帕金森病患者血清中維生素K2及其他相關炎癥指標變化和危險因素分析

郁曉丹 虞燕霞 沈明強

(南京醫科大學附屬蘇州醫院 蘇州市立醫院 1神經內科，江蘇 蘇州 215002；2藥物臨床試驗機構辦公室)

帕金森病(PD)是常見的神經退行性疾病，其主要病理變化是黑質多巴胺能神經元丟失和路易小體的形成。目前環境、神經炎癥、線粒體功能紊亂、氧化應激、細胞凋亡、遺傳因素等因素都參與PD的發病過程。其中神經炎癥是PD比較重要的一個發病機制。維生素(V)K2作為一種維生素，除了具有骨鹽代謝、凝血級聯反應調節的作用，它還有一定的抗炎癥作用，有報道在多發性硬化(MS)、阿爾茨海默病(AD)患者血清中VK2含量下降〔1～3〕，在PD患者中的相關研究鮮有報道。前期我們在實驗中發現VK2具有抗炎作用，體內外試驗顯示VK2能夠抑制魚藤酮誘導的小膠質細胞活化〔4〕。有研究表明，在血清中還有其他一些物質同樣具有抗炎作用，而且影響PD的發病和發展〔5～7〕，例如：VD、C-反應蛋白(CRP)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)。此外血尿酸(UA)、中性粒細胞與淋巴細胞比值(NLR)、白細胞計數(WBC)等也被認為是PD發病的影響因素〔8～10〕。本研究搜集這些與炎癥反應程度相關的臨床指標，比較其在PD組和健康對照組的差別，綜合評估各指標對于PD的發病風險。

1 對象與方法

1.1研究對象 選自2016年3月至2019年3月在蘇州市立醫院門診和住院部就診的PD患者92例，患者均符合英國腦庫的PD診斷標準。排除由腦外傷或中毒等原因引起的繼發性帕金森綜合征、進行性核上性麻痹等帕金森疊加綜合征、患有肝腎疾病等相關疾病的患者。按照Hoehn-Yahr(H&Y)分期將PD患者分成早期(H&Y 1.0～2.5)和中晚期(H&Y 3.0～5.0)。早期患者41例，中晚期患者51例。另外，搜集相同時間內的健康體檢者109例作為對照組。

1.2資料收集 搜集PD組和對照組姓名、性別、年齡、體重、身高、病程和患病情況，檢測其血清VK2、VD、CRP、HDL-C、LDL-C、UA、WBC指標，計算中性粒細胞計數和淋巴細胞計數比值，記錄為NLR。

1.3檢測方法 受試者均于清晨空腹條件下采集5 ml靜脈血。采用酶聯免疫吸附試驗檢測VK2及VD水平。采用全自動生化分析測定HDL-C、LDL-C、UA、CRP水平，采用全自動血液分析儀檢測WBC及分類。

1.4統計學方法 采用SPSS23.0軟件進行獨立樣本t檢驗、曼特惠尼u檢驗、χ2檢驗、多因素Logistic回歸分析，并繪制受試者工作特征(ROC)曲線。

2 結 果

2.1一般基線資料 對照組年齡45～90歲；PD組年齡41～84歲。兩組年齡、性別、身高、體重指數(BMI)、高血壓、糖尿病、HDL-C、CRP、WBC、UA水平差異均沒有統計學意義(P>0.05)。PD組VK2、VD、LDL-C水平低于對照組，PD組NLR水平高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組臨床資料比較〔M(P25,P75)〕

2.2多因素Logistic回歸聯合ROC曲線分析 根據上述單因素分析所得出的結果，以VK2、VD、LDL-C和NLR作為Logistic回歸分析模型的自變量，以是否患有PD作為因變量，進行多因素Logistic回歸分析(表2)。以OR值>1.000作為危險因素，OR值<1.000作為保護因素。研究結果顯示，低水平的VK2、VD和LDL-C是PD發病的獨立危險因素；NLR不能認為是PD發病的獨立保護因素(P>0.05)。利用VK2、VD、LDL-C值構建ROC曲線，VK2的曲線下面積(AUC)最高，對于預測PD發病的價值高于其他指標。見表3、圖1。

表2 PD患者多因素Logistic回歸分析

表3 PD患者相關指標ROC曲線AUC及其他參數

圖1 VK2、VD及LDL-C預測PD發病的ROC曲線

2.3PD組不同分期患者VK2、VD、LDL-C和NLR的比較 PD早期組VK2、VD、LDL-C水平高于PD中晚期組，NLR水平低于中晚期組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 PD不同分期患者VK2、VD、LDL-C和NLR的比較

