牛人工授精受胎率的影響因素分析及對(duì)策

何榮奇

（柳州市融安縣長(zhǎng)安鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村綜合服務(wù)中心，廣西 融安 545400）

為有效提高肉牛養(yǎng)殖效益，各級(jí)地區(qū)基層獸醫(yī)站不斷加大牛人工授精工作力度，利用良種公牛凍精液，在人工配種技術(shù)加持下，提高能繁母牛數(shù)量，以此培育具有優(yōu)良血統(tǒng)的牛犢，最終實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢(shì)牛品種的擴(kuò)繁擴(kuò)育，以此提高受孕母牛數(shù)量，提升母牛受胎率。但是在局部地區(qū)，牛人工授精技術(shù)掌握不到位，存在母牛受胎率低，人工授精成功率低等問(wèn)題，基于此，文章展開(kāi)以下探究，分析牛人工授精受胎率的影響因素，并給出針對(duì)性解決策略。

1 牛人工授精優(yōu)勢(shì)

綜合理論研究和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)來(lái)看，人工授精技術(shù)應(yīng)用具有顯著優(yōu)勢(shì)，其優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：

1.1 可大幅提高優(yōu)良種公牛配種效能

在自然交配狀態(tài)下，一頭種公?？韶?fù)擔(dān)40～80頭母牛配種任務(wù)[1]?？梢?jiàn)，對(duì)于大中型規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)來(lái)講，要想實(shí)現(xiàn)全場(chǎng)母牛配種，對(duì)公牛數(shù)量的需求量較大，而利用人工授精技術(shù)，1頭種公牛精液可以輸送至成百甚至數(shù)萬(wàn)頭母牛體內(nèi)，因此極大地提高優(yōu)良種公牛配種效能。

1.2 避免自然交配時(shí)出現(xiàn)疾病傳播

如果采用自然交配法，種公牛在配種時(shí)，其生殖器官與母牛直接接觸，如果母牛本身存在陰道滴蟲(chóng)病，或傳染性陰道炎，或公牛本身存在布魯氏桿菌病，在自然交配時(shí)將直接導(dǎo)致細(xì)菌、病菌傳播，即使在配種前可以對(duì)公牛與母牛生殖器官進(jìn)行消毒，仍然不能規(guī)避疾病傳播與擴(kuò)散。而利用人工授精技術(shù)，可有效避免公牛、母牛生殖器官直接接觸，預(yù)防疾病傳播，降低疾病感染概率。

1.3 加快牛群改良速度

要想提高肉牛改良速度，提升種公牛優(yōu)良遺傳性能，應(yīng)該對(duì)繁育性能好、生產(chǎn)力更強(qiáng)、遺傳性狀更佳的種公牛進(jìn)行配種，這一配種理念將直接淘汰劣質(zhì)牛，在人工授精技術(shù)加持下，進(jìn)一步擴(kuò)大優(yōu)秀種公?；蚍庇俣龋瑢?shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)品種的擴(kuò)散擴(kuò)育。

1.4 提高精液質(zhì)量和母牛受胎率

在人工授精技術(shù)實(shí)施之前，配種員需在采精時(shí)對(duì)精液品質(zhì)進(jìn)行檢查，同時(shí)在精液輸送時(shí)分析精液品質(zhì)是否出現(xiàn)變化，以此不斷提高精液質(zhì)量；在母牛受精方面，配種員及時(shí)檢查其生殖器官是否出現(xiàn)炎癥，如果發(fā)現(xiàn)母牛有卵巢囊腫和子宮內(nèi)膜炎等疾病，可對(duì)母牛及時(shí)治療，便于后續(xù)受胎與妊娠。因此在人工授精技術(shù)應(yīng)用下，與自然交配相比，更能提高公牛精液質(zhì)量和母牛受胎率[2]。

2 牛人工授精受胎率的影響因素

2.1 母牛配種日齡過(guò)小，配種時(shí)機(jī)選擇不當(dāng)

