血清miRNA30a水平與高血壓性心臟病左室肥厚的相關性

買力旦木·艾克拜，瑪依努爾·買買提明，買熱木古·阿布都熱依木

高血壓是引起心臟病的重要危險因素，但是許多人并未意識到本身存在血壓升高且未及時采取治療，或者接受了治療仍無法控制血壓，導致心臟功能和結構改變，發展為高血壓性心臟病(HHD)[1-2]。HHD與心力衰竭關系密切，其病死率較單純的高血壓高3倍，嚴重影響病人的生活質量，因此及早篩查及治療尤其重要[3-4]。左室肥厚(LVH)是HHD最常見表現，也是發生心力衰竭、腦卒中、心源性猝死及急性心肌梗死的危險因素，其病理改變的核心是導致心臟組織異常重構，因此逆轉LVH是HHD治療的關鍵切入點[5-6]。微小RNA(miRNAs)是一類小的非編碼RNA，在心肌重塑、增殖及分化中發揮重要的調節作用[7]。miRNA30a是研究較多的miRNA，其在心肌細胞中高表達，可通過作用于結締組織生長因子(CTGF)并影響其表達參與調節心肌纖維化[8]。本研究通過檢測血清miRNA30a水平，探討其與HHD左室肥厚的關系，以期為HHD左室肥厚的臨床診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年10月—2020年10月新疆醫科大學第二附屬醫院心內科收治的高血壓2級以上病人150例作為研究對象，其中，單純高血壓病人93例作為高血壓組；高血壓合并LVH病人57例，作為合并LVH組；另選取同期于本院進行健康體檢者60人作為對照組。本研究經醫院倫理委員會審批，入選者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入標準 ①符合《中國高血壓防治指南(2018年修訂版)》[9]中高血壓的診斷標準；②均為原發性高血壓，入院前未經降壓治療；③無繼發性糖尿病、高血壓或其他心血管疾病；④無惡性腫瘤、臟器功能嚴重受損相關疾病；⑤臨床資料齊全。

1.3 研究方法

1.3.1 一般檢查 所有入選者均需完善臨床檢查，收集其總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血尿酸(UA)、空腹血糖、肌酐等數據并由專人質控。

1.3.2 超聲心動圖檢查 應用DC-N3S彩色多普勒超聲系統(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司)測量左心室舒張末期內徑(LVEDD)、室間隔厚度(IVSd)和左心室壁厚度(LVPWD)，計算左心室質量指數(LVMI)，取3次測量的平均值為最終結果。

1.3.3 血清指標檢測 入組病人禁食至少8 h，于次日清晨采集空腹靜脈血3 mL(對照組在體檢當日采集)，4 000 r/min離心10 min后，取其上清液保存待檢。采用酶聯免疫吸附法測定血清基質金屬蛋白酶9(MMP-9)、Ⅰ型膠原氨基端肽(PⅠNP)和Ⅲ型膠原氨基端肽(PⅢNP)水平，所用儀器為BK400全自動生化分析儀，試劑盒均購自美國R&D公司。

1.3.4 血清miRNA30a水平檢測 另采取靜脈血3 mL，按照RNeasy Plus Mini Kit試劑盒(購自OMEGA公司)說明提取血漿總RNA；采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應法在實時熒光定量聚合酶鏈式反應儀(Bio-Rad公司)上檢測血漿miRNA30a表達水平，以2-△△Ct表示miRNA30a的相對表達量。

2 結 果

2.1 3組一般資料比較 合并LVH組和高血壓組病人的收縮壓、舒張壓均高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；3組的年齡、性別(男)、體質指數(BMI)、吸煙、血脂異常、TC、TG、LDL-C、HDL-C、UA、空腹血糖、肌酐比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 3組一般資料比較

2.2 3組超聲心動圖指標比較 與對照組比較，合并LVH組、高血壓組LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI均升高，差異均有統計學意義(P<0.05)；與高血壓組比較，合并LVH組LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI均升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 3組超聲心動圖指標比較(±s)

2.3 3組血清學指標比較 與對照組比較，合并LVH組、高血壓組MMP-9、PⅠNP、PⅢNP及miRNA30a均升高，差異均有統計學意義(P<0.05)；與高血壓組比較，合并LVH組MMP-9、PⅠNP、PⅢNP及miRNA30a均升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 3組血清學指標比較(±s)

2.4 血清miRNA30a水平與各指標的相關性 Pearson相關分析顯示，血清miRNA30a水平與LVEDD、IVSd、LVPWD、LVMI、MMP-9、PⅠNP及PⅢNP均呈正相關(P<0.05)。詳見表4。

表4 血清miRNA30a水平與各指標的相關性

2.5 血清miRNA30a水平對HHD病人發生LVH的預測價值 以血清miRNA30a水平為檢測指標，以病人是否出現LVH為狀態變量繪制預測LVH發生的ROC曲線。結果顯示，血清miRNA30a水平預測LVH的截斷值為1.70，ROC曲線下面積為0.869，敏感度為80.3%，特異度為83.7%。詳見圖1。

