基于網絡藥理學及分子對接技術探討紅花治療肺動脈高壓的作用機制*

張雯，唐雅倫，叢曉東，何沂，王冰，金沐陽，周瑞玲，張瓊

中國中醫科學院西苑醫院，北京 100091

肺動脈高壓(pulmonary hypertension，PH)是一類以肺動脈壓力升高、肺血管阻力增加、肺血管重塑為主要特征，進而導致右心衰竭和死亡的難以逆轉和治療的疾病[1]。流行病學調查顯示，全球約有1%的人口受到PH的困擾，其中死于右心衰竭的PH患者高達70%，且呈逐年上升趨勢，該病的高殘死率嚴重降低患者生活質量，易給社會造成巨大經濟負擔[1-2]。近年來，多數學者的研究指出，PH發病與炎癥因子、巨噬細胞以及多種離子通道(K+通道、Ca2+通道)相關，可能涉及炎性反應、氧化應激、能量代謝、離子通道等多個途徑，這些復雜機制導致本病無特效治療藥物及公認治療準則，且具有不良預后[3-4]。因此，探究PH的發病機制及有效干預措施具有重要意義。

中醫藥防治肺動脈高壓具有多靶點、整體雙向調節、毒副作用低等優勢[5]。根據PH臨床表現，中醫將其歸屬于“肺脹”“喘證”“水腫”等范疇，肺絡虛損、毒瘀損絡是其致病關鍵病機[6]。本課題組前期基于毒瘀理論設計以紅花為君藥的復方治療慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD，簡稱慢阻肺)并發肺動脈高壓患者的隨機對照試驗，證實該方在改善患者臨床癥狀、增加活動耐力、提高生活質量上有顯著作用，且無不良反應[6]。中藥紅花系菊科植物紅花的干燥花，始載于《開寶本草》，有活血化瘀、通經止痛等功效。現代藥理學研究表明，紅花具有抗炎、調節免疫、抗氧化、擴張血管等作用。近年來，紅花及其提取物已被廣泛應用于肺動脈高壓、肺源性心臟病、慢性阻塞性肺疾病、肺纖維化等心肺系統疾病，療效甚佳[7]，但紅花治療肺動脈高壓的作用機制尚未完全闡明。網絡藥理學是大數據時代中信息科學和醫學生命科學交叉形成的創新突破口，更是中醫藥領域用于揭示藥物系統性藥理機制、探索潛在信號通路、指導新藥開發的重要工具[8]。本研究基于網絡藥理學及分子對接技術，以紅花為研究對象，預測其主要活性化學成分、治療PH潛在關鍵靶點、可能作用的信號通路，以期為揭示紅花治療PH作用機制提供一定參考。

1 資料與方法

1.1 紅花化學成分及靶點篩選應用中藥系統藥理學數據庫與分析平臺(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform，TCMSP，http：//tcmspw.com/tcmsp.php)[9]、本草組鑒數據庫(HERB，http：//drug.ac.cn/)、中醫綜合數據庫(traditional Chinese medicine integrated database，TCMID，http：//bidd.group/TCMID/)、中國知網(China national knowledge infrastructure，CNKI，https：//www.cnki.net/)檢索篩選以獲取中藥紅花的活性化學成分。TCMSP數據庫篩選條件設置為：口服生物利用度(oral bioavailability，OB)≥30%和類藥性(drug-likeness，DL)≥0.18。在PubChem(https：//pubchem.ncbi.nl.nih.gov)中獲得紅花活性成分的相關化學結構式(Canonical SMILES)，將其導入Swiss Target Prediction數據庫(http：//www.swisstargetprediction.ch/)預測相關靶標，并在UniProt數據庫(https：//ebi14.uniprot.org/)[10]對相關靶標名稱進行標準化。

1.2 PH相關靶點篩選在GeneCards數據庫(https：//www.genecards.org/)、DrugBank數據庫(https：//go.drugbank.com/)、TTD數據庫(https：//go.drugbank.com/)、在線人類孟德爾遺傳數據庫(online mendelian inheritance in man，OMIM，http：//omim.org)、DisGeNET數據庫(https：//www.disgenet.org/)中檢索PH疾病靶標，以相關性分值Relevance score>10作為限定條件，經篩選、整合、去重后得到PH疾病靶標。

