抗凝劑物質對便攜式血糖儀比對測試結果的影響研究

王紅

糖尿病屬于發病率較高的慢性疾病之一,患者體內由于胰島素分泌不足或外周組織對胰島素不敏感引起的全身代謝性疾病,臨床上以持續的高血糖為特征。隨著病程的延長,持續的高血糖將會引起各種組織、臟器的長期損害、功能不全或衰竭［1］。根據糖尿病的發病機制不同可分為I 型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、妊娠糖尿病及其他類型糖尿病等多種類型,導致患者糖尿病腎病、視網膜病變及糖尿病足發生率較高［2］。世界衛生組織(WHO)規定,以血糖作為糖尿病主要診斷依據,是判斷病情、控制情況的主要指標［3］。當前,血糖常用的監測方法包括點式血糖監測、糖化血紅蛋白(HbA1c)監測、連續血糖監測等,且隨著醫療技術的不斷發展,便攜式血糖儀開始用于臨床,但是該監測方法必須建立血糖儀檢測質量保證體系,包括完善的室內質控與室間質評體系［4］。既往研究表明［5］：不同抗凝劑對血糖檢測存在一定的影響,且不同品牌即時檢驗(POCT)血糖儀在不同抗凝物質組成的基準物質比對中,測定值存在差異,導致測定結果不準確。本研究參考GB/T19634-2005 標準,制備低濃度、正常范圍、高濃度標本合計100 份,探討抗凝劑物質對便攜式血糖儀比對測試結果的影響,現報告如下。

1 材料與方法

1.1材料來源 根據中華人民共和國國家標準GB/T19634-2005 制備低濃度、正常范圍、高濃度血糖標本共100 份。本研究獲得倫理委員會批準,且血液標本采集均嚴格遵循要求制備,不同濃度的標本采用不同抗凝劑抗凝。

1.2儀器與設備 ①比對系統：日立全自動生化分析儀；②參比系統：拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS4 種便攜式血糖儀及配套的原裝試劑盒；全自動血糖檢測試劑(購自葡萄糖測定試劑盒,采用已糖激酶法監測)；4 種便攜式血糖配套試劑盒,均采用葡萄糖脫氫酶法測定；維生素C(VC)配制標準溶液10 g/L,分別加入上述已經調整濃度的低、中、高糖標本中。

1.3方法

1.3.1標本采集及血糖濃度測定 分別制備低濃度、正常范圍、高濃度標本共100 份。以肝素鋰、乙二胺四乙酸二鉀鹽(EDTA-K2)及氟化鈉作為抗凝物質,血糖濃度和樣本數：≤2.77 mmol/L 樣本4 份,2.78～4.44 mmol/L 樣本16 份,4.45～6.66 mmol/L 樣本20 份,6.67～11.10 mmol/L 樣本30 份,11.11～16.65 mmol/L 樣本16 份,16.66～22.20 mmol/L 樣本10 份,≥22.21 mmol/L樣本4 份。選擇健康體檢者,肝素鋰、EDTA-K2及氟化鈉作抗凝,用于抗干擾能力檢測分析。采集的血液標本充分混均后,每份平均分為3 管,10 ml/管。血糖濃度分別調整為低濃度(1.1～3.3 mmol/L)、正常范圍(11.1～16.7 mmol/L)、高濃度(18.1～22.2 mmol/L)標本［6,7］。

1.3.2血糖儀、生化分析儀檢測方法 ①血糖儀檢測：根據便攜式血糖儀說明書完成有關操作,每管標本充分混合后進行測定,每臺血糖儀均對100 份標本進行測定,用于評估便攜式血糖儀的精密度；②生化分析儀檢測：檢驗人員根據實驗項目標準化操作程序(SOP)相關文件完成標本的葡萄糖測定,標本離心后取血漿,并于30 min 內完成血糖水平測定,為了降低人為因素引起的誤差,每份標本均測定2 次,取平均值,上述所有操作均嚴格遵循儀器與試劑盒說明書完成［8］。

