奶牛DHI一次采樣與多次采樣之間的關(guān)系

文│范雪 宋陽（山東省龍口市動物疫病預(yù)防控制中心）

李春蕾（山東省煙臺市動物疫病預(yù)防與控制中心）

奶牛生產(chǎn)性能測定體系是對奶牛泌乳性能及乳成分的測定，也叫做奶牛群體改良。DHI測定在國外已形成一套較為成熟完整的體系。我國一些奶業(yè)發(fā)展較快地區(qū)的實踐也證明了這一技術(shù)的先進性。利用DHI報告分析奶牛場奶牛的生產(chǎn)性能，對奶戶及整個乳品行業(yè)都有至關(guān)重要的意義。近年來，政府對奶牛良種登記和奶牛生產(chǎn)性能測定工作的支持力度也越來越大，有利于我國良種奶牛的登記和基礎(chǔ)信息庫的建立，但卻大大增加了我國奶牛生產(chǎn)性能測定的工作量。因此，本試驗通過研究一次采樣與多次采樣之間的關(guān)系，希望能用一次采樣代替多次采樣，從而減輕DHI測定的工作量，減少人力物力以及奶樣的浪費。

一、材料與方法

1.試驗動物。選取健康狀況良好、處于正常泌乳階段、產(chǎn)犢七天后的奶牛80頭參加DHI測定。試驗過程中，奶牛按照原有飼養(yǎng)方式飼喂，飲水方式、擠奶時間以及飼料配方等都不發(fā)生改變。試驗動物及場地由格潤富德農(nóng)牧科技有限公司提供。

2.試驗材料。50毫升采樣管（內(nèi)加0.03克重鉻酸鉀作為防腐劑）兩箱，采樣器，F(xiàn)oss乳成分分析儀MilkoScanTM Minor，體細胞計數(shù)儀，恒溫水浴箱，保鮮柜。

3.試驗方法。

（1）采集樣品。由于該牛場每天擠奶兩次，本次試驗一天采樣也是兩次，分別在6點和18點采樣。此場擠奶廳裝有轉(zhuǎn)盤式擠奶機，共有80個擠奶設(shè)備。采樣前先安裝采樣設(shè)備，然后按正常的擠奶程序進行。奶牛排隊進入擠奶轉(zhuǎn)盤，依次用溫水清洗乳頭，用消毒液對乳頭消毒，用干凈的棉布擦拭乳頭。隨著擠奶工作的進行，不斷有奶樣進入采樣設(shè)備。用加有0.03克重鉻酸鉀的采樣管盛取50毫升奶樣，蓋好蓋子，混合均勻。采樣結(jié)束后，要在樣品箱貼上標簽，標明采樣時間、地點、采樣人員。

（2）樣品的保存與運輸。加有0.03克重鉻酸鉀的奶樣在15℃的條件下可以保存4天，在4℃的冷藏條件下可保存一周。采樣結(jié)束后，先放置在通風陰涼處，防止奶樣腐敗變質(zhì)。樣品應(yīng)盡快運送到實驗室，運輸途中盡量保持低溫4℃，減少搖晃。本次試驗于采樣后的第二天將奶樣運送到實驗室。

（3）檢測指標的選擇。試驗選取具有代表性的乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物以及體細胞數(shù)4個檢測指標。乳脂率、乳蛋白率兩項指標是通過乳成分分析儀測定的，乳脂率、乳蛋白率反應(yīng)奶牛的營養(yǎng)狀況，也反映牛奶品質(zhì)的高低，進而決定牛奶的銷售價格。非脂固形物是牛奶干物質(zhì)中去除乳脂的剩余部分，它也是反映牛奶品質(zhì)的重要指標。體細胞數(shù)指每毫升牛奶中白細胞的含量，當奶牛乳腺感染時，血細胞將進入牛奶中，使牛奶中的細胞數(shù)增加。牛奶中體細胞的數(shù)目取決于乳腺感染的程度，乳腺感染程度高則體細胞數(shù)目多，相反，則體細胞數(shù)目少。

（4）檢測樣品。運送到實驗室的奶樣先放置在4℃的保鮮柜中，以保持奶樣的性質(zhì)，并立即組織測定工作，先測定早晨奶樣和晚上奶樣，再將早晨奶樣和晚上奶樣以1∶1的比例混合測定。

使用乳成分分析儀測定奶樣中乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物。向恒溫水浴箱中加入適量水，把水浴溫度設(shè)定到37℃，將待測奶樣放入水浴。打開乳成分分析儀，待達到一定溫度后開始清洗、調(diào)零。輕微搖晃奶樣，放入吸管，按下開始按鈕，測定乳成分，記錄數(shù)據(jù)。

