初診彌漫大B 細胞淋巴瘤患者血清CEA、IL-17、PIC水平變化及意義

劉曉英，羅文豐，劉洋，曾孟蘭，翟紅，謝坤瑩，魏錦

川北醫學院附屬醫院血液科，四川 南充 637001

彌漫大B細胞淋巴瘤（DLBCL）是最常見的非霍奇金淋巴瘤，全球每年新發病例15 萬例，占成年人非霍奇金淋巴瘤的30%～40%［1］。雖然免疫化療能夠明顯改善患者預后，但臨床發現約10% DLBCL 患者初治耐藥，約30%患者發生復發耐藥［2］。癌胚抗原（CEA）是臨床常用的胃腸道惡性腫瘤標志物。近年研究發現，血清CEA水平有助于輔助診斷DLBCL，是DLBCL 新的血清標志物［3］。IL-17 是由活化的Th17細胞產生的細胞因子，參與宿主防御、細胞運輸、免疫調節和組織修復等過程。研究發現，髓源性間質干細胞能夠分泌IL-17，激活Jacus激酶，促進DLBCL細胞增殖、轉移及耐藥性形成［4］。纖溶酶-α2纖溶酶抑制劑復合物（PIC）作為α2纖溶酶抑制劑結合纖溶酶的產物，可滅活纖溶酶。研究表明，PIC 作為纖溶系統激活的早期標志物，其表達升高可促進腫瘤細胞侵襲及遷移，有助于評估惡性腫瘤患者的預后［5］。本研究觀察初診DLBCL 患者血清CEA、IL-17、PIC水平變化，并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2020 年1 月—2022 年1 月本院收治的DLBCL 患者103 例（DLBCL 組），均經病理學檢查明確診斷。納入標準：初治患者、臨床資料完整；接受規范化R-CHOP（利妥昔單抗+環磷酰胺，多柔比星、長春新堿和潑尼松）方案化療。排除標準：合并自身免疫性疾病、感染性疾病等；合并其他器官惡性腫瘤；合并凝血功能障礙等血液系統疾病。DLBCL 組男59 例，女44 例；年齡31～78 歲（57.46 ± 4.79）歲；結外侵犯部位≥2個34例、＜2個69例；臨床分期I、Ⅱ期45例，Ⅲ、Ⅳ期58例；國際預后指數評分（IPI）0～2 分60 例，3～5 分43 例。同期選擇32 名健康體檢者作為對照組，男20例，女12例；年齡29～79（58.14 ± 5.13）歲。納入標準：年齡≥18歲；入組前半年未接受激素及免疫抑制劑治療。排除標準：妊娠、哺乳期婦女；合并免疫、血液系統、惡性腫瘤等嚴重疾病。兩組性別、年齡比較差異無統計學意義（P均＞0.05）。本研究經川北醫學院附屬醫院倫理委員會批準（2020-014），兩組均簽署知情同意書。

1.2 治療方法 DLBCL組采用R-CHOP方案化療。第1天予利妥昔單抗（美羅華，上海羅氏制藥有限公司，批號SH0051）375 mg/m2靜脈滴注；第2 天予環磷酰胺（山西泰盛制藥有限公司，批號0901311）750 mg/m2靜脈滴注＋多柔比星（廣東嶺南制藥有限公司，批號H20063155）50 mg/m2靜脈滴注+長春新堿（遼寧衛星制藥廠，批號H20068151）1.4 mg/m2靜脈滴注+潑尼松（華中藥業股份有限公司，批號H42021394）100 mg口服；第3～6天繼續予潑尼松100 mg口服。間隔2周進行下個療程，共化療6～8個療程。

1.3 療效評價 化療結束后經全身影像學檢查對療效進行評估［6］，完全緩解：病灶完全消失，且維持時間≥4 周；部分緩解：病灶縮小＞50%，且維持時間≥4周；疾病穩定：病灶縮小＜50%或增大＜25%，且維持時間≥4 周；疾病進展：病灶增大＞25%或出現新病灶。將103例患者分為化療有效（完全緩解+部分緩解）組44例，化療無效（疾病穩定+疾病進展）組59例。