圖1 血清miRNA30a水平預測HHD病人發生LVH的ROC曲線

3 討 論

機體長期處于高血壓狀態，循環阻力會明顯增大，左心室需要增加收縮強度以克服阻力，才能確保血液進入主動脈，由此導致左心室代償性出現LVH。LVH發生的影響因素較多，如機械因素、氧化應激、內皮功能損傷、遺傳因素、細胞凋亡等，但LVH狀態下的心臟持續超負荷，最終可能導致心力衰竭的嚴重后果[10-11]。HHD正是高血壓長期發展的結果，故盡早發現其引起的心臟改變并進行治療意義重大。超聲心動圖因靈敏度高，可直接展現心臟內部情況，且年齡、肥胖及胸壁厚度對其檢查結果的影響較小，成為臨床LVH診斷的理想檢測方法[12]。本研究中，3組LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，表現為：合并LVH組>高血壓組>對照組，該結果與臨床HHD臨床表現相符。

早期LVH的主要改變是心肌細胞肥大、伴隨心肌細胞凋亡，但隨著病變的進展，逐漸發展為心肌膠原(ECM)替代細胞凋亡，心功能開始惡化，如出現射血分數降低。ECM中約85%為心臟成纖維細胞合成的Ⅰ型、Ⅲ型膠原；Ⅲ型膠原的mRNA在心肌纖維化初期表達增加，而Ⅰ型膠原的mRNA在后期表達增加，兩者均可促使左心室順應性降低，且舒張功能也會受到影響[13-14]。MMP-9是基質金屬蛋白酶(MMPs)家族中的成員，具有調節ECM合成和降解的作用，可促使纖維膠原降解，從而導致ECM發生重構[13]。本研究中，3組血清MMP-9、PⅠNP及PⅢNP水平比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，表現為：合并LVH組>高血壓組>對照組，提示發生LVH的高血壓病人出現心肌纖維化的風險增加，與韓巍等[6]的研究結論相符，這可能與ECM合成增多并在體內不斷沉積，導致心肌纖維化加重有關。

miRNAs是單鏈非編碼RNA，長度為20～24個核苷酸，通過與靶向信使RNA的3′非編碼區結合，經轉錄后對基因表達發揮重要的調控作用；miRNAs廣泛存在于血清、血漿、尿液、腦脊液和其他體液中。研究發現，miRNAs在腦卒中的發病機制、病理學及并發癥和預后中發揮關鍵作用[15]。因此，這些小分子已成為心腦血管疾病診療的新標志物。miRNA30a是miRNAs家族中的重要成員，其表達與多種組織損傷存在聯系。過表達的miRNA30a會加重葡萄糖和缺氧導致的神經細胞凋亡，而其表達降低后，可能導致Beclin1介導的自噬作用增強以減弱腦缺血性損傷[16]。楊曉偉等[17]研究發現，老年急性心肌梗死病人的血清miRNA30a存在高表達。另有研究發現，miRNA30a也高表達于心力衰竭病人血清中，與心功能關系密切[18]。可見，miRNA30a在心肌細胞中廣泛表達，可能成為預測HHD發生LVH的潛在標志物。本研究結果顯示，高血壓病人較非高血壓者血清miRNA30a水平更高，且合并LVH的病人的血清miRNA30a水平明顯增高，說明miRNA30a在LVH高血壓病人血清中出現高表達。Pearson相關分析顯示，血清miRNA30a與LVH指標LVEDD、IVSd、LVPWD及LVMI呈顯著正相關，提示其與HHD病人LVH的發生密切相關。CTGF廣泛分布于多種組織中，是機體創傷修復和纖維化疾病進展的重要因子，其表達水平高低可反映纖維化程度[19]。一項關于擴張性心肌病的研究顯示，miRNA30a可能通過高表達抑制CTGF而發揮作用，參與調節心肌纖維化[20]。而本研究中，血清miRNA30a與MMP-9、PⅠNP及PⅢNP均呈顯著正相關，說明其在HHD病人LVH發生過程也可能發揮了類似的功能，但相關研究較少，仍需更多研究予以證實。通過繪制ROC曲線結果顯示，血清miRNA30a預測LVH的截斷值為1.70，ROC曲線下面積為0.869，敏感度為80.3%，特異度為83.7%，提示血清miRNA30a對HHD病人發生LVH具有一定的預測價值，可為HHD病人的早期診斷提供新的切入點。

綜上所述，血清miRNA30a水平與HHD病人LVH發生相關，其可能通過抑制CTGF表達而調節心肌纖維化，可作為預測該類病人發生LVH的潛在標志物。但LVH發生影響因素眾多，本研究未能深入闡明miRNA30a對其的作用機制，也并未深入探討各指標間的相關性，存在一定的不足，有待進一步深入研究予以證實。