在部分農(nóng)村地區(qū)，養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)養(yǎng)殖戶(hù)為最大化提高母牛繁育效率，使母牛盡早產(chǎn)犢，以此加速優(yōu)質(zhì)牛品種繁育速度，不重視母牛初配時(shí)間，在母牛配種時(shí)年齡過(guò)小，甚至在12月齡以?xún)?nèi)就開(kāi)始配種，而此時(shí)牛正處于生長(zhǎng)發(fā)育的旺盛階段，性器官發(fā)育不完全，雖然已經(jīng)逐漸進(jìn)入性成熟階段，但子宮、卵巢仍未達(dá)到最佳生育狀態(tài)，如果此時(shí)養(yǎng)殖技術(shù)人員和配種員未能充分考慮母牛自身生長(zhǎng)發(fā)育狀況而進(jìn)行提前配種，必然導(dǎo)致受胎率低、配種成功率低等一系列問(wèn)題。即使在人工授精之后，母?？梢哉Ｈ焉?，犢牛也不容易飼養(yǎng)，身體瘦弱，且內(nèi)臟器官發(fā)育不完全，不僅影響產(chǎn)犢效能，甚至影響母牛終身繁育能力。此外，部分配種員難以科學(xué)鑒定母牛發(fā)情期，最佳配種時(shí)機(jī)選擇不當(dāng)，在一定程度上也影響人工授精受胎率。

2.2 公牛精液冷凍、保存與稀釋不當(dāng)

部分配種員在采集種公牛精液之后冷藏、保存與稀釋方法不正確，直接致使精子活力下降[3]。比如，不能隨時(shí)檢查液氮儲(chǔ)存量，難以按照液氮罐保溫性能要求，定期添加液氮，從液氮罐中取出精液時(shí)，夾取精液吸管方式操作不正確，提氮時(shí)提出液氮灌口之外，或者操作速度較慢，使得精液在低溫或高溫環(huán)境下暴露時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，也會(huì)影響精子成活率和精子活力。

2.3 母牛存在難孕或不孕

如果部分母牛在人工授精中受胎率較低，養(yǎng)殖技術(shù)人員和配種員應(yīng)合理考慮是否母牛存在不孕、難孕癥狀，通常情況下，農(nóng)牧區(qū)飼養(yǎng)的母牛在三個(gè)發(fā)情期內(nèi)配種基本可以實(shí)現(xiàn)受胎目的。如果在三個(gè)發(fā)情期之內(nèi)仍然不孕，基本可判定為該類(lèi)牛屬于難孕牛，同時(shí)對(duì)于部分20月齡的青年牛，如果其始終未出現(xiàn)妊娠，也可以判定為難孕牛，應(yīng)對(duì)該種不孕癥進(jìn)行進(jìn)一步診斷；且對(duì)于已經(jīng)生產(chǎn)過(guò)的母牛，其在產(chǎn)后80d內(nèi)和高產(chǎn)奶量的120d以?xún)?nèi)也不容易受孕，但該種不孕和難孕為暫時(shí)性，一旦超過(guò)這一時(shí)間范圍，可進(jìn)行正常受孕與妊娠。通常情況下，母牛難孕或不孕的原因在于部分牛生殖器官發(fā)育不全，或者染色體異常，或者母牛屬于兩性畸形，也可能由于子宮頸閉鎖，雙頸雙口或其他生殖道畸形問(wèn)題，必須通過(guò)針對(duì)性治療才能有效提高人工授精成功率。

2.4 輸精操作不規(guī)范

部分配種員在輸精操作過(guò)程中，技術(shù)要點(diǎn)掌握不規(guī)范，甚至錯(cuò)誤地認(rèn)為輸精部位深度越深越好，可能適得其反，在正式輸精操作過(guò)程中，沒(méi)有必要將精液輸送至超過(guò)子宮角的彎曲部位。這是由于母牛子宮角向下彎曲，如果輸精器插入過(guò)深將直接引發(fā)母牛發(fā)情時(shí)子宮充血或是水腫，甚至損傷子宮內(nèi)膜，影響受胎率，對(duì)子宮結(jié)構(gòu)發(fā)育產(chǎn)生副作用。同時(shí)，由于精子在發(fā)情母牛子宮中運(yùn)行速度較快，甚至幾分鐘之內(nèi)便可到達(dá)輸卵管，因此不需要將輸精部位確定得太深，不利于精子的獲能；最后，由于配種員在輸精時(shí)經(jīng)常利用左手在直腸內(nèi)操作，因此輸精槍很容易進(jìn)入到右側(cè)子宮角內(nèi)，反之進(jìn)入左側(cè)子宮角內(nèi)，如果精液輸送太深，將導(dǎo)致卵子無(wú)法受精，或者使得排卵側(cè)無(wú)精子?？梢?jiàn)，在今后輸精操作過(guò)程中，配種員必須嚴(yán)格掌握操作規(guī)范程序，以此提高母牛受胎率。

3 提高牛人工授精受胎率的對(duì)策

3.1 選擇合適配種日齡與時(shí)機(jī)

