鎮寧小黃姜脫毒原原種繁育技術

吳家麗，牛力立，譚體瓊，鮑菊

（安順市農業科學院，貴州，561000）

小黃姜（Globba racemosaSmith），姜科姜屬植物，辛辣味濃，肉細嫩，味香，纖維較細[1]，具有多種藥理活性，具有抗氧化、抗炎、抗癌、降血糖和保護心血管功效性[2]，是安順市農業產業結構調整中藥食兼用的重要經濟作物之一。鎮寧小黃姜作為安順地方特色品種，根莖黃色或淺黃色，具有強烈辛辣味，味美品質佳，2020年獲得國家地理標志農產品認證[3]，2021年種植規模達11 053.33 hm2。但由于采用塊莖無性繁殖、反復重茬生產等原因，小黃姜主產區姜瘟病、莖基腐病等病害盛行，病毒積累多，導致近年來品質降低、產量和種植面減少的現象逐步顯現，同時大量外地品種占據部分種植面積，使地方特色品種市場受到嚴重威脅。采用熱處理結合莖尖分生組織培養，可脫除生姜病菌，進而建立種苗、種姜快繁體系，是防止病害和提高繁殖系數的有效技術措施[4]。我國山東、浙江、江蘇、山西、廣西、云南、安徽等省份的科研人員針對生姜莖尖脫毒、組培快繁體系建立、高產栽培技術、增產、抗病性等開展了大量的試驗研究，在山東、云南等地進行了大面積推廣應用，增產效果明顯[5～15]，但在貴州省針對小黃姜原原種繁育技術研究詳細報道少。筆者自2019年開始針對鎮寧小黃姜組培脫毒及原原種繁育技術進行系統研究，旨在恢復和提高鎮寧小黃姜優良種性，建立鎮寧小黃姜脫毒種姜繁育技術體系，發展安順市特色優勢產業，助力鄉村振興。

1 培育脫毒試管苗

1.1 姜塊催芽及熱處理

選取皮色光亮、肉黃飽滿、無病蟲害的鎮寧小黃姜健康塊莖，沖洗干凈，用0.5%代森錳鋅浸泡30 min撈出晾干，放在高壓滅菌后的無土栽培基質中，置于光照培養箱內進行恒溫（28℃）催芽，保持無土栽培基質濕潤。姜芽萌動后，于40～45℃（8 h/d）高溫下熱處理1 個月。

1.2 再生試管苗離體誘導

①外植體消毒滅菌 選取光照箱中催芽熱處理后長2 cm 左右的壯芽，用自來水沖洗30 min 左右，在超凈工作臺上用75%酒精擦拭或浸泡30 s，再用10%次氯酸鈉（NaClO）滅菌15 min，無菌水沖洗4～5 次后用無菌濾紙吸干水分。

②外植體接種 將消毒滅菌后吸干水分的壯芽，在體視鏡下切取0.1～0.3 mm 的小黃姜莖尖分生組織，接種于以MS 為基本培養基，添加6-BA 2.0 mg/L 和NAA 0.1 mg/L 的培養基中誘導小黃姜再生植株。

③病毒檢測 將莖尖分生組織誘導的再生植株送至專業檢測機構對黃瓜花葉病毒（TMV）和煙草花葉病毒（CMV）進行檢測。

④脫毒試管苗增殖生根同步培養 將檢測無黃瓜花葉病毒（TMV）和煙草花葉病毒（CMV）、葉綠、無黃化的壯苗接種于MS+6-BA 2.5～3.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L 的培養基中進行增殖和生根同步培養，可有效簡化培養程序，減少接種工作量，縮短培養時間，降低培養成本。此方法與雷開榮[16]的研究一致。

脫毒試管苗培育各階段培養要求均一致。即培養室溫度為25～30℃，光照2 000 lx，12～16 h/d，培養基pH 值5.8～6.0。

圖1 微莖尖分化誘導培養

2 原原種繁育

2.1 脫毒試管苗煉苗

移栽前1 周將生根良好、達到入土條件的脫毒試管苗放在培養室外、散射光下封瓶煉苗1 d、開瓶煉苗3 d 或封瓶煉苗3 d、開瓶煉苗1 d，使試管苗適應外部環境，提高移栽成活率。