1.4 血清CEA、IL-17、PIC 檢測 分別于對照組健康體檢時、DLBCL 組化療前抽取空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min 離心10 min，離心半徑8 cm，分離血清，采用酶聯免疫吸附法檢測血清IL-17，試劑盒購自上海紀寧生物科技公司，實驗步驟嚴格按照試劑盒說明書進行；采用化學發光免疫分析法檢測血清CEA、PIC，用HISCL5000 全自動免疫分析儀及配套試劑（日本Sysmex公司）進行檢測。

1.5 統計學方法 采用SPSS22.0統計軟件。符合正態分布的計量資料以±s表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗。繪制受試者工作特征（ROC）曲線，用曲線下面積比較血清CEA、IL-17、PIC 水平及聯合檢測對療效的預測價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 DLBCL 組與對照組血清CEA、IL-17、PIC 水平比較 與對照組比較，DLBCL 組血清CEA、PIC 水平高，血清IL-17水平低（P均＜0.05）。見表1。

表1 DLBCL組與對照組血清CEA、IL-17、PIC水平比較（±s）

表1 DLBCL組與對照組血清CEA、IL-17、PIC水平比較（±s）

組別對照組DLBCL組P n 32 103 CEA（ng/mL）3.32 ± 0.41 25.15 ± 1.27＜0.05 IL-17（pg/mL）10.22 ± 1.63 6.40 ± 1.22＜0.05 PIC（μg/mL）0.51 ± 0.17 0.82 ± 0.23＜0.05

2.2 DLBCL患者臨床病理特征與血清CEA、IL-17、PIC水平的關系 DLBCL患者血清CEA、IL-17、PIC水平與結外受累的器官、淋巴結數目、國際預后指數評分、臨床分期有關（P均＜0.05），與性別、年齡無關（P均＞0.05），見表2。

表2 DLBCL患者臨床病理特征與血清CEA、IL-17、PIC水平的關系

2.3 DLBCL 患者療效與血清CEA、IL-17、PIC 水平的關系 與化療有效組比較，化療無效組血清CEA、PIC水平高，IL-17水平低（P均＜0.05）。見表3。

表3 化療有效組與化療無效組血清CEA、IL-17、PIC水平比較（±s）

表3 化療有效組與化療無效組血清CEA、IL-17、PIC水平比較（±s）

組別化療有效組化療無效組P n 44 59 CEA（ng/mL）22.17 ± 1.54 27.37 ± 1.20＜0.05 IL-17（pg/mL）6.95 ± 1.32 5.99 ± 1.22＜0.05 PIC（μg/mL）0.58 ± 0.30 1.00 ± 0.21＜0.05

2.4 血清CEA、IL-17、PIC 對療效的預測價值 血清CEA、IL-17、PIC 及三者聯合預測療效的曲線下面積分別為0.676、0.757、0.684、0.830。三者聯合預測的曲線下面積高于三者單獨預測（P均＜0.05）。 見表4。

表4 血清CEA、IL-17、PIC對DLBCL患者療效的預測價值

3 討論

CEA 作為一種腫瘤相關抗原，是臨床常用的血清腫瘤標志物。本研究中，DLBCL 患者血清CEA 水平升高，且與結外受累的器官、淋巴結數目、IPI 評分、臨床分期有關，提示CEA 促進DLBCL 的發生發展。化療無效組血清CEA 水平明顯較高，提示監測血清CEA 水平有助于DLBCL 患者化療療效評價。研究表明，CEA 作為免疫球蛋白超家族成員，其表達水平升高參與細胞與細胞、細胞與細胞外基質之間的黏附，不僅促進腫瘤的增殖及轉移，還增加其對化療藥物的耐藥性［7-8］。