1.3 紅花活性成分抗PH的潛在靶點蛋白相互作用(protein-protein interaction，PPI)網絡構建與分析在STRING數據庫(https：//string-db.org)依次分別導出紅花活性成分靶點及PH疾病靶標的相互作用網絡，設定最低相互作用閾值(highest confidence)≥0.9，物種設置為人類相關(Homo sapiens)，隱藏孤立節點，將以上兩個網絡作用圖以tsv格式導入Cytoscape3.7.2軟件[11]，然后整合、美化，得到紅花抗PH的所有潛在交集靶點的PPI網絡。按照度中心性(degree)、中間性中心性(betweenness centrality)、鄰近度中心度(closeness centrality)均大于平均值，平均最短路徑長度(average shortest path length)小于平均值的條件在PPI網絡中篩選紅花治療PH的潛在核心靶點。

1.4 基因本體(gene ontology，GO)功能富集分析和京都基因與基因組百科全書(Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG)信號通路富集分析應用DAVID數據庫(https：//david.ncifcrf.gov/)及Metascape數據庫(https：//metascape.org/)對潛在核心靶點進行GO功能富集分析和KEGG信號通路富集分析。查閱相關文獻[12-13]，結合兩位正高級專家意見，依據P值及富集分數(enrichment)大小篩選生物過程和信號通路，并導入生物信息學工具(http：//www.bioinformatics.com.cn/)，繪制氣泡圖和柱狀圖。在KEGG(https：//www.genome.jp/kegg)網站導出關鍵信號通路圖。為了更清楚展示紅花治療PH各組分間關系，根據以上通路富集結果，回溯PPI網絡中紅花治療PH的所有交集靶點，補充相關信息，構建“紅花-活性成分-靶點-通路-PH”網絡。

1.5 紅花活性成分與潛在靶點分子對接根據PPI網絡及KEGG通路分析結果，篩選出度值靠前的活性化學成分、關鍵通路核心靶點。在PubChem數據庫(https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)、RCSB PDB數據庫(https：//www.rcsb.org/pdb/)[14]依次下載獲取藥物活性成分對應的配體化合物結構及靶蛋白對應的活性位點三維晶體結構。利用PyMOL軟件，通過加氫、計算電荷、去除目標蛋白多構象、轉化格式等來處理3D結構文件后在AutoDock Vina 4.6.2軟件進行分子對接，并保留結合能絕對值最高及相對穩定的構象，繪制3D結合模式圖[15-16]。

2 結果

2.1 紅花活性成分及相關靶點及PH疾病靶點Swiss Target Prediction預測分析后，共獲取紅花成分相關靶點607個。合并TTD、DrugBank、DisGeNET、GeneCards、OMIM五大數據庫，共得到1 613個與PH相關的靶基因。經數據庫篩選及文獻補充后，共得到紅花的主要活性成分20種，見表1。

表1 紅花主要活性成分信息表

2.2 PPI網絡經STRING數據庫及Cytoscape軟件分析、合并、美化后，得到了紅花抗PH的所有潛在交集靶點的PPI網絡，見圖1。拓撲分析結果顯示，PPI網絡包括175個節點，1 748個相互作用關系，聚類系數為0.395，度值中位數及平均數依次為12和3.65，平均相鄰節點數為9，平均最短路徑中位數為2.879。綜合以上參數，對PPI網絡進行進一步篩選，最終得到關聯度最高的48個核心靶點，這些核心靶點可能為紅花抗PH的關鍵靶蛋白，見圖2。