1.3.3便攜式血糖儀評價標準 參考《醫療機構便攜式血糖測定儀管理和臨床操作規范(試行)》的要求,對不同類型便攜式血糖儀和不同抗凝劑物質測定結果進行判斷。①準確度評價：當血糖濃度<4.2 mmol/L 時,至少95%檢測結果偏差在±0.83 mmol/L 范圍內；當血糖濃度≥4.2 mmol/L 時,至少95.0%檢測結果偏差在±20.0%范圍內。即每臺儀器檢測20 個標本中至少19 個結果在偏差允許范圍內,否則為比對試驗不通過或不合格［9］。②精密度評價：檢測標本濃度為9.1 mmol/L,CV≤7.5%為合格［10］。

1.4統計學方法 采用SPSS24.0 統計學軟件對數據進行處理。計量資料以均數±標準差()表示,采用t 檢驗,多組比較采用F 檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1不同類型便攜式血糖儀比對試驗通過率比較 采用拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀30 臺完成血糖儀試驗,30 臺便攜式血糖儀中3臺儀器未通過,通過率為90.0%,其中拜爾抗RO 通過率為100.00%,而韓國i-SENS 便攜式血糖儀通過率最低,為66.67%。見表1。

表1 不同類型便攜式血糖儀比對試驗通過率比較(臺,%)

2.2各便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測結果比較拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀對低濃度、正常范圍、高濃度標本的測定結果與生化分析儀比較差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 各便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測結果比較(,n=100)

表2 各便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測結果比較(,n=100)

注：與生化分析儀比較,aP>0.05

2.3抗凝劑物質對便攜式血糖儀比對測試結果的影響為了分析肝素鋰、EDTA-K2及氟化鈉不同類型抗凝劑物質對便攜式血糖儀測定結果的影響,通過不同血糖濃度下利用4 種便攜式血糖儀測定,結果表明：血糖濃度1.1～3.3 mmol/L、11.1～16.7 mmol/L、18.1～22.2 mmol/L 下拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS便攜式血糖儀采用肝素鋰、EDT-K2抗凝對血糖測定結果無影響；拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS便攜式血糖儀采用氟化鈉作為抗凝物質測定結果高于肝素鋰和EDTA-K2,差異具有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 抗凝劑物質對便攜式血糖儀比對測試結果的影響(,n=100)

表3 抗凝劑物質對便攜式血糖儀比對測試結果的影響(,n=100)

注：與氟化鈉比較,aP<0.05

2.4不同類型便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測結果的相關性分析 采用Pearson 相關性分析軟件,以生化分析儀作為因變量,便攜式血糖儀為自變量,完成線性回歸分析,拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS便攜式血糖儀的r 值分別為0.999、0.994、0.984、0.987。見表4。

表4 不同類型便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測結果的相關性分析

2.5不同類型便攜式血糖儀精密度分析 以便攜式血糖測定儀重復測定100 份標本進行計算,拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀CV 分別為1.49%～2.21%、1.84%～2.51%、5.29%～5.53%和5.13%～6.98%,以CV≤7.5%為標準,所有儀器均合格。見圖1。

圖1 不同類型便攜式血糖儀精密度分析

3 討論

近年來,隨著居民生活方式、飲食結構的改變,再加上勞動強度的降低,人均壽命的延長,使得糖尿病發生率呈上升趨勢,并成為世界各國越來越嚴重的公共衛生問題［11］。當前,血糖監測常用方法有以下幾種：①點式血糖監測：適用于血糖控制良好且穩定患者；②連續血糖監測：適用于新發糖尿病、治療過程中出現血糖波動、開始新的或調整舊的治療方案,如需要改變飲食、用藥品種及其劑量等；③HbA1c 監測：用于患者本項目監測3 個月平均血糖水平的監測與評價。同時,血糖監測時間和頻率亦是糖尿病管理的重要組成部分,其結果有助于評估糖尿病患者代謝紊亂程度,并制定針對性的降糖方案,亦可反映降糖治療效果,指導臨床治療。