IL-17主要由Th17細胞分泌，參與自身免疫性疾病、感染及惡性腫瘤等過程［9］。本研究中DLBCL患者血清IL-17 降低。DLBCL 中IL-17 表達下調與微小RNA 的表達調控有關。研究發現，DLBCL 中miR-130b 表達上調通過抑制轉錄活化蛋白1 的磷酸化，促進腫瘤細胞OX40 配體的表達，OX40 配體與Th17細胞表面的OX40 結合并抑制Th17功能，導致IL-17表達降低［10］。本研究中，DLBCL患者血清IL-17 水平與結外受累的器官、淋巴結數目、IPI評分、臨床分期有關，表明IL-17 參與DLBCL 的發生發展。有研究發現，DLBCL 小鼠接種Th17 細胞后，隨著腫瘤的進展，Th17 細胞分泌的IL-17 水平逐漸降低，血管內皮生長因子表達逐漸升高，進而促進腫瘤血管新生及腫瘤細胞的惡性增殖［11］。因此，IL-17可能作為一種腫瘤抑制性細胞因子，在DLBCL 腫瘤免疫中發揮保護性作用。本研究中，化療無效組血清IL-17 水平低，提示IL-17 可反映化療療效。研究表明，干擾素γ 能夠促進Th17 細胞中干擾素調節因子8（IRF8）的表達，IRF8 直接抑制IL-17 的表達［12］，導致p53 蛋白功能障礙，抑制腫瘤細胞凋亡，促進對利妥昔單抗耐藥性的形成［13］。

α2 纖溶酶抑制劑是體內主要的纖溶酶抑制物，占纖溶酶抑制作用的90%，其與纖溶酶以1∶1 比例結合形成PIC。PIC 主要在內皮系統清除，是評價體內纖溶狀況的重要指標。研究發現，DLBCL 等惡性腫瘤患者存在凝血和纖溶系統平衡失調，表現為高凝和纖溶亢進狀態，PIC 是潛在的預后相關分子標志［14］。本研究中，DLBCL 患者血清PIC 水平升高與結外受累的器官、淋巴結數目、IPI評分、臨床分期有關，提示PIC促進DLBCL的發生發展。分析其原因，腫瘤細胞通過分泌大量血管內皮生長因子，增加血管內皮細胞的通透性，內皮系統對PIC 的清除能力降低，導致血清PIC水平升高［15］。此外，DLBCL 患者機體凝血系統激活也可激活纖溶系統，引起血清PIC 水平升高，纖溶系統激活后能夠通過降解腫瘤微環境中的細胞外基質，促進腫瘤細胞增殖、浸潤、遷移，導致腫瘤進展［16］。本研究中，化療無效組血清PIC水平明顯高于化療有效組，表明血清PIC水平有助于反映DLBCL化療療效。其原因可能與PIC能夠促進腫瘤細胞干性及耐藥性有關。研究發現，PIC水平升高作為纖維溶解系統激活的標志，能夠促進腫瘤微環境中髓源性抑制細胞及腫瘤相關成纖維細胞的招募、聚集及活化，通過分泌大量IL-4、轉化生長因子-β 等細胞因子，促進腫瘤細胞發生上皮間質轉化及干性形成，導致腫瘤耐藥［17-18］。因此，血清CEA、IL-17、PIC可能是反映DLBCL患者化療療效的血清標志物。ROC 曲線分析結果亦證實，血清CEA、IL-17、PIC聯合檢測對DLBCL的化療療效具有較高的預測價值。

綜上所述，DLBCL 患者血清CEA、PIC 水平升高，IL-17水平降低，三者水平與結外受累的器官、淋巴結數目、IPI 評分、臨床分期有關，聯合檢測血清CEA、PIC、IL-17有助于DLBCL患者的預后預測。但本研究樣本量有限，并且不同檢測方法的臨界值尚不一致，有待今后擴大樣本量，制定標準的臨界值，進一步深入研究。