圖1 紅花治療PH的潛在交集靶點PPI網絡圖

圖2 紅花治療PH的核心靶點PPI網絡圖

2.3 KEGG信號通路富集分析結果及GO功能富集分析結果KEGG富集分析共得到信號通路144條(P<0.05)。48個核心靶點主要參與NOD樣受體、C型凝集素受體、Janus激酶(janus kinase，JAK)/信號轉導與轉錄激活因子(signal transducer and activator of transcription，STAT)信號通路等免疫相關信號通路，絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositide 3-kinase，PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)等炎癥相關信號通路，脂質和動脈粥樣硬化、黏著斑、松弛素等心血管相關信號通路及晚期糖基化終末產物(advanced glycosylation end products，AGEs)-AGEs受體(receptor of AGEs，RAGE)、Rap1等代謝相關信號通路。保留P值及富集分數靠前的20條通路，以氣泡圖形式可視化，見圖3。其中NOD樣受體信號通路如圖4所示。補充與該20條富集通路相關的活性成分及靶點信息，得到“紅花-活性成分-靶點-通路-PH”網絡圖，見圖5，圖中紅色三角形代表藥物紅花，粉色菱形代表前20條信號通路相關的活性成分，黃色倒箭頭形代表前20條信號通路相關的靶點，紫色菱形代表前20條信號通路，紫色三角形代表疾病PH。

圖3 KEGG通路分析氣泡圖

注：圖中紅色節點為紅花治療PH的潛在靶點；綠色節點為通路中的相關靶點

GO功能分析共獲得54個條目(P<0.05)，包括生物過程(biological process，BP)20條、細胞組分(cellular component，CC)14條及分子功能(molecular function，MF)20條，見圖6，即紅花治療PH可能涉及對機械刺激的反應(response to mechanical stimulus)、對活性氧反應(response to reactive oxygen species)、調節細胞對壓力的反應(regulation of cellular response to stress)、平滑肌細胞增殖的調節(regulation of smooth muscle cell proliferation)等生物過程，有黏著斑(focal adhesion)、囊泡(vesicle lumen)、線粒體外膜(mitochondrial outer membrane)等細胞成分參與，影響蛋白絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶活性(protein serine/threonine/tyrosine kinase activity)、激酶綁定(kinase binding)、蛋白結構域特異性結合(protein domain specific binding)、腫瘤壞死因子受體結合(tumor necrosis factor receptor binding)等分子功能。

圖6 GO功能分析條目圖

2.4 分子對接結果分子對接是一項通過算法計算模擬給定靶點蛋白質和配體小分子發生的物理化學反應，從而達到預測兩者結合模式及親和力的新型研究技術[17]。配體和受體結合的構象穩定性稱為結合能(kcal·mol-1)，結合能絕對值大于0 kcal·mol-1則具有結合位點且可自發結合，絕對值大于5 kcal·mol-1則有較好的活性結合位點，且結合親和力高。本研究選取的10個靶點分別是PPI網絡中度值排名前4位的靶點原癌基因酪氨酸蛋白激酶SRC(proto-oncogene tyrosine-protein kinase Src，SRC)、信號傳導及轉錄激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)、絲裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1，MAPK1)、MAPK3及NOD樣受體通路中其它度值排名靠前的關鍵靶點，如熱休克蛋白90a(heat shock protein HSP 90-alpha，HSP90AA1)、NOD樣受體家族的吡啶結構域 3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3，NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1，CASP1)、白細胞介素-1β(interleukin-1 beta，IL-1β)、B淋巴細胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2，BCL2)、RELA。對接配體化合物為“紅花-活性成分-靶點-通路-PH”網絡圖中度值排名靠前的7位，MOL ID依次為MOL002694、MOL002714、MOL002719、MOL002680、MOL002757、MOL002690、MOL002776。結果顯示，紅花大部分活性成分與靶標有較強結合能力，結合構象穩定，其中結合能絕對值最高可達10.4 kJ·mol-1，為羥基紅花黃色素A(MOL002690)與NLRP3，此組合具有8種結合模式，最高可含7個氫鍵連接。綜合分析表明，紅花的活性成分羥基紅花黃色素A、黃芩苷(MOL002776)和毛莨黃素(MOL002680)可能通過作用靶點NLRP3、HSP90AA1、IL-1β、MAPK3發揮抗PH作用。見圖7、圖8。

