潰瘍性結腸炎患者血清炎癥因子、免疫球蛋白水平與腸道菌群的關系分析

李 燕

（包頭市中心醫院檢驗科，內蒙古 包頭 014040）

潰瘍性結腸炎是非特異性慢性腸道炎癥性疾病，病理表現為腸道黏膜損傷、潰瘍、糜爛，臨床表現為腹痛、腹瀉、里急后重等癥狀，長期的腸道炎癥反應給患者身體造成沉重負擔，影響患者生活質量。潰瘍性結腸炎影響因素眾多，其中遺傳因素、環境、免疫異常、腸道微生態與潰瘍性結腸炎關系密切[1]。正常情況下人體腸道內存在種類多樣的細菌群體，共同參與腸道內物質的代謝、分解，維持腸道內免疫系統的穩定，腸道菌群一旦失衡會破壞腸黏膜保護屏障，造成機體免疫力低下，引發全身性的炎癥反應，加重病情[2]。有研究顯示，機體免疫系統失衡、細胞炎癥反應及腸道菌群紊亂是誘發潰瘍性結腸炎的關鍵病理過程，也是潰瘍性結腸炎反復發作的重要原因，甚至是癌癥轉化的重要機制[3]。因此，本研究旨在分析潰瘍性結腸炎患者血清炎癥因子、免疫球蛋白水平變化，并分析上述指標與腸道菌群的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析包頭市中心醫院2020年1月至2021年12月收治的52例潰瘍性結腸炎患者的臨床資料，按照疾病嚴重程度分為緩解期組（32例）、活動期組（20例），另選取同期于院內進行體檢的62例健康人群的體檢資料作為健康組。緩解期組中男、女患者分別為17、15例；年齡28～60歲，平均（48.28±6.45）歲；病程1～3年，平均（2.12±0.36）年。活動期組中男、女患者各10例；年齡28～61歲，平均（48.26±6.43）歲；病程1～4年，平均（2.14±0.35）年。健康組中男性、女性分別為32、30例；年齡28～61歲，平均（48.25±6.41）歲。比較3組研究對象的年齡、性別一般資料，差異無統計學意義（P＞0.05），組間可進行比較。診斷標準：將《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見（2018年·北京）》[4]中的相關標準作為潰瘍性結腸炎的診斷依據，且經結腸鏡檢查確診。納入標準：與上述診斷標準一致者；言語組織能力正常者；近期未服用益生菌制劑、抗生素者等。排除標準：嚴重免疫系統疾病者；腎臟、心臟、肝臟功能不全者；精神狀態異常者等。本研究方案已通過包頭市中心醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 檢測方法①血清炎癥因子、免疫球蛋白檢測：在所有研究對象空腹時進行采血操作，取5 mL靜脈血，以3 000 r/min的轉速，離心10 min獲得血清，血清白細胞介素-33（IL-33）、單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）、高遷移率族蛋白 B1（HMGB1）、腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）水平檢測方法均為酶聯免疫吸附實驗法，血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）水平檢測方法均為免疫比濁法。②腸道菌群檢測：取所有研究對象新鮮糞便標本1 g放入厭氧菌稀釋液中，通過振蕩器（山東博科再生醫學有限公司，型號：OLB-100C）震蕩搖勻后，采用0.9%氯化鈉溶液按照10倍連續法稀釋，依次在不同稀釋度下取標本液50 μL，在對應培養基上培養，37 ℃厭氧培養箱培養厭氧菌48 h，37 ℃普通溫箱培養需氧菌24 h，使用菌落計數器（杭州澤析生物科技有限公司，型號：ZX-100）統計乳酸桿菌、雙歧桿菌、腸球菌、大腸埃希桿菌數量。

1.3 觀察指標①比較健康組、緩解期組、活動期組研究對象血清 IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6、IgG、IgM、IgA水平。②比較健康組、緩解期組、活動期組研究對象腸道菌群數量，包括乳酸桿菌、雙歧桿菌、腸球菌、大腸埃希桿菌。③分析血清IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6、IgG、IgM、IgA 水平與乳酸桿菌、雙歧桿菌、腸球菌、大腸埃希桿菌的相關性。

