血清中結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值

曾冬梅

（上猶縣疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科，江西 上猶 341299）

結(jié)核病（tuberculosis）是一種常見的慢性傳染病，發(fā)病與感染結(jié)合分枝桿菌相關(guān)，嚴(yán)重威脅患者的健康安全[1]。臨床結(jié)核病表現(xiàn)多樣化，且肺外結(jié)核病變通常較為隱匿，臨床診斷難度大[2，3]。傳統(tǒng)的涂片抗酸染色敏感度較低，且培養(yǎng)條件要求高、培養(yǎng)周期長，難以快速、準(zhǔn)確診斷肺結(jié)核[4]。肺片可對(duì)肺部結(jié)核進(jìn)行診斷，但是對(duì)外部結(jié)核幾乎無診斷價(jià)值[5]。因此，尋找快速、準(zhǔn)確診斷肺結(jié)核的方式，及時(shí)檢測(cè)病情變化是當(dāng)前臨床迫切需要解決的問題之一。結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體檢測(cè)是基于免疫層析和膠體金顯色技術(shù)研發(fā)的一步法檢測(cè)，可用于定性檢測(cè)人血清、血漿和全血樣本中的結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM抗體[6]。但目前關(guān)于血清中結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM抗體檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值尚無明確定論，還需要臨床進(jìn)一步探究證實(shí)[7]。基于此，本研究主要分析血清中結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年6 月-2021 年6 月上猶縣疾病預(yù)防控制中心診治的62 例肺結(jié)核患者作為肺結(jié)核組，另選取同期在本單位健康體檢者50 例作為對(duì)照組，并選取50 例潛伏感染患者作為潛伏感染組。肺結(jié)核組男34 例，女28 例；年齡22～74 歲，平均年齡（39.18±3.02）歲。對(duì)照組男26 例，女24 例；年齡24～72 歲，平均年齡（40.10±2.78）歲。潛伏感染組男28 例，男22 例；年齡25～73 歲，平均年齡（39.65±3.11）歲。三組年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有研究對(duì)象均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①肺結(jié)核組患者均符合臨床肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)[8，9]（即咳嗽、咳痰大于2周；痰中帶血或咯血；結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)為陽性；涂片檢測(cè)陽性，且分枝桿菌培養(yǎng)陽性；胸部影像學(xué)表現(xiàn)出相關(guān)癥狀）；②對(duì)照組均為體檢健康者；③潛伏感染組患者均為肺結(jié)核病接觸史，痰涂片及培養(yǎng)為陰性，結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)陽性，臨床及影像學(xué)表現(xiàn)無肺結(jié)核特征[10]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝、腎、心、腦血管系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病者；②依從性較差，不能配合者；③隨訪資料不完善者。

1.3 方法 采用結(jié)核分枝桿菌IgG 或IgM 抗體檢測(cè)試劑盒（膠體金法）（艾博生物醫(yī)藥＜杭州＞有限公司，國藥準(zhǔn)字20133400078，規(guī)格：40 人份/盒），改良羅氏培養(yǎng)基由本單位自行配置。標(biāo)本采集：取晨起空腹靜脈血，然后以4500 r/min 轉(zhuǎn)速離心10 min后，分離血清，并依據(jù)常規(guī)方法留取夜間痰、晨痰，檢測(cè)血清結(jié)核分枝桿菌IgG 或IgM 抗體，具體方法[11]：①將待測(cè)樣本和試劑盒均平衡至室溫；②測(cè)試準(zhǔn)備完成后，將密封鋁箔袋打開，抽出檢測(cè)卡，放置于水平桌面上；③將樣本號(hào)標(biāo)注于檢測(cè)卡上，然后應(yīng)用加樣器或滴管從樣本管中取出血清樣本1 滴，滴加于檢測(cè)卡上的樣本孔內(nèi)或條式產(chǎn)品的加樣墊處，另外滴加一滴樣本稀釋液；④設(shè)置好計(jì)時(shí)器，10 min 內(nèi)判讀結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo) 比較三組IgG、IgM 抗體陽性檢出率、IgG、IgM 以及IgG 聯(lián)合IgM 診斷肺結(jié)核的效能。

1.4.1 陽性標(biāo)準(zhǔn)[12，13]質(zhì)控線C 出現(xiàn)的前提下，如果只出現(xiàn)T1 反應(yīng)線，則提示抗結(jié)核IgM 抗體陽性；如果只出現(xiàn)T2 反應(yīng)線，提示抗結(jié)核IgG 抗體陽性；如果T1 和T2 反應(yīng)線都出現(xiàn)，提示抗結(jié)核IgG/IgM 均為陽性；如果僅出現(xiàn)一條質(zhì)控線C，提示無檢測(cè)到結(jié)核抗體，結(jié)果為陰性。