圖7 紅花活性成分與關鍵靶點分子對接結果熱圖

3 討論

本課題組前期曾對197例COPD并發PH的住院患者進行檢驗指標分析，發現C-反應蛋白、白細胞計數、中性粒細胞百分比、纖維蛋白原濃度、D-二聚體等炎癥因子和凝血指標都具有異常升高趨勢，患者同時存在炎癥和高凝狀態，且這類患者中醫證型分布主要以毒瘀互結為主。基于此，本團隊認為“毒瘀損肺”是COPD相關PH形成的關鍵病機，治療上以清熱解毒、活血化瘀為法，可達到達抗炎、擴張血管、抗凝血等作用[18-21]。目前多項研究已經證實，解毒祛瘀中藥具有很好的抗炎作用，能夠減輕急性肺損傷的肺水腫，提高動脈氧分壓，減少肺部中性粒細胞浸潤。張瓊教授結合臨床PH診治經驗及現代藥理研究，擬方“解毒祛瘀方”用于治療COPD并發PH患者發現，該方在改善患者臨床癥狀、增加活動耐力、提高生活質量上有顯著作用，且無不良反應，具有一定的研究意義[6]。

紅花為“解毒祛瘀方”的君藥，味辛性溫，《本草綱目》言其“活血、潤燥、止痛、散腫、通經”，具有活血通經、散瘀止痛之功效。藥理學研究顯示，紅花有效成分具有擴張血管、改善微循環狀態、降血壓、消炎、增強免疫、調節體內微量元素水平等作用，臨床應用廣泛[7]。多項臨床研究顯示，紅花及其多種制劑在治療PH上有顯著作用，可減輕氣道慢性炎癥狀態，降低肺血管重塑，調節肺動脈壓力[22-25]。本課題組前期研究及目前多項實驗皆表明，紅花治療PH具有顯著優勢及良好前景。基于以上基礎，本研究運用網絡藥理學方法篩選紅花治療PH的可能活性化學成分、潛在作用靶點及相關信號通路，并采用分子對接技術預測蛋白-配體復合物的結合模式及親和力，以期為后續紅花治療PH的物質基礎研究及機制研究提供一定的理論基礎和參考依據。

網絡分析及分子對接結果顯示，紅花抗PH的主要活性成分涉及羥基紅花黃色素A、黃芩苷、毛莨黃素、黃芩素和6-羥基柚皮素等，作用于NLRP3、CASP-1、IL-1β、RELA、HSP90AA1、MAPK3、MAPK1、SRC等關鍵靶點，經黏著斑、囊泡、線粒體外膜等細胞成分，參與對外界刺激如機械刺激、活性氧反應、細胞應激反應、肺血管平滑細胞增殖等生物學過程，調控蛋白絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶活性、激酶綁定、蛋白結構域特異性結合、腫瘤壞死因子受體結合等分子功能，調節NOD樣受體、C型凝集素受體、脂質和動脈粥樣硬化、MAPK等信號通路，發揮抗PH作用。

根據世界衛生組織和歐洲呼吸病協會(European Respiratory Journal)指南，PH定義為靜息狀態下平均肺動脈壓(mean pulmonary artery pressure，mPAP)≥25 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)或肺動脈收縮壓(systolic pulmonary artery pressure，sPAP)≥30mm Hg或活動狀態下mPAP≥30mm Hg，是一種罕見而難以治愈的慢性肺血管病變，5年病死率可達53.6%[1-2]。近年大量研究發現，單純抗血管內皮障礙、舒張血管來治療PH的遠期獲益并不顯著，而炎癥作為判斷PH的新指標，已逐漸在醫學界得到廣泛重視[26]。肺血管內炎癥反應是引發肺動脈高壓肺血管重塑的關鍵環節。NOD樣受體家族的吡啶結構域 3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3，NLRP3)所形成的模式識別受體是迄今為止特征最豐富的蛋白復合物，其過度激活狀態下可調節下游IL-1β、IL-6、IL-18等炎性因子分泌，導致PH模型大鼠肺組織發生血管內皮損傷，聚集大量免疫細胞及炎性細胞浸潤，引起線粒體功能異常，誘發肺動脈平滑肌細胞增殖和凋亡[27-29]。多項臨床及動物模型研究證據表明，炎癥持續存在于PH整個病理進程中，促炎因子水平直接影響PH患者血流動力學參數，更是預測患者住院、甚至死亡的重要生物標志物[30]。因此，調節PH患者炎癥反應，認識重要炎癥調節因子NLRP3在PH中的病理過程可能為抑制炎癥聯級反應、減慢疾病發展進程、治療PH提供思路及策略。