3 討 論

PD與腦內慢性炎癥相關，而外周炎癥的激活和平息又影響著腦內炎癥〔11，12〕。血清中VD、CRP、HDL-C、LDL-C、UA、WBC等這些可以監測的指標均不同程度地參與了機體的氧化應激反應，與體內的炎癥反應的發生息息相關。同時它們可能與PD的發生相關。本研究發現低水平的VK2、VD、LDL-C可能是PD發病的獨立危險因素。

VK2作用廣泛，能治療骨質疏松、抗腫瘤、抑制血管鈣化等〔13〕。研究表明VK2有一定的抗炎作用，Saputra等〔14〕發現VK2通過抑制核轉錄因子(NF)-κB信號通路的激活抑制炎癥反應〔14〕。Ohsaki等〔15〕研究發現給大鼠口服VK后能夠減少炎癥相關基因的表達，提示VK可以抑制脂多糖誘導的大鼠炎癥反應。在腦內，VK2參與Gas6、蛋白S的生物激活和鞘脂的合成。鞘脂能夠參與細胞增殖、分化、衰老和細胞間的相互作用〔16〕。鞘脂的代謝改變與AD和PD等神經退行性疾病有關〔17〕。在AD患者中VK2的水平明顯降低，VK2在神經退行性疾病中具有神經保護作用〔3〕。有研究〔18〕對192例老年人日常葉綠醌的攝入量通過問卷調查的方式進行估算，發現攝入較多葉綠醌的老年人能夠獲得更高簡易心理狀態檢查(MMSE)得分和較低的行為與額顳行為評定量表(FBRS)得分，證實VK2與老年人的認知行為能力有關。有研究通過比較31例癡呆患者和健康對照組的VK攝入量，發現癡呆患者的攝入量很低，差異具有統計學意義〔2〕。Shatenstein等〔19〕跟蹤36例早期AD患者和58例認知功能正常的老年人18個月的營養攝入情況，發現早期AD患者的營養物質攝入水平明顯較對照組低，其中包括VK的水平。在神經系統脫髓鞘疾病MS患者中也有類似的發現，Lasemi等〔1〕對45例MS患者和29位健康體檢者進行組間分析，發現MS患者血清VK2水平明顯較健康對照組低，而且結果顯示女性較男性更低，VK2水平也會隨著MS發作次數的增多而下降，這些結果均提示VK2在MS的發病和進展中具有一定的作用。Heix基因突變的果蠅PD模型中，VK2能夠通過傳遞電子對線粒體產生修復作用〔20〕。前期我們研究工作顯示在魚藤酮激活的小膠質細胞內，NF-κB信號通路被激活，引起大量的炎癥因子的產生釋放，而VK2能通過抑制神經炎癥拮抗魚藤酮誘導的炎癥介質釋放，從而起到保護神經元SH-SY5Y細胞的作用〔4〕。因此，VK2可能與PD、AD等神經退行性疾病的發生和發展有關。

本研究結果提示臨床上可通過監測VK2水平評估PD的發病風險，進行補充VK2或許將成為減少PD發病或延緩PD 進展的一種治療手段。

VD是一種類固醇激素，參與類固醇合成、細胞膜組成等多種生化過程。動物試驗證實，VD能夠抑制神經炎癥、減少多巴胺神經元的損傷〔21〕。一項meta分析認為VD水平在PD病人和健康人群之間具有顯著差異，并且與疾病的嚴重程度負相關〔22〕。膽固醇是一種普遍存在于細胞膜中的脂質，維持細胞結構的完整性和功能特異性。大腦是膽固醇含量最高的器官，膽固醇代謝異常與許多神經退行性疾病有關。膽固醇水平降低可能通過輔酶Q10減少引起氧化應激，對多巴胺神經元產生損傷，增加PD的發病風險〔23〕。本研究結果表明VD和LDL-C可能也與PD的發生和發展有關。

NLR是一種提示周圍炎癥的標志物，反映了引起炎癥進展的中性粒細胞和免疫調節途徑的淋巴細胞的信息。外周和腦內炎癥的相互作用可能在黑質紋狀體多巴胺神經元損傷中有重要作用。Moghaddam等〔9〕發現PD組NLR水平高于健康對照組，且在以震顫為主要表現的PD患者中NLR水平與運動嚴重程度呈正相關。本研究結果推測低水平的NLR是PD的保護因素。

綜上所述，低水平的VK2、VD、LDL-C可能會增加PD的發病風險。VK2、VD、LDL-C可能是通過抑制炎癥反應、減少氧化應激保護多巴胺神經元，從而減少PD的發病風險。本研究存在一定局限性，受試者均來自同一所醫院，可能存在一定的數據偏倚。其次，并沒有對受試者的VK2水平進行動態觀察。后期將進行多中心前瞻性研究以獲取更準確研究結論。