1.4 統計學方法使用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析，使用S-W法檢驗計量資料數據是否服從正態分布，對于符合正態分布的計量資料以()表示，3組間比較采用F檢驗，以Pearson相關性分析法分析血清IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6、IgG、IgM、IgA 水平與腸道菌群數量的相關性。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組研究對象血清炎癥因子、免疫球蛋白水平比較與健康組比，緩解期組、活動期組患者血清IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6 水平均呈逐漸升高趨勢，IgG、IgM、IgA水平均呈逐漸降低趨勢，組間兩兩比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 3組研究對象血清炎癥因子、免疫球蛋白水平比較( )

表1 3組研究對象血清炎癥因子、免疫球蛋白水平比較( )

注：與健康組比，*P＜0.05，與緩解期組比，#P＜0.05。IL-33：白細胞介素-33；MCP-1：單核細胞趨化蛋白-1；HMGB1：高遷移率族蛋白B1；TNF-α：腫瘤壞死因子-α；IL-6：白細胞介素-6；IgG：免疫球蛋白G；IgM：免疫球蛋白M；IgA：免疫球蛋白A。

組別 例數 IL-33(ng/L) MCP-1(μg/L) HMGB1(μg/L) TNF-α(μg/L)健康組 62 215.95±61.29 103.52±12.26 2.51±0.35 6.97±1.16緩解期組 32 253.64±58.63* 145.82±16.57* 8.96±1.84* 9.65±2.32*活動期組 20 341.88±103.17*# 181.42±25.62*# 17.85±4.22*# 16.54±4.21*#F值 24.857 191.915 458.898 131.497 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05組別 例數 IL-6(μg/L) IgG(g/L) IgM(g/L) IgA(g/L)健康組 62 135.05±7.45 11.95±1.28 1.39±0.42 1.75±0.36緩解期組 32 163.25±8.76* 10.12±1.36* 1.21±0.31* 1.58±0.30*活動期組 20 193.11±10.42*# 8.37±1.45*# 1.03±0.28*# 1.34±0.29*#F值 393.604 60.468 7.855 11.985 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 3組研究對象腸道菌群數量比較與健康組比，緩解期組、活動期組患者腸道乳酸桿菌、雙歧桿菌數量均呈逐漸降低趨勢；腸球菌、大腸埃希桿菌數量均呈逐漸升高趨勢，組間兩兩比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表2。

表2 3組研究對象腸道菌群數量比較(CFU/g， )

表2 3組研究對象腸道菌群數量比較(CFU/g， )

注：與健康組比，*P＜0.05，與緩解期組比，#P＜0.05。

組別 例數 乳酸桿菌 雙歧桿菌 腸球菌 大腸埃希桿菌健康組 62 9.32±0.75 8.93±0.66 4.64±0.58 7.42±1.13緩解期組 32 8.21±0.25* 7.46±0.68* 6.86±0.53* 8.95±1.08*活動期組 20 6.18±0.89*# 6.35±0.73*# 7.56±0.47*# 10.65±1.06*#F值 164.253 127.167 300.976 69.866 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.3 血清炎癥因子水平、免疫球蛋白與腸道菌群的相關性經Pearson相關性分析發現，血清IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6與腸道乳酸桿菌、雙歧桿菌數量均呈負相關，與腸球菌、大腸埃希桿菌數量均呈正相關；血清IgG、IgM、IgA與腸道乳酸桿菌、雙歧桿菌數量均呈正相關，與腸球菌、大腸埃希桿菌數量均呈負相關，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表3。

表3 血清炎癥因子、免疫球蛋白水平與腸道菌群的相關性

3 討論

潰瘍性結腸炎是一種自身免疫性疾病，通過長期的用藥、飲食調節可以控制病情，但其發病率在近年來呈不斷上升的趨勢，若不積極治療可誘發腸梗阻、結腸癌等疾病，危害患者生命健康[5]。