本研究KEGG網絡中與NLRP3相關的NOD樣受體通路顯示，K+外流、細胞外高濃度的腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine-triphosphate，ATP)、活性氧(reactive oxygen species，ROS)等內源性損傷相關分子模式及腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor，TNF)、IL-1β等細胞促炎因子，皆可構成啟動信號識別NF-κB、激活子蛋白-1(activator protein 1，AP-1)。其中RELA屬NF-κB最重要功能亞基，是一種多效性轉錄因子，參與細胞炎癥、免疫、凋亡等多種生物過程，可直接刺激并促進NLRP3炎性小體的組裝[31]。NLRP3炎性小體結構由傳導器NLRP3、效應器CASP-1前體及接頭蛋白凋亡相關斑點樣蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC)共同組成，其中HSP90AA1作為一種具有分子伴侶作用的小分子熱休克蛋白，常在NLRP3轉錄過程中誘導產生，可防止底物蛋白變性。炎性小體通過引起Caspase-1前體自動剪切、活化、成熟，進而加工裂解IL-1β前體和IL-18前體為有活性的促炎性因子IL-1β和IL-18，以促進下游炎性反應。CASP-1是一種含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶，活化后可裂解經典和非經典炎癥小體共有的關鍵下游效應蛋白gasdermin D(GSDMD)，引起細胞焦亡，還可直接刺激大量促炎性細胞因子的釋放。Villegas等[32]研究表明，抑制PH模型小鼠體內巨噬細胞中NLRP3炎性小體的激活，可直接改善其肺部炎癥，降低肺動脈壓力。由此可見，NLRP3炎癥小體通過炎癥反應參與PH的發病。肺血管重塑是PH患者的主要病理基礎，肺血管內皮及平滑肌細胞的惡性增殖、炎性細胞的浸潤是造成肺血管阻力增加、血管重塑的主要原因。已有研究證據顯示[33-35]，CASP-1的上調可觸發肺動脈血管內皮細胞焦亡，還可促進IL-1β等促炎因子的釋放，進而引起血管內皮功能障礙，誘發缺氧型PH；而CASP-1基因的敲除可直接減弱PH模型小鼠肺動脈的肌化及肺血管平滑肌細胞的惡性增殖；敲除白細胞介素1受體I型(interleukin 1 receptor type I，IL-1R1)基因后，IL-1β介導的肺血管平滑肌細胞增殖亦得到明顯抑制。因此，NLRP3炎性小體、CASP1及IL-1β等可能成為抗PH較為有前景的靶點，應用其相關抑制劑治療PH可能對PH患者臨床癥狀的改善、遠期存活率的提高有積極作用。

Maneesai等[36]研究顯示，紅花提取物具有一定的降壓作用，可協同卡托普利等藥物增強降血壓效果。羥基紅花黃色素A作為紅花提取物的主要成分之一，已有多項研究證實其在肺動脈高壓治療上的優勢，特別是針對COPD相關性PH。Li等[37]通過將羥基紅花黃色素A用于PH模型大鼠，觀察并評估其肺動脈壓力變化、肺動脈重塑及肺動脈平滑肌細胞增殖等情況，發現羥基紅花黃色素A可顯著降低PH大鼠平均右心室收縮壓，并抑制肺動脈平滑肌細胞增殖，進而減弱肺動脈血管重塑及右心室重構，且具有一定的濃度依賴性。黃芩苷是一種類黃酮化合物，現代藥理顯示其具有抗炎、抗氧化、降血壓、抗變態反應及抑制血管平滑肌增殖等活性，被廣泛應用于肺部及心血管疾病的研究[38]。吳佩亮等[39]通過肺動脈高壓小鼠體內外實驗研究證實，黃芩苷能減輕PH小鼠的肺動脈壓力，通過顯著抑制肺動脈平滑肌細胞的增殖、遷移及侵襲能力，降低其細胞增殖相關蛋白表達水平而改善低氧誘導的PH肺動脈血管重塑。更有研究進一步證實黃芩苷降低肺動脈壓力、減輕肺損傷及改善右心室肥厚等與NF-κB信號傳導下調相關[40]。PH患者肺血管重構多與肺動脈各種細胞惡性增殖相關，內皮細胞凋亡也是其發展的重要因素。黃芩素是一種黃酮類化合物，具有抑制肺動脈平滑肌細胞增殖的生物活性。朱迪穎等[41]運用黃芩素治療PH大鼠后觀察其肺血管壁厚度，證實黃芩素具有顯著抗PH作用，且可能與抑制MAPK信號通路改善抗增殖作用相關。Shi等[42]研究野百合堿誘導的PH大鼠發現，PH肺血管重塑發生于激活的炎癥級聯反應之后，而黃芩素可通過抑制PH肺組織內炎癥反應，下調炎性細胞聚集及IL-1β、TNF-α等炎性因子表達，從而逆轉肺血管重構，且黃芩素治療PH發揮抗增殖及抗炎效應主要涉及NF-κB和MAPK信號通路，其中MAPK主要包括 P38 MAPK、細胞外調節蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases，ERK)和 應激活化蛋白激酶(stress-activated protein kinase SAPK，JNK)，是細胞增殖、轉化、凋亡等信號轉導的重要酶。

