殼聚糖對產蛋后期蛋雞生產性能，血清生化指標和免疫指標的影響

趙輝祥，王 艷，王瑞華，王占彬

河南科技大學動物科技學院，河南洛陽 471000

隨著飼用抗生素全面禁止管理辦法的落實，新型飼料添加劑在畜禽生產中的研究和應用越來越受到關注。殼聚糖（Chitosan）是天然存在的聚陽離子堿性多糖，也是自然界中除纖維素外含量最豐富的多糖[1]。殼聚糖具有促生長、抗氧化、抗菌殺菌、調節免疫能力以及降低膽固醇等多種生物學活性作用，且在體內可降解、無毒性，在畜禽生產中具有良好的飼用價值。有研究表明殼聚糖可以提高肉雞的飼料轉化率和平均體重[2]，并能增強動物機體免疫力[3]，達到了和抗生素相近的效果。但目前鮮有殼聚糖對產蛋后期蛋雞生產性能的影響，更沒有對蛋雞血清生化指標、血清免疫指標的研究。本試驗旨在研究飼糧中添加不同水平的殼聚糖對產蛋后期蛋雞生產性能、血清生化指標、血清免疫指標的影響，為殼聚糖在蛋雞生產中的大規模應用提供技術支撐和理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計與飼養管理

選取450 只500日齡產蛋率相近且健康的海蘭褐蛋雞隨機分為5 組（1 個對照組和4 個試驗組），每組6 個重復，每個重復15 只雞。對照組飼喂基礎飼糧，4 個試驗組分別在基礎飼糧上添加200、400、600、800 mg/kg 的殼聚糖（購自江蘇古貝生物科技有限公司，脫乙酰化度≥95.0%，黏度為20～800 mPa·s，分子質量2 500 u），預試驗期7 d，正試驗期60 d，飼養試驗在河南省洛陽市新安縣紅雨養殖場進行。試驗采用3 層全階梯式籠養，每個籠子3 只雞。于每天07:00、14:00 及17:30 分3 次喂料，自由采食、飲水。雞舍為半開放式，自然通風結合縱向負壓通風，光照采用自然光照與人工補光相結合（16 h/d，光照程序智能控制器控制）。舍溫保持在（20±2）℃，并保持相對濕度50%～60%。采用刮糞板清糞，每天清糞1 次。基礎飼糧參照NRC（1994）、中華人民共和國農業行業《雞飼養標準》（NY/T33-2004）及《2015 版海蘭褐商品代蛋雞飼養管理手冊》配制的粉狀配合飼糧，試驗飼糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成和營養水平（風干基礎）

續表1

1.2 生產性能測定

試驗期間每天17:00 收集蛋，以每組各重復為單位記錄每天的產蛋數、蛋重、破軟蛋數；每周統計采食量，計算全期的產蛋率、平均日采食量、平均日產蛋重、料蛋比及破軟蛋率。每天觀察蛋雞的健康狀況。

1.3 血清生化指標

試驗第60 天，每個重復隨機選取1 只雞，禁水空腹12 h 后，使用真空采血管于蛋雞翅下靜脈處采血5 mL，立即送回實驗室分離血清。分離的血清樣本置于-20 ℃冰箱保存。隨后采用全自動生化分析儀（iMagic-V7，深圳庫貝爾生物科技股份有限公司）測定TP（g/L）、ALB（g/L）ALT（U/L）、AST（U/L）、TG（mmol/L）、TC（mmol/L）等血清生化指標。

1.4 血清免疫指標

血清中IgA（μg/mL）、IgG（μg/mL）以及IgM（μg/mL）指標均采用上海鈺博生物科技有限公司生產的ELISA 酶聯免疫分析試劑盒進行測定。結果采用全波長酶標儀（infinite M200，軟件i-control 2.0）進行讀數。Heraeus Megafuge 8R 低溫高速離心機（賽默飛）和HH-S2 數顯二孔恒溫水浴鍋（深圳三利制造）等也用于試驗操作。所有操作步驟均按試劑盒說明書進行。

1.5 數據處理

本試驗數據采用SPSS 25.0 統計軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA），差異顯著時，用Duncan’s 進行多重比較檢驗。試驗數據以“平均值±標準差”表示，P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 殼聚糖對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

由表2 可知，各試驗組的平均日采食量、料蛋比和平均蛋重與對照組均無顯著差異。200 mg/kg和800 mg/kg 添加組產蛋率顯著高于對照組，200mg/kg 添加組的破軟蛋率顯著低于對照組。

表2 殼聚糖對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

2.2 殼聚糖對產蛋后期蛋雞血清生化指標的影響

由表3 可知，試驗組ALB、AST、ALT、TC、TG 與對照組均無顯著性差異。200、400、600 mg/kg 添加組的TP 含量顯著高于對照組，600 mg/kg 添加組的TP 含量顯著高于800 mg/kg 添加組。