潰瘍性結腸炎患者腸道菌群失衡，腸道細菌進入人體微循環，引起自身免疫異常和全身炎癥反應，造成免疫級聯反應，致使炎癥持續反復發作。本研究結果顯示，健康組、緩解期組、活動期組研究對象血清IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6水平依次升高，分析其原因可能為IL-33、IL-6是重要的促炎因子，具有多種生物活性，對急相反應蛋白的合成有誘導作用，通過破壞腸上皮細胞屏障功能，損傷黏膜，引發炎癥反應，導致潰瘍性結腸炎拖延不愈；TNF-α是炎癥啟動因子，參與細胞免疫炎癥反應，在受損腸黏膜中呈高水平表達，其水平越高代表潰瘍性結腸炎病變越嚴重；MCP-1屬于趨化因子，對炎癥介質的表達起到促進作用；另外，HMGB1能夠激活巨噬細胞釋放炎癥因子，促進TNF-α、IL-33、IL-6的分泌，在潰瘍性結腸炎發病中發揮重要作用，能夠和下游受體相互作用，形成炎癥反應及免疫應答，造成腸道黏膜炎癥反應[6-7]。本研究結果顯示，健康組、緩解期組、活動期組研究對象乳酸桿菌、雙歧桿菌數量依次降低，腸球菌、大腸埃希桿菌數量依次升高，分析其原因可能為，結腸是消化系統中細菌存在非常密集的地方，正常情況下腸道黏膜是機體的保護屏障，腸道菌群處在一個動態平衡的狀態，但腸道內同時存在著多種致病菌，當免疫力下降時，可導致致病菌繁殖，并引起機體感染，出現乳酸桿菌、雙歧桿菌等有益菌數量減少，有害菌增多，造成局部炎癥反應，故腸道菌群紊亂與潰瘍性結腸炎發病密切相關[8]。本研究結果還顯示，健康組、緩解期組、活動期組研究對象IgG、IgM、IgA水平依次降低，分析其原因可能是，潰瘍性結腸炎患者腸道菌群失衡，腸道黏膜屏障保護功能減退，造成細菌無序繁殖，損傷腸道內皮細胞，形成炎癥因子釋放 - 腸道菌群失調 - 免疫功能異常的惡性循環，加重患者病情[9-10]。

潰瘍性結腸炎患者血清IL-33、TNF-α等炎癥因子的過量分泌，破壞腸黏膜屏障，乳酸桿菌、雙歧桿菌等益生菌數量減少，腸球菌、大腸埃希桿菌數量增加，腸道菌群平衡被破壞，導致腸道功能障礙，加重病情[11-12]。本研究結果顯示，血清IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6與腸道乳酸桿菌、雙歧桿菌數量均呈負相關，與腸球菌、大腸埃希桿菌數量均呈正相關；血清IgG、IgM、IgA與乳酸桿菌、雙歧桿菌數量均呈正相關，與腸球菌、大腸埃希桿菌數量均呈負相關，原因在于，潰瘍性結腸炎患者腸內細菌可激活淋巴細胞，引發不同的免疫病理損傷，致使免疫球蛋白出現異常表達，使機體的免疫功能受到影響，IgG、IgM、IgA水平隨之發生變化，表明潰瘍性結腸炎患者機體血清炎癥因子、免疫球蛋白表達水平均與腸道菌群失衡密切相關，且隨著潰瘍性結腸炎患者嚴重程度的改變，血清IL-33、MCP-1、HMGB1、TNF-α、IL-6水平也會明顯升高，造成腸道菌群紊亂[13]。

綜上，潰瘍性結腸炎患者出現明顯的血清炎癥因子水平升高，免疫球蛋白水平降低，以及腸道菌群失衡現象，且和病情嚴重程度相關；血清炎癥因子、免疫球蛋白水平與腸道菌群均存在一定相關性，臨床上可通過對潰瘍性結腸炎患者血清炎癥因子、免疫蛋球蛋白水平、腸道菌群進行檢測以評估患者病情，并制定針對性干預方案，值得臨床推廣應用。