GO分析的MF結果顯示，紅花治療PH與調控蛋白絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶活性、激酶綁定、蛋白結構域特異性結合、腫瘤壞死因子受體結合等分子功能相關。NLRP3炎性小體的形成屬于NLRP3與pro-CASP1、ASC蛋白結構域特異性結合過程，其啟動信號由TNF-α等促炎性細胞因子構成，腫瘤壞死因子受體結合參與該激活過程[43]。蛋白絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶參與協同刺激信號的啟動，這類激酶一般在信號轉導的中下游發揮作用，可激活MAPK、AKT等信號通路，刺激肺血管內皮細胞炎性分子的分泌[44]。紅花可抑制TNF-α啟動信號的生成、NLRP3炎性小體的形成及促炎性細胞因子的釋放，從而調節肺血管內皮功能障礙，緩解血管重構。BP分析發現，紅花抗PH過程中對外界刺激如機械刺激、活性氧反應、細胞應激反應等皆有調節作用，同時通過調節細胞凋亡信號傳導，參與調控肺血管平滑肌細胞增殖，進而對心臟病變有一定干預作用。CC分析顯示，紅花主要影響黏著斑、囊泡、線粒體外膜等細胞組成部分而參與抗PH。黏著斑是調控細胞黏附、機械傳感和控制細胞生長及分化的信號，可通過相關通路作用于人肺動脈平滑肌細胞[45]。囊泡是免疫識別、分泌蛋白的重要載體，可由肺動脈內皮細胞病理狀態下過度分泌釋放至肺平滑肌細胞，從而引起肺平滑肌細胞增殖，最終促進肺動脈高壓的形成[46]。肺動脈高壓血管重構的重要細胞中，線粒體的功能異常可直接激活NF-κB途徑介導的炎性分子表達，促進細胞增殖[47]。因此本研究認為，紅花可能通過抑制PH患者黏著斑相關通路，調節線粒體功能，抑制肺血管內皮細胞分泌囊泡，發揮抗血管平滑肌細胞增殖作用。

綜上所述，本研究通過網絡藥理學及分子對接技術研究紅花治療PH的作用機制，發現紅花主要化學成分羥基紅花黃色素A、黃芩苷、黃芩素等共同作用于NLRP3、CASP-1、IL-1β、HSP90AA1、MAPK3、RELA等靶點蛋白，調節NOD樣受體、MAPK等信號通路，抑制細胞凋亡及炎癥反應，改善肺血管內皮功能障礙，逆轉肺動脈平滑肌的惡性增殖而發揮抗PH作用，該研究進一步揭示了紅花可通過多成分-多靶點-多通路共同調控PH的物質基礎及作用機制，為中藥紅花的臨床應用提供理論基礎及參考依據，后續紅花提取物羥基紅花黃色素A治療PH的機制研究將在此基礎上展開，以期為治療PH找到新的靶點抑制劑提供思路。