2.2 基質選擇與苗床制作

選用自配營養基質（無土栽培基質∶營養土=2∶1）進行移栽。移栽苗床采用廂床栽培，廂面寬1.8 m。移栽前30 d，在廂床底部鋪細土+1 000 kg/667 m2腐熟兔糞或牛糞，將其混勻后再平鋪40 cm 厚的自配營養基質（用1%甲醛、威百畝或棉隆消毒后使用）。

2.3 適期移栽

脫毒試管苗于3月下旬地溫回升后至6月中旬移栽。移栽前1 d 將廂面澆透水，清洗干凈試管苗根部的培養基，按照（12～15）cm×（40～50）cm 的株行距單株栽植于網室大棚中，栽后澆足定根水，加蓋塑料拱棚、遮陽網進行保溫、保濕、遮蔭。

2.4 成活期管理

試管苗移栽后15～20 d 新根開始生長，要求白天溫度不高于30℃，夜晚溫度不低于15℃。晴天強光照射或陰天中午時，應及時揭開網室和拱棚膜兩頭進行通風透氣，中午溫度過高時，利用噴灌淋水1 min 左右。移栽后7～10 d 內保持拱棚濕度在85%～90%，以后逐漸降低，適時澆水，經常保持基質相對濕度65%左右。30 d 以后根據試管苗長勢情況逐漸撤除拱棚膜，晴天強光照天氣加蓋遮陽網遮蔭，避免中午強光直射，分枝開始發生后即可逐步撤除遮陽網。

2.5 肥水管理

①追肥管理 小黃姜以地下塊莖為產品器官，試管苗根系較弱，忌偏施氮肥，注重氮磷鉀肥配合施用。試管苗新根開始發生時，以葉面噴施0.3%～0.5%磷酸二氫鉀+尿素水溶液+2%腐熟油餅對水淋施為主，7～10 d 1 次，連施3 次；試管苗分枝發生2個以上至立秋（8月7日左右）前，分枝發生較少，根系開始大量發生，以10%～15%的一桶天下有機水溶肥（高鉀型）或鉀富貴水溶肥+4%腐熟餅肥+1%腐植酸液肥淋施為主，7～10 d 1 次，連施3 次；立秋后分枝開始大量發生，姜塊迅速膨大，對鉀肥需求量增加，以10%氮磷鉀三元復合肥+5%硫酸鉀水溶液+4%腐熟餅肥+1%腐殖酸液肥淋施為主，連施3次；姜塊膨大后期看苗施肥，以5%硫酸鉀水溶液+4%腐熟餅肥淋施為主，長勢弱的追施2～3 次，長勢好的追施1～2 次，7～10 d 1 次。

②水分管理 小黃姜喜溫怕寒怕旱不耐澇，原原種生產中及時噴水，保證基質濕潤，避免長期干旱影響姜塊膨大。雨天須注意網室周圍排水防澇，忌陰雨天濕度過大，引起爛姜現象發生。

2.6 中耕培土

生姜屬淺根系作物，在封行前須適時結合追肥、中耕除草培土2～3 次，保護塊莖不露出地面，正常膨大。

2.7 病蟲害預防與防治

圖2 脫毒試管苗分化誘導培養

原原種繁育中，采取“以防為主，綜合防治”原則進行病蟲害預防與防治。脫毒試管苗抗病性強，在原原種繁育過程中無病害產生，在網室紗網被破壞的情況下會有姜螟蟲、地老虎、斜紋夜蛾等蟲害發生，可用1.5%精高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑1 000～1 500 倍液、15%辛硫磷乳液800～1 000 倍液等進行噴霧防治。

圖3 脫毒試管苗增殖和生根同步培養

2.8 適時收獲與貯藏

于霜降（10月23日左右）后立冬（11月7日）前選晴天收獲，晾半天后做好標記打包運輸至地窖貯藏，后熟完成后及時銷售，或作下一年脫毒原種生產用。

圖4 脫毒原原種繁育