表3 殼聚糖對產蛋后期蛋雞血清生化指標的影響

2.3 殼聚糖對產蛋后期蛋雞血清免疫指標的影響

由表4 可知，各試驗組的IgA、IgG、IgM 與對照組相比差異均不顯著。

表4 殼聚糖對產蛋后期蛋雞血清免疫指標的影響

3 討 論

3.1 殼聚糖對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

本試驗中200 mg/kg 殼聚糖的添加量顯著提高了產蛋后期蛋雞的產蛋率，并能顯著降低破軟蛋率。高忠新等[4]研究發現，日糧中添加低聚殼聚糖可明顯提高蛋雞產蛋率，這與本試驗結果一致。在本試驗中，在產蛋后期海蘭褐蛋雞飼糧中添加殼聚糖對蛋雞的ADFI、料蛋比和平均蛋重無顯著影響。王紅衛等[5]報道，在70 周齡蛋雞的基礎日糧中添加200 mg/kg 不同分子量的低聚殼聚糖，對蛋雞的采食量、料蛋比沒有顯著影響，與本試驗結果一致。但陳中衛等[6]發現，日糧中添加殼聚糖能顯著提高1日齡櫻桃谷肉鴨的平均日增重和ADFI。結果與本試驗不同，猜測可能與殼聚糖的來源、試驗動物種類等因素有關。陳智等[7]的研究發現，在產蛋后期蛋雞飲水中添加1～2 g/t 復合低聚糖可顯著提高蛋雞的總產蛋重量，改善產蛋后期蛋雞的蛋品質。這與本試驗研究結果不一致，可能與殼聚糖的添加方式不同有關。

3.2 殼聚糖對產蛋后期蛋雞血清生化指標的影響

血清生化指標的動態變化可以反映動物機體炎癥、組織細胞通透性、肝腎狀態、新陳代謝機能和相關酶活力等指標，可以用來衡量動物機體健康水平。TP 和ALB 水平增加時蛋白質代謝旺盛，機體對營養物質的吸收增加[8]，氨基酸和蛋白質的吸收利用率提高，進而能提高家禽生產性能[9]。本試驗中，殼聚糖對TP 有明顯提高作用，當添加量為600 mg/kg 時差異顯著，并且ALB 有提高趨勢，但不顯著（0.05≤P＜0.10）。劉梅等[10]研究殼聚糖對1日齡肉仔雞的影響時發現，當殼聚糖添加量為100 mg/kg 時可以顯著提高血清中TP 含量。楊偉麗等[11]在研究殼聚糖對均重50 kg 左右的生長育肥豬的影響時，發現殼聚糖對生長育肥豬的TP 和ALB 等無顯著影響，這提示殼聚糖對育肥豬的蛋白質代謝無顯著影響。分析以上3 個試驗結果猜測殼聚糖對動物血清中TP 和ALB 水平的影響與試驗動物所處年齡段、種類以及殼聚糖脫乙酰度、來源等因素有關。同時這在一定程度上說明，日糧中添加殼聚糖對產蛋后期蛋雞的蛋白質代謝有改善作用，進而提高生產性能。高產期蛋雞日糧能量濃度高，脂肪代謝旺盛，加上環境應激等因素的影響容易發生肝細胞損傷的情況。肝細胞受損失時血清中AST 和ALT 2 種轉氨酶水平上升。本試驗結果表明，殼聚糖對產蛋后期蛋雞血清中AST、ALT 水平無顯著影響，這說明殼聚糖對產蛋后期蛋雞肝臟無不良反應。彭佳麗等[12]在探究殼聚糖復方制劑對蛋雞脂肪肝的治療作用發現，殼聚糖復方制劑可以促進肝臟對脂肪的分解，對肝細胞損傷有一定的治療作用。在一定程度上驗證了本試驗的正確性。TC、TG 等指標與體內的脂類代謝有關，是反映血脂情況重要的指標。TC 是指血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和，TG 指血清中甘油三酯的含量。王潤蓮等[13]在研究殼聚糖不同水平添加量對28日齡肉仔鵝的影響時發現，殼聚糖添加量為0.10%時，可以顯著降低血清中TC 和TG 含量。劉梅等[10]研究殼聚糖對1日齡肉仔雞的影響時，發現當殼聚糖添加量為100 mg/kg 時可以顯著降低血清中TC、TG 含量。本試驗中，殼聚糖對TC、TG 水平有稍微降低，但差異不顯著。這表明殼聚糖對產蛋后期蛋雞脂質代謝有一定的改善作用。

3.3 殼聚糖對產蛋后期蛋雞血清免疫指標影響

范秋麗等[14]研究發現，日糧中添加50 mg/kg 殼聚糖可以提高21日齡法氏囊指數，提高蛋雞免疫能力。華雪銘等[15]給暗紋東方鲀飼喂含0.2%殼聚糖的日糧后，機體的IgM 含量增加了1.01 倍。張彩芬等[16]發現，日糧中添加殼聚糖能使仔豬血清中IgG、IgM 的含量顯著提高，對IgA 含量也有一定提高作用。經研究，其機制可能是殼聚糖所帶正電荷與巨噬細胞和T 淋巴細胞表面所帶負電荷之間相互吸引，激發巨噬細胞和T 淋巴細胞向B 細胞發出產生抗體的指令，從而產生各種免疫球蛋白[17]。在本試驗結果中，雖然各試驗組與對照組的3 種抗體含量無顯著差異，但是可以看出試驗組均有不同程度的提高，與前人試驗結果一致。

4 結 論

在本試驗條件下，在飼糧中添加200 mg/kg 殼聚糖可提升產蛋后期蛋雞產蛋率、降低破軟蛋率；改善蛋雞血清生化指標，進而提高機體蛋白質代謝水平、改善脂代謝水平，且添加量為600 mg/kg 時對血清生化指標改善效果較好；在一定程度上提高蛋雞血清中IgA、IgG、IgM 3 種抗體的含量，提高蛋雞的免疫能力。