1.4.2 診斷效能[14]敏感度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%；特異性=真陰性/（真陰性+假陽性）×100%；準(zhǔn)確度=真陽性/總例數(shù)×100%；陽性預(yù)測(cè)值=真陽性/（真陽性+假陽性）×100%；陰性預(yù)測(cè)值=真陰性/（真陰性+假陰性）×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)軟件包SPSS 21.0 版本對(duì)本研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)。繪制ROC曲線，計(jì)算ROC 曲線下面積（AUC 值），以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體陽性檢出率比較 肺結(jié)核組結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體陽性檢出率均高于潛伏感染組、對(duì)照組，且潛伏感染組高于對(duì)照組（P＜0.05），見表1。

表1 三組結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體陽性檢出率比較[n（%）]

2.2 不同檢測(cè)指標(biāo)對(duì)肺結(jié)核診斷效能比較 IgG 聯(lián)合IgM 診斷肺結(jié)核的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均高于IgG、IgM 單項(xiàng)檢測(cè)（P＜0.05），見表2、圖1。

表2 不同檢測(cè)指標(biāo)對(duì)肺結(jié)核診斷效能比較（%）

圖1 不同檢測(cè)指標(biāo)對(duì)肺結(jié)核診斷效能的ROC 曲線圖

3 討論

結(jié)核病早期臨床缺乏特異性癥狀和體征，傳統(tǒng)檢測(cè)方法存在缺點(diǎn)，臨床診斷難度較大[15]。目前，結(jié)核抗體檢測(cè)方法包括免疫色譜法、免疫交替層析法，但是其檢測(cè)效果與抗原表位的選擇和純化水平相關(guān)[16，17]。膠體金免疫層析法通過重組DNA 的方法在大腸桿菌表達(dá)中獲得結(jié)核抗原，加之檢測(cè)中含有膠體金標(biāo)記的結(jié)核抗原，從而可以對(duì)血清中結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 以及IgG 和IgM 抗體同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)[18]。既往研究指出[19]，結(jié)核病的發(fā)生與發(fā)展與機(jī)體免疫功能密切相關(guān)，并且結(jié)核分枝桿菌對(duì)機(jī)體產(chǎn)生刺激時(shí)，機(jī)體漿細(xì)胞會(huì)高水平表達(dá)B 淋巴細(xì)胞，而B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生免疫球蛋白IgG、IgM，因此進(jìn)行血清結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體的檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中具有一定價(jià)值。

本研究結(jié)果顯示，肺結(jié)核組結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體陽性檢出率均高于潛伏感染組、對(duì)照組，且潛伏感染組高于對(duì)照組（P＜0.05），提示肺結(jié)核患者結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體陽性檢陽性率菌高于健康人群和潛伏感染人群，可為臨床篩查疑似肺結(jié)核患者提供一定的參考依據(jù)，該結(jié)論與趙建[20]的報(bào)道相似。分析認(rèn)為，可能是因?yàn)楫?dāng)結(jié)核分枝桿菌侵入機(jī)體后，會(huì)產(chǎn)生抗原，進(jìn)而誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答，因而血液中會(huì)存在結(jié)核抗體，并且會(huì)隨著病程的延長或加重，其陽性率會(huì)呈升高趨勢(shì)。同時(shí)研究顯示，IgG 聯(lián)合IgM 診斷肺結(jié)核的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值均高于IgG、IgM 單項(xiàng)檢測(cè)（P＜0.05），血清中結(jié)核分枝桿菌IgG 聯(lián)合IgM抗體檢測(cè)診斷肺結(jié)核具有較高的診斷效能，可提高臨床診斷率。相關(guān)研究顯示[21]，早期結(jié)核分枝桿菌感染主要以IgM 型抗體為主，中晚期以IgG 型抗體為主。因此，IgG 聯(lián)合IgM 抗體檢測(cè)診斷可有效彌補(bǔ)單項(xiàng)檢測(cè)的不足，提升檢出率，進(jìn)而為臨床治療提供可靠的參考依據(jù)。

綜上所述，血清中結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體檢測(cè)在肺結(jié)核診斷中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，尤其是兩者聯(lián)合可提高肺結(jié)核診斷準(zhǔn)確率。但本研究存在一定不足，只對(duì)結(jié)核分枝桿菌IgG、IgM 抗體進(jìn)行定性檢測(cè)，無法及時(shí)監(jiān)測(cè)肺結(jié)核病情變化情況。因此，今后在臨床，可配合常規(guī)檢測(cè)以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)定性、定量測(cè)定，為肺結(jié)核的發(fā)生、發(fā)展、治療以及轉(zhuǎn)歸提供更好的依據(jù)。