皮細胞絨毛萎縮、變短、變粗或融合、移位和脫落,上皮細胞老化和脫落的速度加快。宿主小腸黏膜廣泛受損,腸黏膜表面積減少,導致宿主腸道吸收功能降低,脂肪和糖類吸收功能受損,從而導致宿主出現腹瀉癥狀。隱孢子蟲寄生可導致宿主腸黏膜表面積縮小,多種黏膜酶數量降低,這可能是引起腹瀉的主要原因之一。
感染犢牛的潛伏期為7 d,排卵囊高峰期為7 d,高峰期可持續5 d,排卵囊持續時間為10 d。新生犢牛對隱孢子蟲的敏感度最高,1~8 月齡的犢牛發病率較高,尤其是3~4 周齡的犢牛癥狀更為嚴重?;疾倥>癯劣?,厭食,腹瀉,糞便中可混有大量的纖維素性滲出物,有時可見血液?;疾倥IL發育停滯,極度消瘦,有時體溫升高。犢牛死亡率可達16%~40%,其中4~30日齡的犢牛死亡率最高,耐過的犢牛生長發育受阻,生長性能嚴重下降。患病牛的主要病變特征為空腸絨毛層萎縮和損傷,腸黏膜固有層中的淋巴細胞、漿細胞、嗜酸性粒細胞和巨噬細胞增多,呈現出典型的腸炎病變,在腸道病變部位可見大量的隱孢子蟲各階段蟲體。
通常出現腹瀉并且使用抗生素治療無效的犢牛可能患有隱孢子蟲病,確診該病需進行實驗室檢測??刹杉疾∨5募S便進行飽和蔗糖溶液漂浮試驗,若在溶液內發現隱孢子蟲卵囊即可確診。不同隱孢子蟲株的卵囊可存在一定的差異。鼠隱孢子蟲卵囊呈卵圓形,無卵膜孔和極體,平均大小為7.38 μm×5.6 μm,長寬比為1.32∶1,孢子化的卵囊內有4 個子孢子和顆粒狀殘體,細胞核靠近后端。小隱孢子蟲卵囊呈球形或卵圓形,平均大小為5.3 μm×4.8 μm,長寬比為1.1∶1,孢子化卵囊有4 個子孢子和顆粒狀殘體,子孢子大小為4.9 μm×2.0 μm,細胞核靠近鈍端。安氏隱孢子蟲卵囊呈卵圓形,平均大小為7.25 μm×6.33 μm,長寬比為1.22∶1,囊壁透明,厚度為1μm,無微孔和極粒,孢子化卵囊內有4 個子孢子和1 個殘體。牛隱孢子蟲的卵囊呈近圓形,大小為4.76~5.35 μm×4.17~4.76 μm,長寬比1.06∶1,孢子化卵囊內有4個子孢子,無孢子卵囊。瑞氏隱孢子蟲卵囊近圓形,體積較小,大小為3.38~3.50 μm×3.49~3.61 μm,長寬比為1.03∶1。
對于病死的犢牛也可采集犢牛的腸道組織制備成切片或涂片,采取姬姆薩染色或者萋-尼氏染色,在顯微鏡下觀察蟲體。此外,也可使用提取患病牛直腸糞便、病變腸道等樣品的核酸進行PCR 檢測隱孢子蟲特異性的核酸序列。還可使用ELISA、膠體金快速診斷試紙條等診斷該病。

目前,犢牛隱孢子蟲病無特效的治療藥物,對于患病牛進行對癥治療和支持療法,如腹瀉嚴重的牛應及時止瀉、補液、糾正酸中毒。有研究使用抗球蟲藥物、抗生素和磺胺類藥物治療患病動物,但治療效果較差,然而,部分中藥和組方在治療隱孢子蟲病時表現出一定的效果,是目前隱孢子蟲病治療藥物研究的重要方向。
除了無特效治療藥物,目前也無疫苗可用于牛隱孢子蟲病的防控,因此該病的防控主要采取加強飼養管理和防止病原傳入。首先,應防止隱孢子蟲進入牛場。隱孢子蟲主要通過帶蟲?;蚧疾∨_M入牛場,因此需要引進新牛的牛場應做好相關的檢測,不從流行該病的牛場引入新牛。其次,由于隱孢子蟲感染后僅有犢??沙霈F較為明顯的臨床癥狀,而成年牛感染后通常成為隱性帶蟲牛,因此對于流行過隱孢子蟲病的牛場應定期進行隱孢子蟲檢測,區分帶蟲牛和健康牛,并采取分別管理。對于長期帶蟲的母牛應進行淘汰處理,以防犢牛感染。在牛隱孢子蟲防控工作中,消毒是重要的一環。隱孢子蟲的卵囊對不同的消毒劑敏感程度不同,因此,選擇適合的消毒方法尤為重要。目前已知碘酊、氫氧化鈉、煤皂酚和次氯酸等對隱孢子蟲的卵囊無效,常用的消毒劑中10%甲醛、5%氨水和漂白粉對隱孢子蟲卵囊具有較好的抑殺作用。可使用10%的甲醛消毒液加熱至65~75 ℃處理30 min,可有效殺死隱孢子蟲卵囊,該方法常用于毛巾、毛刷等養殖工具的消毒。活性氯為1%的漂白粉則常用于牛床、運動場、水槽、飼料槽、土壤和糞便的消毒。5%氨水可噴灑飼料槽、牛床、運動場進行消毒,但應注意氨水對??僧a生刺激,因此應避免牛接觸氨水。犢牛是牛隱孢子蟲病的多發群體,因此應對犢牛進行單獨飼養,定期清洗母牛乳頭,防止其被隱孢子蟲卵囊污染。同時還應注意,在斷奶前后應加強對犢牛的飼養工作,飼料更換應采取逐步更換的方式,也可為犢牛喂食增強免疫水平的中草藥、維生素和微生態制劑,以增強犢牛的抗病能力。對于表現出嚴重腹瀉的犢牛,應及時隔離飼喂,診斷發病原因,若為隱孢子蟲感染引起的腹瀉,應采取支持療法和對癥治療,對于經濟價值較低或患病嚴重的犢??商蕴幚?,患病牛的糞便應進行無害化處理。此外,還應對同群牛感染隱孢子蟲的情況進行檢測,將感染牛和健康牛分欄飼喂,降低隱孢子蟲傳播造成的經濟損失。
近年來,牛規?;B殖程度逐步提高,同時也導致牛疫病和寄生蟲病的頻發,其中隱孢子蟲的感染率也有上升的趨勢。因此,牛場養殖工作人員應加強對犢牛隱孢子蟲病的防控意識,了解隱孢子蟲對牛的危害,采取科學的方式防控該病。與此同時,由于對隱孢子蟲的致病機制和傳染機制方面仍存在知識空白,因此尚未研發出抗牛隱孢子蟲病的特效藥和疫苗,這要求從事獸醫科研工作的人員加強對隱孢子蟲相關的致病機制的基礎研究,根據其生長發育特點研發出特效的抗隱孢子蟲的藥物和疫苗,為牛隱孢子蟲病的防治提供有效的手段,從而降低牛隱孢子蟲病的發病率,降低由該病造成的經濟損失。□