在全放牧條件下，母牛最初配種年齡約在15月～24月齡左右[4]。產(chǎn)犢時(shí)間在兩歲半左右，如果飼養(yǎng)條件好，母牛身體機(jī)能較強(qiáng)，且身體健康，可以提前配種，但最低不能低于12月～15月（此時(shí)產(chǎn)犢時(shí)間在一歲到兩歲半左右）。從身體發(fā)育層面來(lái)看，母牛最初配種時(shí)，身高需達(dá)到1.2m（常規(guī)情況下18月齡母牛即可達(dá)到這一標(biāo)準(zhǔn)），體重需超過(guò)350kg，如果母牛體量太小，體重過(guò)低，不宜配種，影響后續(xù)受胎和妊娠率，因此養(yǎng)殖技術(shù)人員應(yīng)該做好檔案記錄和選配計(jì)劃，按照母牛月齡和身體發(fā)育情況選擇初配時(shí)間。其次，配種員應(yīng)正確掌握母牛發(fā)情癥狀和排卵時(shí)間，通常情況下，母牛進(jìn)入發(fā)情期時(shí)，可能爬跨同欄舍其他母牛，同時(shí)生殖器官有黏液滲出，流量較大，黏液濃度較高，且通過(guò)直腸檢查法，對(duì)直腸進(jìn)行檢查，可發(fā)現(xiàn)子宮頸有彈性，波動(dòng)感明顯，此時(shí)可認(rèn)定母牛正式進(jìn)入發(fā)情期。在母牛發(fā)情結(jié)束4～16h左右，為排卵時(shí)間，配種員應(yīng)該對(duì)母牛外部表現(xiàn)進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)其陰門(mén)腫脹感消退，卵泡壁變薄，子宮頸有一觸即破之感，同時(shí)陰道內(nèi)黏液滲出量大大降低，由黏稠轉(zhuǎn)為稀釋?zhuān)伾蓽啙徂D(zhuǎn)為淺白色或灰白色，此時(shí)可確定為人工授精的最佳時(shí)機(jī)，可大大提高母牛受胎率。

3.2 做好精液冷凍、保存、解凍

要想有效提高種公牛精液精子活力，提升母牛人工授精受胎率，配種員應(yīng)該熟練掌握精液冷凍、保存與解凍技巧，主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：（1）冷凍。精液冷凍就是指在采精之后，通過(guò)稀釋和添加抗凍劑等方式，使得精子的代謝活動(dòng)暫時(shí)停止，之后利用液氮冷藏法，使得精子達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的，之后經(jīng)過(guò)特定解凍程序，使優(yōu)質(zhì)種公牛精液再次復(fù)蘇，以此具備人工授精操作能力，其中在精子冷凍保存過(guò)程中，普遍使用細(xì)管凍精，細(xì)管規(guī)格約0.25ml/支。（2）儲(chǔ)存，將冷凍機(jī)液完全沉浸在液氮中，放置液氮罐內(nèi)儲(chǔ)存，同時(shí)根據(jù)液氮罐的性能要求定期添加液氮，不能使得液氮含量低于1/3，在取放凍精時(shí)，脫離液氮時(shí)間不能超過(guò)10s，只允許提到液氮罐瓶頸段以下，如果在操作時(shí)脫離液氮時(shí)間必須超過(guò)10s，應(yīng)該在提精過(guò)程中，二次浸末后再進(jìn)行提取。在取放凍精之后，應(yīng)該盡量減少開(kāi)啟塞蓋的頻次和時(shí)間，以此防止異物落入罐內(nèi)，同時(shí)技術(shù)人員對(duì)罐外掛霜情況進(jìn)行觀測(cè)，必要時(shí)及時(shí)更換并定期清理。（3）解凍。在解凍恒溫杯中倒入2/3清水，水溫設(shè)為37℃左右即可，在恒溫狀態(tài)下，將提筒取到液氫頸口位置，滲入液氮冷卻，將其投入至解凍恒溫杯中，解凍時(shí)間約為15s，之后利用顯微鏡將精子放置150～600倍，對(duì)精液品質(zhì)進(jìn)行檢查。其活力不得低于0.3，在37℃恒溫下觀察其存活時(shí)間必須超過(guò)4h，才可進(jìn)入下一步輸精環(huán)節(jié)，以此提高母牛受胎率[5]。

