低離子聚凝胺法對血液標(biāo)本交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的影響分析

徐強(qiáng) 楊柳

(漢中市中心血站檢驗(yàn)科，陜西 漢中 723000)

血液標(biāo)本交叉配血試驗(yàn)的方法包括鹽水法、酶法、低離子凝聚胺法、抗人球蛋白法等等，其中鹽水法的操作比較簡單，但很難能檢出IgG不完全抗體，難以達(dá)到交叉配血要求的準(zhǔn)確性[1-2]。低離子凝聚胺法是一種靈敏度較高的交叉配血方法，不僅可檢測IgM抗體，還可檢測出出IgG抗體，能夠在較短時(shí)間內(nèi)完成交叉配血，有效提高交叉配血試驗(yàn)的陽性檢出率和準(zhǔn)確性，且具有很好的試驗(yàn)靈敏度和穩(wěn)定性，能夠保證治療過程中輸血的安全[3]。本文主要探討低離子聚凝胺法對血液標(biāo)本交叉配血試驗(yàn)結(jié)果的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年2月至2021年4月在本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行交叉配血的患者114例，根據(jù)隨機(jī)信封1∶1抽簽原則分為研究組與對照組各57例。研究組中，男34例、女33例，年齡(43.81±1.58)歲，體重指數(shù)(23.72±1.47)kg/m2，輸血原因：外在創(chuàng)傷47例、內(nèi)在損傷10例，收縮壓(114.82±10.74)mmHg，舒張壓(70.77±10.75)mmHg；對照組中，男35例、女32例，年齡(43.28±2.22)歲，體重指數(shù)(23.44±1.22)kg/m2，輸血原因：外在創(chuàng)傷45例、內(nèi)在損傷12例，收縮壓(114.99±10.64)mmHg，舒張壓(70.88±10.33)mmHg。納入患者均具有輸血指征；無精神疾病及傳染性疾病。已排除合并有血液疾病患者；妊娠與哺乳期婦女；患有心腦血管疾病及傳染性疾病者；不愿配合試驗(yàn)者。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法 對照組采用鹽水法進(jìn)行交叉配血，取患者的全血標(biāo)本3～5 mL，離心分離血清和紅細(xì)胞，取少量壓積紅細(xì)胞制備成3%～5%紅細(xì)胞鹽水懸液，用相同的方式將供血者紅細(xì)胞也制備成3%～5%紅細(xì)胞鹽水懸液。取潔凈試管2支，1支標(biāo)明主側(cè)管，另1支標(biāo)明次側(cè)管。主側(cè)管加受血者血清2滴，加供血者3%～5%紅細(xì)胞1滴。次側(cè)管加供血者血清2滴，加受血者3%～5%紅細(xì)胞懸液1滴。混勻，以1 000 g離心15 s。輕輕搖動(dòng)試管，觀察結(jié)果。研究組采用低離子聚凝胺法進(jìn)行交叉配血，血液采集方法同紅細(xì)胞分離方法同對照組。選擇珠海貝索生物技術(shù)有限公司的的聚凝胺介質(zhì)試劑盒，取潔凈試管2支，標(biāo)主、次側(cè)，主側(cè)管加受血者血清2滴，加供血者3%～5%紅細(xì)胞懸液1滴，次側(cè)管加供血者血清2滴和受血者3%～5%紅細(xì)胞懸液1滴。各加LIM(低離子溶液)0.65 mL，混合均勻后，再各加Polybrene(凝聚胺)溶液2滴，并混合均勻。1 000 g離心15 s，然后把上清夜倒掉，不要瀝干，讓管底殘留約0.1 mL液體。輕輕搖動(dòng)試管，目測紅細(xì)胞有無凝集，如無凝集，則必須重做。最后加入Resuspending(懸浮液)2滴，輕輕搖動(dòng)試管混合并同時(shí)觀察結(jié)果。

1.3觀察指標(biāo) 陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：紅細(xì)胞凝集，且研究組未消失持續(xù)時(shí)間>1 min。判定與記錄兩組交叉配血試驗(yàn)的穩(wěn)定性與靈敏性。記錄與觀察兩組的檢測時(shí)間。

2 結(jié) 果

2.1紅細(xì)胞凝集陽性率 研究組的紅細(xì)胞凝集陽性率為28.1%(16例)，高于對照組的3.5%(2例)，兩組比較差異顯著(χ2=12.931，P<0.05)。

2.2穩(wěn)定性與靈敏性 研究組的交叉配血試驗(yàn)穩(wěn)定性與靈敏性均高于對照組(χ2=9.314、8.150，P<0.05)。見表1。

表1 兩組交叉配血試驗(yàn)的穩(wěn)定性與靈敏性的比較[n(%)]

2.3試驗(yàn)時(shí)間 研究組的交叉配血試驗(yàn)時(shí)間為(6.77±1.11)min，多于對照組的(4.58±0.35)min(t=8.733，P<0.05)。

3 討 論

輸血治療中最重要的安全環(huán)節(jié)就是配血，若發(fā)生交叉配血失誤，輕則導(dǎo)致輸血的有效性降低，重則發(fā)生溶血，甚或?qū)е禄颊咚劳觯瑸榇舜_保交叉配血的準(zhǔn)確性尤為重要[4]。鹽水法為常用交叉配血試驗(yàn)方法之一，可測出IgM，但是無法準(zhǔn)確測定IgG，影響交叉配血試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性，也存在較高的漏診率。鹽水法雖然操作簡單，檢測時(shí)間比較短，但難以檢出IgG抗體，靈敏度很難達(dá)到交叉配血要求。低離子凝聚胺法屬于一種靈敏度較高的交叉配血方式，其應(yīng)用原理為溶解凝聚胺離子后，產(chǎn)生的正電荷可對紅細(xì)胞唾液酸所帶的負(fù)電荷有中和作用，從而有利于促進(jìn)凝集。并且低離子溶液也加大了抗體抗原間引力，對紅細(xì)胞電位有降低作用，也對特異性凝集有促進(jìn)作用。本文結(jié)果顯示，研究組的紅細(xì)胞凝集陽性率高于對照組(P<0.05)，表明低離子聚凝胺法能提高血液標(biāo)本交叉配血試驗(yàn)的紅細(xì)胞凝集陽性率。

如何確保患者輸血治療的安全性、穩(wěn)定性與便捷性是當(dāng)前研究的重點(diǎn)，交叉配血試驗(yàn)的原理為把受者紅細(xì)胞和血清與供者紅細(xì)胞和血清混合，觀察凝集狀況[5]。在低離子聚凝胺法中，聚凝胺屬于季銨鹽多聚物，其所含有的高價(jià)陽離子可中和紅細(xì)胞表面唾液酸的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞凝聚，也可減少非特異性凝集，從而提高交叉配血試驗(yàn)的準(zhǔn)確性[6]。本研究顯示研究組的交叉配血試驗(yàn)穩(wěn)定性與靈敏性分別為98.2%、98.2%，高于對照組的80.7%和82.5%(P<0.05)；研究組的交叉配血試驗(yàn)時(shí)間多于對照組(P<0.05)。從機(jī)制上分析，聚凝胺是一種陽離子聚合物，可與負(fù)電荷產(chǎn)生中和反應(yīng)，可促進(jìn)血型抗原與紅細(xì)胞相應(yīng)抗體之間的結(jié)合，進(jìn)而可提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確率[7]。檢驗(yàn)人員可根據(jù)主測管和次測管底部混合液凝集反應(yīng)的特點(diǎn)，準(zhǔn)確地判斷出供血者和受血者的紅細(xì)胞狀況，從而提高檢測效率[8]。