使用體細胞計數(shù)儀測定奶樣中的體細胞數(shù)。樣品在檢測前必須在水浴鍋中預(yù)熱，水浴溫度應(yīng)在41～43℃，樣品溫度應(yīng)達38～41℃。上下倒置樣品5次，混勻樣品，不要劇烈搖晃以免產(chǎn)生氣泡。每檢測一個樣品，線路系統(tǒng)都將吸入一個氣泡，這樣可避免樣品間殘留，檢測結(jié)束后，檢測結(jié)果窗口中顯示三個數(shù)值，分別為細胞數(shù)（Kcell/ml為單位）、Q-值和當前的斜率。

4.數(shù)據(jù)處理。把置信度設(shè)置為95%，使用Excel進行數(shù)據(jù)處理，得到早-混、晚-混、早與晚-混之間在乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物和體細胞數(shù)方面的回歸關(guān)系圖表，并討論是否有線性回歸關(guān)系。

二、結(jié)果與分析

1.奶樣中各乳成分及體細胞數(shù)早上取樣與混樣之間的關(guān)系。由表1可知，經(jīng)過對早晨奶樣和混合奶樣在各乳成分和體細胞數(shù)上的回歸分析得知：混合奶樣對早晨奶樣在乳脂率、乳蛋白率、體細胞數(shù)上存在極顯著的回歸關(guān)系，回歸方程成立，依次為y＝1.70874+0.561587x，y＝0.213538+0.919992x，y＝18.98434+0.814582x；而在非脂固形物方面不存在顯著的回歸關(guān)系，回歸方程不成立。因此，通過測定早晨奶樣的乳成分及體細胞數(shù)，無法完全了解混合奶樣中的乳成分及體細胞數(shù)，可以認為早晨奶樣無法取代混合奶樣。

表1 早上取樣與混樣之間各指標的回歸方程數(shù)據(jù)列表

2.奶樣中各乳成分及體細胞數(shù)晚上取樣與混樣之間的關(guān)系。由表2可知，經(jīng)過對晚上奶樣和混合奶樣在各乳成分及體細胞數(shù)上的回歸分析得知：混合奶樣對晚上奶樣在乳脂率、體細胞數(shù)兩方面上存在極顯著的回歸關(guān)系，回歸方程成立，分別為y＝1.628878+0.53374x，y＝36.0694+0.759109x；在乳蛋白率和非脂固形物方面沒有顯著的回歸關(guān)系，回歸方程不成立。因此，僅通過測定晚上奶樣的各乳成分和體細胞數(shù)，無法完全了解混合奶樣的各乳成分和體細胞數(shù)，可以認為晚上奶樣無法取代混合奶樣。

表2 晚上取樣與混樣之間各指標的回歸方程數(shù)據(jù)列表

3.奶樣中各乳成分及體細胞數(shù)早上和晚上取樣與混樣之間的關(guān)系。由表3可知，經(jīng)過對早晨奶樣和晚上奶樣與混合奶樣在各乳成分及體細胞數(shù)上的二元線性回歸分析得知：混合奶樣對早晨奶樣和晚上奶樣在乳脂率和體細胞數(shù)上存在極顯著的回歸關(guān)系，回歸方程成立，分別為：y＝0.055347+0.490294x1+0.480307×2，y＝20.57284+0.542725x1+0.277273x2；在乳蛋白率和非脂固形物方面沒有顯著的回歸關(guān)系，回歸方程不成立。因此，僅通過測定早晨奶樣和晚上奶樣中各乳成分和體細胞數(shù)，也不能完全得知混合奶樣中各乳成分和體細胞數(shù)，也就是說，早晨奶樣和晚上奶樣也不能取代混合奶樣。

表3 早上取樣和晚上取樣與混樣之間各指標的回歸方程數(shù)據(jù)列表

三、討論

由以上數(shù)據(jù)顯示，在早晨奶樣-混合奶樣、晚上奶樣-混合奶樣、早上奶樣晚上奶樣-混合奶樣三組數(shù)據(jù)中，指標乳脂率和體細胞數(shù)在三組回歸分析中都存在線性回歸關(guān)系，而乳蛋白率和非脂固形物在三組回歸分析中部分或者完全沒有回歸關(guān)系。盡管有部分指標是存在線性回歸關(guān)系的，但是在實際工作當中不可能單獨采一次樣來測量乳脂率和體細胞數(shù)的，把其他指標另測得，還是需要一天采多次樣測量，這樣才能保證較高的準確度。

四、結(jié)論

本試驗通過對早晨奶樣-混合奶樣、晚上奶樣-混合奶樣、早上奶樣晚上奶樣-混合奶樣在乳脂率、乳蛋白率、非脂固形物和體細胞數(shù)四方面的回歸分析，發(fā)現(xiàn)無論是早晨奶樣、晚上奶樣還是早上奶樣和晚上奶樣都無法取代混合奶樣，也就是說一天中DHI測定一次取樣無法代替多次取樣。在DHI測定中，我們還需要進行多次取樣，嚴格按照DHI測定的規(guī)定進行操作，得到有效數(shù)據(jù)，形成正確的DHI報告，從而正確指導(dǎo)牛場的日常生產(chǎn)。