目前,臨床上主要利用血糖儀完成毛細血管血糖檢測,包括患者自我血糖監測(SMBG)及在醫院內POCT 血糖檢測,均為血糖監測的基本形式［12］。住院患者院內血糖監測可通過實驗室生化分析儀完成靜脈血漿或血清葡萄糖檢測,但是更多患者的血糖檢測通過快速、簡便、準確的POCT 方法完成。因此,加強對便攜式血糖儀的規范性管理,保證檢測數據的有效性,對指導臨床治療具有重要的意義。本研究中,30 臺便攜式血糖儀中3 臺儀器未通過,通過率為90.0%,提示便攜式血糖儀用于血糖檢測的通過率相對較高,基本能滿足患者血糖監測所需。《醫療機構便攜式血糖檢測儀管理和臨床操作規范》中指出,血糖儀屬于PCOT設備,POCT 方法只能用于糖尿病患者的血糖監測。患者血氧類型、采血部位、血氧紅細胞壓積和多種內源性、外源性物質等均會對便攜式血糖儀檢測結果產生影響。血糖儀準確性因素包括便攜式血糖儀測量結果與實驗室血糖檢測結果的一致程度,同一樣本多次重復測量后一致程度［13］。

血糖是細胞進行正常代謝及維持器官正常的必需條件,臨床上血糖測定的主要目的是了解患者體內神經激素的調節是否相對平衡,為臨床進一步的診斷、觀察治療效果、判斷病情發展提供參考［14］。因此,葡萄糖測定結果的準確性將直接影響臨床診斷。但是,血液離體后由于紅細胞能存活較長的時間,存活的紅細胞會不斷消耗血漿中的葡萄糖作為能量,使得血液中的葡萄糖降低。為了保證血糖檢測結果的準確性,減少糖尿病患者的誤診和漏診,血糖標本有必要使用能抑制糖分解的抗凝劑。肝素鋰、EDTA-K2及氟化鈉均為臨床上常用的抗凝劑,但是不同抗凝劑原理存在差異性。肝素是一種含硫酸基團的黏多糖,其抗凝機制是與抗凝酶Ⅱ一起,在低濃度下抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3 之間的作用,并能加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶,從而阻止凝血酶形成。而EDTA 則是通過與水相中的鈣離子形成穩定螯合物,阻止血液的凝固。氟化鈉亦是臨床上常用的抗凝劑,具有抗凝和防止血糖酵解雙重作用。氟化鈉能在一定程度上抑制醌蛋白葡萄糖脫氫酶的生物學活性,導致血糖測定儀測定的微電流強度降低,從而對血糖值測定結果產生影響。本研究中,肝素鋰、EDTA-K2抗凝對拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀檢測1.1～3.3 mmol/L、11.1～16.7 mmol/L、18.1～22.2 mmol/L 血糖的結果無影響；而采用氟化鈉抗凝的拜爾抗RO、強生穩豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀血糖測定結果偏高,從本研究結果看出,抗凝劑物質會對便攜式血糖儀測定結果產生干擾,且氟化鈉抗凝對血糖檢測結果的影響最大。張霞等［15］的研究表明：氟化鈉對采用葡萄糖脫氫酶法的便攜式血糖儀測定結果產生干擾,能在一定程度上影響疾病的診療。因此,便攜式血糖測定儀測定患者血糖時,不宜使用氟化鈉進行血液抗凝,盡可能采用EDTA-K2及肝素抗凝,降低對檢測結果產生干擾。

綜上所述,拜爾抗RO、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀的檢測結果一致性較好,而國產強生穩豪的檢測結果受到氟化鈉抗凝物質的影響,但是均與日立全自動生化分析儀結果存在強相關性,臨床檢測時應根據需求選擇合適的便攜式血糖儀,降低內外源性干擾物的影響。