3.3 針對(duì)性治療難孕與不孕

配種員在基層畜牧獸醫(yī)指導(dǎo)下，對(duì)母牛不孕或難孕原因進(jìn)行針對(duì)性治療，比如，如果母牛因?yàn)槁雅菽夷[而導(dǎo)致難孕，可能是由于LH分泌不足，因此可以一次性肌肉注射LHRH-A 25-100μg，或者一次性肌肉注射HCG2500～3000IU，也可以一次性注射LH200IU，或者肌肉注射黃體酮50～100mg，連續(xù)注射一個(gè)星期，配合地塞米松肌肉注射，注射量約為20mg/頭，必要時(shí)可以一次性肌肉注射FSH200～400IU，促使母牛卵泡發(fā)育成熟并排卵。如果母牛因?yàn)轶w內(nèi)LH不足而導(dǎo)致未排卵的卵泡黃體化，出現(xiàn)黃體囊腫，可以利用肌肉注射法，宮注1支PGF2α，但此時(shí)應(yīng)該注意到，當(dāng)卵泡直徑≥2.5cm時(shí)，才可確定為黃體囊腫，如果卵巢上有黃體，即使黃體有波動(dòng)感或者黃體規(guī)格大于等于2.5cm，也均屬于正?，F(xiàn)象，不屬于囊腫，因此在判定母牛黃體囊腫時(shí)，應(yīng)做好精確診斷，以此實(shí)現(xiàn)對(duì)癥治療。如果因?yàn)長(zhǎng)H分泌不足而導(dǎo)致母牛排卵延遲，此時(shí)可以在配種輸精時(shí)給母牛注射2500～3000IU的HCD，也可以肌肉注射LHRH-A 25-100μg促進(jìn)卵泡成熟和排卵。

3.4 強(qiáng)化輸精技術(shù)規(guī)程，提升輸精規(guī)范性

在操作之前輸精員應(yīng)戴好長(zhǎng)臂手套，將配種牛保定牢靠，為了減少母牛應(yīng)激，可以提前撫摸母牛臀部，或者輕輕拍打母牛臀部，之后將左手伸入母牛直腸內(nèi)，隔著直腸壁找到子宮頸，掏出糞便之后，固定子宮頸位置，之后沿陰道上壁先斜向上，之后至子宮頸外口處，把精液輸送至子宮體基部或者卵泡側(cè)子宮角內(nèi)。此時(shí)，在輸精操作中配種應(yīng)該注意到，輸精部位不能太深，由于部分輸精槍外鞘頭部不光滑，如果輸送部位太深，將直接導(dǎo)致子宮內(nèi)膜損傷；其次，在輸精過(guò)程中，如果個(gè)別青年母牛子宮頸開(kāi)口較小，輸精槍不能通過(guò)子宮頸，可以轉(zhuǎn)換利用顆粒精液輸精法，縮小輸精槍體直徑粗，如果沒(méi)有顆粒精液時(shí)，可將氣管精液推入試管內(nèi)，加入生理鹽水，加入量約為1ml，之后利用顆粒輸精器輸精。在插入輸精管時(shí)不能用力過(guò)猛，如果個(gè)別母牛直腸壁收縮緊張，為有效刺激腸壁，可將手向前伸，握住子宮頸向前推，以此使得母牛放松，便于輸精管插入。此外，在輸精過(guò)程中，輸精員還應(yīng)該注意到以下幾個(gè)方面：（1）右手插入輸精槍時(shí)應(yīng)穩(wěn)、準(zhǔn)、慢，緩慢插入直腸輸精完畢后，緩慢抽出輸精槍?zhuān)瑸榉乐咕旱沽?，可讓牛安靜站立10min，以此提高受精率。（2）對(duì)于沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)的個(gè)體養(yǎng)殖戶(hù)或者配種員，為提高牛人工授精成功率，可以利用可視輸精槍?zhuān)_認(rèn)圖像清晰后斜向上插入生殖道內(nèi)，可清晰地看到宮頸口，通過(guò)屏幕觀察，可調(diào)整可視槍?zhuān)笊戏磷訉m頸口內(nèi)，以此正沖子宮頸口進(jìn)行輸精，插入深度約為10cm左右，至少通過(guò)一層褶皺，手中明顯有頓挫感后才可抽出，以此提高母牛受胎率。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，在牛人工授精技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中，配種員是應(yīng)該選擇合適的母牛配種日齡與時(shí)機(jī)，做好檔案記錄和選配計(jì)劃，按照母牛月齡和身體發(fā)育情況選擇初配時(shí)間，做好精液冷凍、保存、解凍，有效提高種公牛精液精子活力，在基層畜牧獸醫(yī)指導(dǎo)下，對(duì)母牛不孕或難孕原因進(jìn)行針對(duì)性治療，并提高輸精技術(shù)操作規(guī)范性，避免母牛子宮內(nèi)膜損傷，以此提高母牛受胎率。